Uvod

1.2 Moguće greške tokom farmaceutske analize

1.3 Opšti principi za ispitivanje autentičnosti medicinskih supstanci

1.4 Izvori i uzroci lošeg kvaliteta medicinskih supstanci

1.5 Opšti zahtjevi za ispitivanje čistoće

1.6 Metode farmaceutske analize i njihova klasifikacija

Poglavlje 2. Fizičke metode analize

2.1 Ispitivanje fizičkih svojstava ili mjerenje fizičkih konstanti medicinskih supstanci

2.2 Podešavanje pH medijuma

2.3 Određivanje transparentnosti i zamućenosti rastvora

2.4 Procjena kemijskih konstanti

Poglavlje 3. Hemijske metode analize

3.1 Karakteristike hemijskih metoda analize

3.2 Gravimetrijska (težina) metoda

3.3 Titrimetrijske (volumetrijske) metode

3.4 Gazometrijska analiza

3.5 Kvantitativna elementarna analiza

Poglavlje 4. Fizičko-hemijske metode analize

4.1 Osobine fizičko-hemijskih metoda analize

4.2 Optičke metode

4.3 Metode apsorpcije

4.4 Metode zasnovane na emisiji zračenja

4.5 Metode zasnovane na upotrebi magnetnog polja

4.6 Elektrohemijske metode

4.7 Metode razdvajanja

4.8 Termičke metode analize

Poglavlje 5. Biološke metode analize1

5.1 Biološka kontrola kvaliteta medicinskih proizvoda

5.2 Mikrobiološka kontrola medicinskih proizvoda

Spisak korišćene literature

Uvod

Farmaceutska analiza je nauka o hemijskoj karakterizaciji i merenju biološki aktivnih supstanci u svim fazama proizvodnje: od kontrole sirovina do procene kvaliteta dobijene lekovite supstance, proučavanja njene stabilnosti, utvrđivanja roka trajanja i standardizacije gotovog doznog oblika. Farmaceutska analiza ima svoje specifičnosti koje je razlikuju od drugih vrsta analiza. Ove karakteristike leže u činjenici da se analiziraju supstance različite hemijske prirode: anorganske, organoelementne, radioaktivne, organske jedinjenja od jednostavnih alifatskih do složenih prirodnih biološki aktivnih supstanci. Raspon koncentracija analiziranih supstanci je izuzetno širok. Objekti farmaceutske analize nisu samo pojedinačne ljekovite tvari, već i mješavine koje sadrže različit broj komponenti. Broj lijekova se povećava svake godine. To zahtijeva razvoj novih metoda analize.

Metode farmaceutske analize zahtijevaju sistematsko unapređenje zbog stalnog povećanja zahtjeva za kvalitetom lijekova, a zahtjevi za stepenom čistoće lijekova i njihovim kvantitativnim sadržajem rastu. Stoga je za procjenu kvaliteta lijekova potrebno široko koristiti ne samo kemijske, već i osjetljivije fizičko-hemijske metode.

Postoje visoki zahtjevi za farmaceutskom analizom. Mora biti dosta specifična i osjetljiva, tačna u odnosu na standarde propisane Državnom farmakopejom XI, VFS, FS i drugom naučno-tehničkom dokumentacijom, izvedena u kratkim vremenskim periodima uz korištenje minimalnih količina ispitivanih lijekova i reagensa.

Farmaceutska analiza, ovisno o ciljevima, uključuje različite oblike kontrole kvaliteta lijekova: farmakopejsku analizu, korak po korak kontrolu proizvodnje lijeka, analizu individualno proizvedenih doznih oblika, ekspresnu analizu u ljekarni i biofarmaceutsku analizu.

Sastavni dio farmaceutske analize je farmakopejska analiza. To je skup metoda za proučavanje lijekova i doznih oblika utvrđenih u Državnoj farmakopeji ili drugoj regulatornoj i tehničkoj dokumentaciji (VFS, FS). Na osnovu rezultata dobijenih tokom farmakopejske analize, donosi se zaključak o usklađenosti lijeka sa zahtjevima Globalnog fonda ili druge regulatorne i tehničke dokumentacije. Ako odstupite od ovih zahtjeva, lijek nije dozvoljen za upotrebu.

Zaključak o kvalitetu lijeka može se donijeti samo na osnovu analize uzorka (uzorka). Procedura za njen izbor je navedena ili u privatnom članku ili u opštem članku Globalnog fonda XI (broj 2). Uzorkovanje se vrši samo iz neoštećenih ambalažnih jedinica, zapečaćenih i upakovanih u skladu sa zahtevima normativno-tehničke dokumentacije. U tom slučaju moraju se strogo poštovati zahtjevi za mjere opreza pri radu sa otrovnim i narkotičkim lijekovima, kao i za toksičnost, zapaljivost, opasnost od eksplozije, higroskopnost i druga svojstva lijekova. Da bi se ispitala usklađenost sa zahtjevima normativne i tehničke dokumentacije, provodi se višestepeno uzorkovanje. Broj faza je određen vrstom pakovanja. U posljednjoj fazi (nakon kontrole po izgledu) uzima se uzorak u količini potrebnoj za četiri kompletne fizičko-hemijske analize (ako se uzorak uzima za regulatorne organizacije, onda za šest takvih analiza).

Iz Angro ambalaže uzimaju se spot uzorci, uzeti u jednakim količinama iz gornjeg, srednjeg i donjeg sloja svake ambalažne jedinice. Nakon uspostavljanja homogenosti, svi ovi uzorci se miješaju. Rasuti i viskozni lijekovi uzimaju se uzorkivačem od inertnog materijala. Tečni lijekovi se temeljno miješaju prije uzorkovanja. Ako je to teško izvodljivo, tada se uzimaju točkasti uzorci iz različitih slojeva. Odabir uzoraka gotovih lijekova vrši se u skladu sa zahtjevima privatnih članaka ili kontrolnih uputstava odobrenih od strane Ministarstva zdravlja Ruske Federacije.

Provođenje farmakopejske analize omogućava utvrđivanje autentičnosti lijeka, njegove čistoće i utvrđivanje kvantitativnog sadržaja farmakološki aktivne tvari ili sastojaka uključenih u dozni oblik. Iako svaka od ovih faza ima svoju specifičnu svrhu, one se ne mogu posmatrati izolovano. Oni su međusobno povezani i međusobno se nadopunjuju. Na primjer, tačka topljenja, rastvorljivost, pH vodenog rastvora, itd. su kriteriji za autentičnost i čistoću ljekovite tvari.

Poglavlje 1. Osnovni principi farmaceutske analize

1.1 Kriteriji farmaceutske analize

U različitim fazama farmaceutske analize, ovisno o postavljenim zadacima, koriste se kriteriji kao što su selektivnost, osjetljivost, tačnost, vrijeme utrošeno na izvođenje analize i količina analiziranog lijeka (doznog oblika).

Selektivnost metode je vrlo važna pri analizi mješavina tvari, jer omogućava dobivanje pravih vrijednosti svake od komponenti. Samo selektivne analitičke tehnike omogućavaju određivanje sadržaja glavne komponente u prisustvu produkata raspadanja i drugih nečistoća.

Zahtjevi za tačnost i osjetljivost farmaceutske analize zavise od predmeta i svrhe studije. Prilikom ispitivanja stepena čistoće leka koriste se metode koje su veoma osetljive i omogućavaju da se utvrdi minimalni sadržaj nečistoća.

Prilikom postupne kontrole proizvodnje, kao i prilikom ekspresne analize u ljekarni, faktor vremena utrošen na izvođenje analize igra važnu ulogu. Da biste to učinili, odaberite metode koje omogućavaju da se analiza provede u najkraćim mogućim vremenskim intervalima i istovremeno s dovoljnom preciznošću.

Prilikom kvantitativnog određivanja ljekovite tvari koristi se metoda koja se odlikuje selektivnošću i visokom preciznošću. Zanemaruje se osjetljivost metode, s obzirom na mogućnost izvođenja analize sa velikim uzorkom lijeka.

Mjera osjetljivosti reakcije je granica detekcije. To znači najniži sadržaj pri kojem se, upotrebom ove metode, može detektovati prisustvo analitne komponente sa datom pouzdanošću. Pojam "granica detekcije" uveden je umjesto pojma "minimum otvaranja", koristi se i umjesto pojma "osjetljivost". Na osjetljivost kvalitativnih reakcija utiču faktori kao što su zapremine rastvora reagujućih komponenti, koncentracije reagensa, pH medijuma, temperature, trajanja iskustva.Ovo treba uzeti u obzir pri razvoju metoda za kvalitativnu farmaceutsku analizu.Za utvrđivanje osetljivosti reakcija sve više se koristi indikator apsorpcije (specifični ili molarni) koji se utvrđuje spektrofotometrijskom metodom. U hemijskoj analizi osetljivost se određuje na osnovu vrednosti granice detekcije date reakcije.Fizikohemijske metode se razlikuju analizom visoke osetljivosti.Najosetljivije su radiohemijske i masene spektralne metode, koje omogućavaju određivanje 10 -8 -10 -9% analita, polarografski i fluorimetrijski 10 -6 -10 -9%, osetljivost spektrofotometrijskih metoda je 10 -3 -10 -6%, potenciometrijskih 10 -2%.

Pojam „analitička tačnost“ istovremeno uključuje dva koncepta: ponovljivost i ispravnost dobijenih rezultata. Reproducibilnost karakteriše disperziju rezultata testa u poređenju sa prosečnom vrednošću. Ispravnost odražava razliku između stvarnog i pronađenog sadržaja supstance. Tačnost analize za svaku metodu je različita i zavisi od mnogo faktora: kalibracije mjernih instrumenata, tačnosti vaganja ili mjerenja, iskustva analitičara itd. Tačnost rezultata analize ne može biti veća od tačnosti najmanje preciznog mjerenja.

Fizičko-hemijske ili instrumentalne metode analize

Fizičko-hemijske ili instrumentalne metode analize zasnivaju se na mjerenju, pomoću instrumenata (instrumenata), fizičkih parametara analiziranog sistema, koji nastaju ili se mijenjaju tokom izvođenja analitičke reakcije.

Brzi razvoj fizičko-hemijskih metoda analize uzrokovan je činjenicom da klasične metode hemijske analize (gravimetrija, titrimetrija) više nisu mogle zadovoljiti brojne zahtjeve kemijske, farmaceutske, metalurške, poluvodičke, nuklearne i drugih industrija, što je zahtijevalo povećanje osjetljivost metoda na 10-8 - 10-9%, njihovu selektivnost i brzinu, što bi omogućilo upravljanje tehnološkim procesima na osnovu podataka hemijske analize, kao i njihovo automatsko i daljinsko izvođenje.

Brojne moderne fizikalno-hemijske metode analize omogućavaju istovremeno obavljanje i kvalitativne i kvantitativne analize komponenti u istom uzorku. Tačnost analize savremenih fizičko-hemijskih metoda je uporediva sa preciznošću klasičnih metoda, a kod nekih je, na primer, u kulometriji, znatno veća.

Nedostaci nekih fizičko-hemijskih metoda uključuju visoku cijenu korištenih instrumenata i potrebu za korištenjem standarda. Stoga klasične metode analize još uvijek nisu izgubile na značaju i koriste se tamo gdje nema ograničenja u brzini analize i potrebna je visoka tačnost uz visok sadržaj analizirane komponente.

Klasifikacija fizičko-hemijskih metoda analize

Klasifikacija fizičko-hemijskih metoda analize zasniva se na prirodi izmjerenog fizičkog parametra analiziranog sistema, čija je vrijednost funkcija količine supstance. U skladu s tim, sve fizičko-hemijske metode podijeljene su u tri velike grupe:

Electrochemical;

Optički i spektralni;

Kromatografski.

Elektrohemijske metode analize zasnivaju se na mjerenju električnih parametara: struje, napona, ravnotežnih elektrodnih potencijala, električne provodljivosti, količine električne energije čije su vrijednosti proporcionalne sadržaju tvari u analiziranom objektu.

Optičke i spektralne metode analize zasnivaju se na mjernim parametrima koji karakterišu efekte interakcije elektromagnetnog zračenja sa supstancama: intenzitet zračenja pobuđenih atoma, apsorpcija monokromatskog zračenja, indeks loma svjetlosti, ugao rotacije ravnine polarizovani snop svetlosti itd.

Svi ovi parametri su funkcija koncentracije supstance u analiziranom objektu.

Kromatografske metode su metode za razdvajanje homogenih višekomponentnih smjesa na pojedinačne komponente sorpcijskim metodama u dinamičkim uvjetima. Pod ovim uslovima, komponente su raspoređene između dve faze koje se ne mešaju: pokretnu i stacionarnu. Distribucija komponenti zasniva se na razlici u njihovim koeficijentima raspodjele između mobilne i stacionarne faze, što dovodi do različitih brzina prijenosa ovih komponenti iz stacionarne u mobilnu fazu. Nakon razdvajanja, kvantitativni sadržaj svake komponente može se odrediti različitim metodama analize: klasičnom ili instrumentalnom.

Spektralna analiza molekularne apsorpcije

Spektralna analiza molekularne apsorpcije uključuje spektrofotometrijsku i fotokolorimetrijsku analizu.

Spektrofotometrijska analiza se zasniva na određivanju apsorpcionog spektra ili merenju apsorpcije svetlosti na strogo definisanoj talasnoj dužini, koja odgovara maksimumu apsorpcione krivulje ispitivane supstance.

Fotokolorimetrijska analiza zasniva se na poređenju intenziteta boje ispitivanog obojenog rastvora i standardno obojenog rastvora određene koncentracije.

Molekuli supstance imaju određenu unutrašnju energiju E, čije su komponente:

Energija kretanja elektrona Jegulja smještena u elektrostatičkom polju atomskih jezgara;

Energija vibracije atomskih jezgara u odnosu jedna na drugu E broji;

Energija rotacije molekula E vr

i matematički se izražava kao zbir svih gore navedenih energija:

Štoviše, ako molekula tvari apsorbira zračenje, tada se njena početna energija E 0 povećava za količinu energije apsorbiranog fotona, odnosno:

Iz gornje jednakosti proizlazi da što je valna dužina λ kraća, to je veća frekvencija vibracije, a samim tim i veća E, odnosno energija koja se daje molekuli tvari pri interakciji s elektromagnetnim zračenjem. Stoga će priroda interakcije energije zračenja sa materijom biti različita u zavisnosti od talasne dužine svetlosti λ.

Skup svih frekvencija (valnih dužina) elektromagnetnog zračenja naziva se elektromagnetski spektar. Opseg talasnih dužina je podeljen na regione: ultraljubičasto (UV) približno 10-380 nm, vidljivo 380-750 nm, infracrveno (IR) 750-100000 nm.

Energija koja se molekuli supstance prenosi zračenjem UV i vidljivih delova spektra dovoljna je da izazove promenu elektronskog stanja molekula.

Energija IC zraka je manja, pa je dovoljna samo da izazove promjenu energije vibracijskih i rotacijskih prijelaza u molekulu tvari. Tako se u različitim dijelovima spektra mogu dobiti različite informacije o stanju, svojstvima i strukturi tvari.

Zakoni apsorpcije zračenja

Spektrofotometrijske metode analize zasnovane su na dva osnovna zakona. Prvi od njih je Bouguer-Lambertov zakon, drugi zakon je Beerov zakon. Kombinovani Bouguer-Lambert-Beer zakon ima sljedeću formulaciju:

Apsorpcija monokromatske svjetlosti obojenim rastvorom direktno je proporcionalna koncentraciji supstance koja apsorbuje svetlost i debljini sloja rastvora kroz koji ona prolazi.

Bouguer-Lambert-Beerov zakon je osnovni zakon apsorpcije svjetlosti i leži u osnovi većine fotometrijskih metoda analize. Matematički se to izražava jednačinom:

Veličina lg I / I 0 naziva se optička gustina apsorbujuće supstance i označava se slovima D ili A. Tada se zakon može napisati na sledeći način:

Omjer intenziteta fluksa monokromatskog zračenja koje prolazi kroz ispitni objekt i intenziteta početnog fluksa zračenja naziva se prozirnost, ili transmitantnost, otopine i označava se slovom T: T = I / I 0

Ovaj odnos se može izraziti u procentima. Vrijednost T, koja karakterizira propuštanje sloja debljine 1 cm, naziva se propustljivost. Optička gustina D i propusnost T međusobno su povezani relacijom

D i T su glavne veličine koje karakterišu apsorpciju rastvora date supstance sa određenom koncentracijom na određenoj talasnoj dužini i debljini upijajućeg sloja.

Zavisnost D(C) je linearna, a T(C) ili T(l) je eksponencijalna. Ovo se striktno poštuje samo za monohromatske tokove zračenja.

Vrijednost koeficijenta ekstinkcije K ovisi o načinu izražavanja koncentracije tvari u otopini i debljini upijajućeg sloja. Ako je koncentracija izražena u molovima po litri, a debljina sloja u centimetrima, onda se naziva molarni koeficijent ekstinkcije, označen simbolom ε, i jednak je optičkoj gustoći otopine s koncentracijom od 1 mol/L stavlja se u kivetu sa debljinom sloja od 1 cm.

Vrijednost molarnog koeficijenta apsorpcije svjetlosti ovisi o:

Iz prirode otopljene tvari;

Talasna dužina monokromatske svjetlosti;

Temperature;

Priroda rastvarača.

Razlozi za nepoštivanje Bouguer-Lambert-Beer zakona.

1. Zakon je izveden i vrijedi samo za jednobojno svjetlo, stoga nedovoljna monohromatizacija može uzrokovati odstupanje zakona, i to u većoj mjeri, što je svjetlost manje monohromatska.

2. U rastvorima koji menjaju koncentraciju upijajuće supstance ili njenu prirodu mogu se javiti različiti procesi: hidroliza, jonizacija, hidratacija, asocijacija, polimerizacija, kompleksiranje itd.

3. Apsorpcija svjetlosti rastvora značajno zavisi od pH vrednosti rastvora. Kada se pH otopine promijeni, može se promijeniti sljedeće:

Stepen ionizacije slabog elektrolita;

Oblik postojanja jona, koji dovodi do promjene apsorpcije svjetlosti;

Sastav nastalih obojenih kompleksnih spojeva.

Dakle, zakon vrijedi za jako razrijeđena rješenja, a njegov opseg je ograničen.

Vizuelna kolorimetrija

Intenzitet boje rastvora može se meriti različitim metodama. Među njima su subjektivne (vizualne) kolorimetrijske metode i objektivne, odnosno fotokolorimetrijske.

Vizuelne metode su one u kojima se procjena intenziteta boje ispitne otopine vrši golim okom. U objektivnim metodama kolorimetrijskog određivanja, fotoćelije se koriste umjesto direktnog posmatranja za mjerenje intenziteta boje ispitne otopine. Određivanje se u ovom slučaju provodi u posebnim uređajima - fotokolorimetrima, zbog čega se metoda naziva fotokolorimetrijska.

Vidljive boje:

Svrha proučavanja ljekovitih supstanci je utvrđivanje podobnosti lijeka za medicinsku upotrebu, tj. usklađenost sa svojim regulatornim dokumentom za ovaj lijek.

Farmaceutska analiza je nauka o hemijskoj karakterizaciji i merenju biološki aktivnih supstanci u svim fazama proizvodnje: od kontrole sirovina do procene kvaliteta dobijene lekovite supstance, proučavanja njene stabilnosti, utvrđivanja roka trajanja i standardizacije gotovog doznog oblika. Posebnosti farmaceutske analize su njena svestranost i raznovrsnost supstanci ili njihovih mješavina, uključujući pojedinačne kemijske tvari, složene mješavine bioloških supstanci (proteini, ugljikohidrati, oligopeptidi itd.). Metode analize treba stalno unapređivati ​​i, ako su u UP farmakopeji preovladavale hemijske metode, uključujući kvalitativne reakcije, u sadašnjoj fazi se uglavnom koriste fizičko-hemijske i fizičke metode analize.

Farmaceutska analiza, ovisno o ciljevima, uključuje različite aspekte kontrole kvalitete lijekova:
1. Farmakopejska analiza;
2. Postepena kontrola proizvodnje lijekova;
3. Analiza individualno proizvedenih lijekova.

Glavna i najznačajnija je farmakopejska analiza, tj. analiza lijeka na usklađenost sa standardom – farmakopejskom monografijom ili drugim ND i time potvrda njegove podobnosti. Otuda i zahtjevi za visokom specifičnošću, selektivnošću, tačnošću i pouzdanošću analize.

Zaključak o kvaliteti lijeka može se donijeti samo na osnovu analize uzorka (statistički pouzdanog uzorka). Postupak uzorkovanja je naznačen ili u privatnom članku ili u opštem članku Državnog fonda X1 izd. (br. 2) str.15. Za ispitivanje usklađenosti lijekova sa zahtjevima regulatorne i tehničke dokumentacije, vrši se višestepeno uzorkovanje (uzorci). U višestepenom uzorkovanju, uzorak (uzorak) se formira u fazama i proizvodi u svakoj fazi se biraju nasumično u proporcionalnim količinama od jedinica odabranih u prethodnoj fazi. Broj faza je određen vrstom pakovanja.

1. faza: odabir jedinica pakovanja (kutije, kutije i sl.);
Faza 2: odabir ambalažnih jedinica smještenih u ambalažnim kontejnerima (kutije, boce, limenke, itd.);
Faza 3: odabir proizvoda u primarnoj ambalaži (ampule, boce, konturna ambalaža itd.).

Da biste izračunali izbor količine proizvoda u svakoj fazi, koristite formulu:

Gdje n – broj jedinica pakovanja ove faze.

Specifična procedura za uzorkovanje je detaljno opisana u izdanju Globalnog fonda X1, broj 2. U ovom slučaju, analiza se smatra pouzdanom ako su najmanje četiri uzorka ponovljiva.

Farmaceutski kriterijumi analize

Za različite svrhe analize važni su kriterijumi kao što su selektivnost analize, osetljivost, tačnost, vreme analize i količina ispitivane supstance.

Selektivnost analize je bitna kada se analiziraju kompleksni lijekovi koji se sastoje od nekoliko aktivnih komponenti. U ovom slučaju je vrlo važna selektivnost analize za kvantitativno određivanje svake od tvari.

Zahtjevi za tačnost i osjetljivost zavise od predmeta i svrhe studije. Prilikom ispitivanja čistoće ili nečistoća koriste se visokoosjetljive metode. Za faznu kontrolu proizvodnje važan je faktor vremena utrošen na analizu.

Važan parametar metode analize je granica osjetljivosti metode. Ova granica znači najniži sadržaj pri kojem se određena supstanca može pouzdano otkriti. Najmanje osjetljive su hemijske metode analize i kvalitativne reakcije. Najosjetljivije enzimske i biološke metode koje omogućavaju detekciju pojedinačnih makromolekula tvari. Od onih koje se stvarno koriste, najosetljivije su radiohemijske, katalitičke i fluorescentne metode, koje omogućavaju određivanje do 10 -9%; osjetljivost spektrofotometrijskih metoda 10 -3 -10 -6%; potenciometrijski 10 -2%.

Pojam „analitička tačnost“ istovremeno uključuje dva koncepta: ponovljivost i ispravnost dobijenih rezultata.

Reproducibilnost – karakteriše disperziju rezultata analize u poređenju sa prosečnom vrednošću.

Ispravnost – odražava razliku između stvarnog i pronađenog sadržaja supstance. Tačnost analize zavisi od kvaliteta instrumenata, iskustva analitičara itd. Tačnost analize ne može biti veća od tačnosti najmanje preciznog mjerenja. To znači da ako je tokom titracije tačnost ±0,2 ml plus greška od curenja je takođe ±0,2 ml, tj. ukupno ±0,4 ml, onda kada se potroši 20 ml titranta, greška je 0,2%. Kako se veličina uzorka i količina titranta smanjuju, točnost se smanjuje. Dakle, titrimetrijska analiza omogućava određivanje sa relativnom greškom od ± (0,2-0,3)%. Svaka metoda ima svoju tačnost. Prilikom analize važno je razumjeti sljedeće koncepte:

Teške greške- su pogrešna procena posmatrača ili kršenje tehnike analize. Takvi rezultati se odbacuju kao nepouzdani.

Sistematske greške - odražavaju tačnost rezultata analize. One iskrivljuju rezultate mjerenja, obično u jednom smjeru za određenu konstantnu vrijednost. Sistematske greške se mogu djelimično otkloniti uvođenjem korekcija, kalibracijom uređaja itd.

Slučajne greške - odražavaju ponovljivost rezultata analize. Oni su uzrokovani nekontroliranim varijablama. Aritmetička sredina slučajnih grešaka teži nuli. Stoga je za proračune potrebno koristiti ne rezultate pojedinačnih mjerenja, već prosjek nekoliko paralelnih određivanja.

Apsolutna greška– predstavlja razliku između dobijenog rezultata i prave vrijednosti. Ova greška se izražava u istim jedinicama kao i vrijednost koja se utvrđuje.

Relativna greška definicija je jednaka odnosu apsolutne greške i prave vrijednosti veličine koja se utvrđuje. Obično se izražava u postocima ili razlomcima.

Vrijednosti relativnih grešaka zavise od metode kojom se vrši analiza i šta je supstanca koja se analizira - pojedinačna supstanca i mješavina mnogih komponenti.

Relativna greška pri proučavanju pojedinačnih supstanci spektrofotometrijskom metodom je 2-3%, a IC spektrofotometrijom 5-12%; tečna hromatografija 3-4%; potenciometrija 0,3-1%. Kombinovane metode obično smanjuju točnost analize. Biološke metode su najmanje tačne - njihova relativna greška dostiže 50%.

Metode identifikacije medicinskih supstanci.

Najvažniji pokazatelj pri ispitivanju ljekovitih supstanci je njihova identifikacija ili, kako je uobičajeno u farmakopejskim monografijama, autentičnost. Za utvrđivanje autentičnosti ljekovitih supstanci koriste se brojne metode. Svi osnovni i opšti opisani su u GF X1 izdanju, broj 1. Istorijski gledano, glavni naglasak je bio na hemikalijama, uklj. kvalitativne reakcije u boji koje karakterišu prisustvo određenih jona ili funkcionalnih grupa u organskim jedinjenjima, a istovremeno su se široko koristile i fizičke metode. Moderne farmakopeje stavljaju naglasak na fizičko-hemijske metode.

Fokusirajmo se na glavne fizičke metode.

Prilično stabilna konstanta koja karakterizira supstancu, njenu čistoću i autentičnost je tačka topljenja. Ovaj indikator se široko koristi za standardizaciju ljekovitih supstanci. Metode za određivanje tačke topljenja detaljno su opisane u GF X1, mogli ste i sami da isprobate na laboratorijskim časovima. Čista tvar ima konstantnu tačku topljenja, ali kada joj se dodaju nečistoće, tačka topljenja se obično prilično značajno smanjuje. Ovaj efekat se naziva uzorak mješavine, a uzorak mješavine omogućava da se utvrdi autentičnost lijeka u prisustvu standardnog ili poznatog uzorka. Postoje, međutim, izuzeci, na primjer, racemična sulfokamforna kiselina se topi na višoj temperaturi, a različiti kristalni oblici indometacina se razlikuju po tački topljenja. One. Ova metoda je jedan od pokazatelja koji nam omogućava da okarakteriziramo i čistoću proizvoda i njegovu autentičnost.

Za neke lijekove koristi se indikator kao što je temperatura očvršćavanja. Drugi pokazatelj koji karakterizira supstancu je tačka ključanja ili temperaturna granica destilacije. Ovaj indikator karakterizira tekuće tvari, na primjer, etilni alkohol. Tačka ključanja je manje karakterističan pokazatelj, jako ovisi o atmosferskom tlaku, mogućnosti stvaranja mješavina ili azeotropa i koristi se prilično rijetko.

Među ostalim fizičkim metodama, vrijedno je istaknuti određivanje gustina, viskozitet. Standardne metode analize su opisane u GF X1. Metoda koja karakterizira autentičnost lijeka je i određivanje njegove rastvorljivosti u različitim rastvaračima. Prema GF X1 ed. Ova metoda se karakterizira kao svojstvo koje može poslužiti kao indikativna karakteristika lijeka koji se ispituje. Uz tačku topljenja, topljivost tvari je jedan od parametara kojim se utvrđuje autentičnost i čistoća gotovo svih ljekovitih supstanci. Farmakopeja utvrđuje približnu gradaciju supstanci prema rastvorljivosti od vrlo lako rastvorljivih do praktično nerastvorljivih. U ovom slučaju, smatra se da je supstanca otopljena ako se u propuštenoj svjetlosti u otopini ne uoče čestice supstance.

Fizičko-hemijske metode za utvrđivanje autentičnosti.

Najinformativnije sa stanovišta utvrđivanja autentičnosti supstanci su fizičko-hemijske metode zasnovane na svojstvima molekula supstance da interaguju sa bilo kojim fizičkim faktorima. Fizičko-hemijske metode uključuju:

1. Spektralne metode
UV spektroskopija
Spektroskopija vidljive svjetlosti
IR spektroskopija
Fluorescentna spektroskopija
Atomska apsorpciona spektroskopija
Metode rendgenske analize
Nuklearna magnetna rezonanca
Analiza difrakcije rendgenskih zraka

2. Sorpcijske metode analize
Tankoslojna hromatografija
Gasno-tečna hromatografija
Tečna hromatografija visokih performansi
Elektroforeza
Jonoforeza
Gel hromatografija

3. Masovne metode analize
Masena spektrometrija
Spektrometrija hromatomase

4. Elektrohemijske metode analize
Polarografija
Elektronska paramagnetna rezonanca

5. Upotreba standardnih uzoraka

Razmotrimo ukratko analitičke metode koje se primjenjuju u farmaciji. Sve ove metode analize detaljno će vam pročitati krajem decembra profesor V. I. Myagkikh. Za utvrđivanje autentičnosti ljekovitih tvari koriste se neke spektralne metode. Najpouzdanije je koristiti područje niske frekvencije IR spektroskopije, gdje apsorpcioni pojasevi najpouzdanije odražavaju datu supstancu. Ovo područje se naziva i područje otiska prsta. U pravilu, da bi se potvrdila autentičnost, koristi se poređenje IR spektra uzetih u standardnim uslovima standardnog uzorka i ispitnog uzorka. Podudarnost svih apsorpcionih traka potvrđuje autentičnost lijeka. Upotreba UV i vidljive spektroskopije je manje pouzdana jer priroda spektra nije individualna i odražava samo određeni hromofor u strukturi organskog jedinjenja. Atomska apsorpciona spektroskopija i rendgenska spektroskopija se koriste za analizu neorganskih jedinjenja i identifikaciju hemijskih elemenata. Nuklearna magnetna rezonanca omogućava određivanje strukture organskih spojeva i pouzdana je metoda za potvrdu autentičnosti, međutim, zbog složenosti instrumenata i visoke cijene, koristi se vrlo rijetko i u pravilu samo u istraživačke svrhe. . Fluorescentna spektroskopija je primenljiva samo na određenu klasu supstanci koje fluoresciraju pod uticajem UV zračenja. U ovom slučaju, spektar fluorescencije i spektar ekscitacije fluorescencije su prilično individualni, ali snažno ovise o okruženju u kojem je supstanca otopljena. Ova metoda se češće koristi za kvantitativno određivanje, posebno malih količina, jer je jedna od najosjetljivijih.

Analiza difrakcije rendgenskih zraka najpouzdanija je metoda potvrđivanja strukture tvari; omogućava da se utvrdi tačna kemijska struktura tvari, međutim jednostavno nije prikladna za on-line analizu autentičnosti i koristi se isključivo za naučne svrhe.

Sorpcijske metode analize našle su vrlo široku primjenu u farmaceutskoj analizi. Koriste se za određivanje identiteta, prisutnosti nečistoća i kvantifikacije. O ovim metodama i opremi koju koristi profesor V. I. Myagkikh, regionalni predstavnik Shimadzua, jednog od glavnih proizvođača hromatografske opreme, održat će vam detaljno predavanje. Ove metode se zasnivaju na principu sorpcije-desorpcije supstanci na određenim nosačima u protoku nosača. Ovisno o nosaču i sorbentu, dijele se na tankoslojnu hromatografiju, hromatografiju na tečnoj koloni (analitičku i preparativnu, uključujući HPLC), gasno-tečnu hromatografiju, gel filtraciju i jonoforezu. Posljednje dvije metode se koriste za analizu kompleksnih proteinskih objekata. Značajan nedostatak metoda je njihova relativnost, tj. hromatografija može okarakterisati supstancu i njenu količinu samo u poređenju sa standardnom supstancom. Međutim, treba napomenuti kao značajnu prednost - visoku pouzdanost metode i tačnost, jer u hromatografiji, svaka smjesa mora biti razdvojena na pojedinačne supstance i rezultat analize je upravo pojedinačna supstanca.

Masena spektrometrija i elektrohemijske metode se rijetko koriste za potvrdu autentičnosti.

Posebno mjesto zauzimaju metode za utvrđivanje autentičnosti u poređenju sa standardnim uzorkom. Ova metoda se dosta široko koristi u stranim farmakopejama za određivanje autentičnosti složenih makromolekula, kompleksnih antibiotika, nekih vitamina i drugih tvari koje sadrže posebno kiralne atome ugljika, budući da je utvrđivanje autentičnosti optički aktivne tvari drugim metodama teško ili čak nemoguće. Referentni materijal se mora izraditi i izdati na osnovu izrađene i odobrene farmakopejske monografije. U Rusiji postoji i koristi se samo nekoliko standardnih uzoraka, a najčešće se za analizu koriste tzv. RSO - radni standardni uzorci pripremljeni neposredno prije eksperimenta od poznatih supstanci ili odgovarajućih supstanci.

Hemijske metode autentifikacije.

Utvrđivanje autentičnosti lekovitih supstanci hemijskim metodama koristi se uglavnom za neorganske lekovite supstance, jer Često ne postoje druge metode ili zahtijevaju složenu i skupu opremu. Kao što je već spomenuto, neorganski elementi se lako identificiraju atomskom apsorpcijom ili rendgenskom spektroskopijom. Naše farmakopejske monografije obično koriste metode kemijske autentifikacije. Ove metode se obično dijele na sljedeće:

Reakcije taloženja anjona i kationa. Tipični primjeri su reakcije taloženja natrijevih i kalijevih jona sa (cinkuranil acetatom i vinskom kiselinom), respektivno:

Postoji veliki broj takvih reakcija koje se koriste i o njima će se detaljno govoriti u posebnom dijelu farmaceutske hemije u vezi sa neorganskim supstancama.

Redox reakcije.

Redoks reakcije se koriste za redukciju metala iz oksida. Na primjer, srebro iz njegovog formaldehid oksida (reakcija srebrnog ogledala):

Reakcija oksidacije difenilamina je osnova za ispitivanje autentičnosti nitrata i nitrita:

Reakcije neutralizacije i razgradnje anjona.

Karbonati i bikarbonati pod uticajem mineralnih kiselina tvore ugljičnu kiselinu koja se razlaže do ugljičnog dioksida:

Slično se razlažu nitriti, tiosulfati i amonijeve soli.

Promjene u boji bezbojnog plamena. Natrijumove soli boje plamen žuto, bakar zeleno, kalijum ljubičasto, kalcijum cigla crveno. Ovaj princip se koristi u atomskoj apsorpcionoj spektroskopiji.

Raspadanje supstanci tokom pirolize. Metoda se koristi za preparate joda, arsena i žive. Od onih koji se trenutno koriste, najkarakterističnija reakcija je bazični bizmutov nitrat, koji se zagrijavanjem razlaže u dušikove okside:

Identifikacija organoelementnih ljekovitih supstanci.

Kvalitativna elementarna analiza koristi se za identifikaciju spojeva koji sadrže arsen, sumpor, bizmut, živu, fosfor i halogene u organskom molekulu. Pošto atomi ovih elemenata nisu jonizovani, za njihovu identifikaciju koristi se preliminarna mineralizacija, bilo pirolizom ili, opet, pirolizom sa sumpornom kiselinom. Sumpor se određuje pomoću sumporovodika reakcijom sa kalijum nitroprusidom ili solima olova. Jod se također određuje pirolizom kako bi se oslobodio elementarni jod. Od svih ovih reakcija interesantna je identifikacija arsena, ne toliko kao lijek - oni se praktički ne koriste, već kao metoda kontrole nečistoća, ali o tome kasnije.

Ispitivanje autentičnosti organskih medicinskih supstanci. Hemijske reakcije koje se koriste za ispitivanje autentičnosti organskih ljekovitih tvari mogu se podijeliti u tri glavne grupe:
1. Opće hemijske reakcije organskih jedinjenja;
2. Reakcije stvaranja soli i kompleksnih spojeva;
3. Reakcije koje se koriste za identifikaciju organskih baza i njihovih soli.

Sve ove reakcije su u krajnjoj liniji zasnovane na principima funkcionalne analize, tj. reaktivnog centra molekula, koji, kada reaguje, daje odgovarajući odgovor. Najčešće je to promjena bilo kojeg svojstva tvari: boje, rastvorljivosti, stanja agregacije itd.

Pogledajmo neke primjere korištenja kemijskih reakcija za identifikaciju ljekovitih tvari.

1. Reakcije nitracije i nitroze. Koriste se prilično rijetko, na primjer, za identifikaciju fenobarbitala, fenacetina, dikaina, iako se ovi lijekovi gotovo nikada ne koriste u medicinskoj praksi.

2. Diazotizacija i reakcije kuplovanja dušika. Ove reakcije se koriste za otvaranje primarnih amina. Diazotizirani amin se kombinira s beta-naftolom kako bi se dobila karakteristična crvena ili narandžasta boja.

3. Reakcije halogeniranja. Koristi se za otvaranje alifatskih dvostrukih veza - kada se doda bromna voda, u dvostruku vezu se dodaje brom i otopina postaje bezbojna. Karakteristična reakcija anilina i fenola - kada se tretiraju bromnom vodom, formira se tribromo derivat koji se taloži.

4. Reakcije kondenzacije karbonilnih spojeva. Reakcija uključuje kondenzaciju aldehida i ketona s primarnim aminima, hidroksilaminom, hidrazinom i semikarbazidom:

Nastali azometini (ili Schiffove baze) imaju karakterističnu žutu boju. Reakcija se koristi za identifikaciju, na primjer, sulfonamida. 4-dimetilaminobenzaldehid se koristi kao aldehid.

5. Reakcije oksidativne kondenzacije. U osnovi je proces oksidativnog cijepanja i stvaranja azometinske boje reakcija ninhidrina. Ova reakcija se široko koristi za otkrivanje i fotokolorimetrijsko određivanje α- i β-aminokiselina, u čijoj prisutnosti se pojavljuje intenzivna tamnoplava boja. To je uzrokovano stvaranjem supstituirane soli diketohidriniliden diketohidramina, produkta kondenzacije viška ninhidrina i redukovanog ninhidrina s amonijakom koji se oslobađa tijekom oksidacije ispitivane aminokiseline:

Za otkrivanje fenola koristi se reakcija formiranja triarilmetanskih boja. Dakle, fenoli stupaju u interakciju sa formaldehidom i formiraju boje. Slične reakcije uključuju interakciju resorcinola s ftalnim anhidridom što dovodi do stvaranja fluorescentne boje - fluoresceina.

Koriste se i mnoge druge reakcije.

Od posebnog interesa su reakcije sa stvaranjem soli i kompleksa. Neorganske soli željeza (III), bakra (II), srebra, kobalta, žive (II) i drugih za ispitivanje autentičnosti organskih jedinjenja: karboksilne kiseline, uključujući aminokiseline, derivate barbiturne kiseline, fenole, sulfonamide, neke alkaloide. Formiranje soli i složenih spojeva odvija se prema općoj shemi:

R-COOH + MX = R-COOM + HX

Kompleksiranje amina se odvija na sličan način:

R-NH 2 + X = R-NH 2 ·X

Jedan od najčešćih reagensa u farmaceutskoj analizi je rastvor gvožđe (III) hlorida. U interakciji s fenolima, stvara obojenu otopinu fenoksida; obojeni su plavo ili ljubičasto. Ova reakcija se koristi za otkrivanje fenola ili resorcinola. Međutim, meta-supstituirani fenoli ne stvaraju obojena jedinjenja (timol).

Soli bakra formiraju kompleksna jedinjenja sa sulfonamidima, soli kobalta sa barbituratima. Mnoge od ovih reakcija se također koriste za kvantitativno određivanje.

Identifikacija organskih baza i njihovih soli. Ova grupa metoda se najčešće koristi u gotovim oblicima, posebno u studijama rješenja. Dakle, soli organskih amina, kada se dodaju alkalije, formiraju talog baze (na primjer, otopina papaverin hidrohlorida), i obrnuto, soli organskih kiselina, kada se dodaju mineralne kiseline, formiraju talog organskog jedinjenja. (na primjer, natrijum salicilat). Za identifikaciju organskih baza i njihovih soli široko se koriste takozvani precipitacijski reagensi. Poznato je više od 200 taložnih reagensa koji sa organskim jedinjenjima formiraju jednostavne ili složene soli nerastvorljive u vodi. Najčešće korištena rješenja data su u drugom tomu 11. izdanja Globalnog fonda. Primjeri uključuju:
Scheiblerov reagens – fosfovolframska kiselina;
Pikrinska kiselina
Stifninska kiselina
Pikraminska kiselina

Svi ovi reagensi se koriste za taloženje organskih baza (na primjer, nitroksolina).

Treba napomenuti da se sve ove hemijske reakcije koriste za identifikaciju lekovitih supstanci ne same, već u kombinaciji sa drugim metodama, najčešće fizičko-hemijskim, kao što su hromatografija i spektroskopija. Generalno, potrebno je obratiti pažnju da je problem autentičnosti lekovitih supstanci ključan, jer ova činjenica određuje neškodljivost, sigurnost i djelotvornost lijeka, stoga se ovom pokazatelju mora posvetiti velika pažnja i potvrda autentičnosti tvari jednom metodom nije dovoljna.

Opšti zahtjevi za ispitivanje čistoće.

Drugi jednako važan pokazatelj kvaliteta lijeka je čistoća. Svi lijekovi, bez obzira na način njihove pripreme, testirani su na čistoću. U tom slučaju se utvrđuje sadržaj nečistoća u lijeku. Nečistoće se grubo mogu podijeliti u dvije grupe: prvo, nečistoće koje imaju farmakološki učinak na organizam; drugo, nečistoće, što ukazuje na stepen prečišćavanja supstance. Potonji ne utječu na kvalitetu lijeka, ali u velikim količinama smanjuju njegovu dozu i, shodno tome, smanjuju aktivnost lijeka. Stoga sve farmakopeje postavljaju određena ograničenja za ove nečistoće u lijekovima. Dakle, glavni kriterij za dobar kvalitet lijeka je odsustvo nečistoća, što je po prirodi nemoguće. Koncept odsustva nečistoća povezan je s granicom detekcije jedne ili druge metode.

Fizička i hemijska svojstva supstanci i njihovih rastvora daju približnu predstavu o prisustvu nečistoća u lekovima i regulišu njihovu pogodnost za upotrebu. Zbog toga se radi procjene dobrog kvaliteta, uz utvrđivanje autentičnosti i utvrđivanje kvantitativnog sadržaja, provodi niz fizičkih i hemijskih ispitivanja kojima se potvrđuje stepen njegove čistoće:

Transparentnost i zamućenost određuje se poređenjem sa standardom zamućenosti, a bistrina se određuje poređenjem sa rastvaračem.

Chroma. Promjena stepena boje može biti uzrokovana:
a) prisustvo stranih obojenih nečistoća;
b) hemijska promena u samoj supstanci (oksidacija, interakcija sa Me +3 i +2, ili drugi hemijski procesi koji se javljaju sa stvaranjem obojenih proizvoda. Na primer:

Rezorcinol postaje žut tokom skladištenja usled oksidacije pod uticajem atmosferskog kiseonika da bi se formirali kinoni. U prisustvu, na primjer, soli željeza, salicilna kiselina dobiva ljubičastu boju zbog stvaranja salicilata željeza.

Procjena boje se vrši na osnovu rezultata poređenja glavnog eksperimenta sa standardima boja, a bezbojnost se utvrđuje poređenjem sa rastvaračem.

Vrlo često se za otkrivanje nečistoća organskih tvari koristi test zasnovan na njihovoj interakciji s koncentriranom sumpornom kiselinom, koja može djelovati kao oksidant ili dehidratant. Kao rezultat ovakvih reakcija nastaju obojeni proizvodi.Intenzitet dobijene boje ne bi trebao biti veći od odgovarajućeg standarda boje.

Određivanje stepena bjeline praškastih lijekova– fizička metoda koja je prvi put uključena u Državni fond X1. Stepen bjeline (nijanse) čvrstih ljekovitih supstanci može se procijeniti različitim instrumentalnim metodama na osnovu spektralnih karakteristika svjetlosti reflektirane od uzorka. Za to se koriste koeficijenti refleksije kada se uzorak osvjetljava bijelom svjetlošću primljenom iz posebnog izvora, sa spektralnom distribucijom ili propuštenom kroz svjetlosne filtere (sa maksimalnom transmisijom od 614 nm (crveno) ili 439 nm (plavo)). Također možete mjeriti refleksiju svjetlosti koja prolazi kroz zeleni filter.

Preciznija procjena bjeline ljekovitih supstanci može se izvršiti pomoću refleksionih spektrofotometara. Vrijednost stepena bjeline i stepena blještavila su karakteristike kvaliteta bijelog i bijelog sa ljekovitim nijansama. Njihove dozvoljene granice su regulisane u privatnim člancima.

Određivanje kiselosti, alkalnosti, pH.

Promjena ovih pokazatelja je zbog:
a) promena u hemijskoj strukturi same lekovite supstance:

b) interakcija lijeka sa posudom, na primjer, prekoračenje dozvoljenih granica alkalnosti u rastvoru novokaina zbog ispiranja stakla;
c) apsorpcija gasovitih produkata (CO 2, NH 3) iz atmosfere.

Utvrđivanje kvalitete lijekova na osnovu ovih pokazatelja provodi se na nekoliko načina:

a) promjenom boje indikatora, na primjer, primjesa mineralnih kiselina u bornoj kiselini određuje se metil crvenim, koje ne mijenja boju od djelovanja slabe borne kiseline, ali postaje ružičasto ako sadrži nečistoće minerala kiseline.

b) titrimetrijska metoda - na primjer, da bi se utvrdila dozvoljena granica sadržaja jodovodične kiseline koja nastaje tokom skladištenja 10% alkoholnog rastvora I 2, titracija se vrši alkalijom (ne više od 0,3 ml 0,1 mol/l NaOH po zapremini titranta). (Rastvor formaldehida - titriran alkalijom u prisustvu fenolftaleina).

U nekim slučajevima, GF postavlja volumen titranta kako bi se odredila kiselost ili alkalnost.

Ponekad se uzastopno dodaju dvije titrirane otopine: prvo kiselina, a zatim alkalija.

c) određivanjem pH vrednosti - za određeni broj lekova (i obavezno za sve rastvore za injekcije), prema NTD predviđeno je određivanje pH vrednosti.

Tehnike pripreme tvari pri proučavanju kiselosti, alkalnosti, pH

1. Priprema rastvora određene koncentracije navedene u tehničkoj dokumentaciji (za supstance rastvorljive u vodi)
2. Za one netopive u vodi pripremite suspenziju određene koncentracije i odredite kiselo-bazna svojstva filtrata.
3. Za tečne preparate koji se ne mešaju sa vodom, promućkati sa vodom, zatim odvojiti vodeni sloj i odrediti njegova kiselinsko-bazna svojstva.
4. Za nerastvorljive čvrste materije i tečnosti, određivanje se može izvršiti direktno u suspenziji (ZnO)

Približno pH vrijednost (do 0,3 jedinice) može se odrediti pomoću indikatorskog papira ili univerzalnog indikatora.

Kolorimetrijska metoda temelji se na svojstvu indikatora da mijenjaju svoju boju pri određenim pH rasponima. Za izvođenje testova koriste se puferske otopine sa konstantnom koncentracijom vodikovih jona, koji se međusobno razlikuju za pH vrijednost od 0,2. Ista količina (2-3 kapi) indikatora dodaje se u niz takvih otopina i u ispitni rastvor. Usklađivanjem boje s jednom od puferskih otopina, procjenjuje se pH vrijednost ispitne otopine.

Određivanje isparljivih materija i vode.

Isparljive tvari mogu ući u lijekove ili kao rezultat lošeg pročišćavanja od otapala ili međuprodukta, ili kao rezultat nakupljanja produkata raspadanja. Voda u ljekovitoj tvari može biti sadržana u obliku kapilare, apsorbirano vezana, kemijski vezana (hidrat i kristalni hidrat) ili slobodna.

Za određivanje hlapljivih tvari i vode koriste se metode sušenja, destilacije i titracije Fischerovom otopinom.

Metoda sušenja. Metoda se koristi za određivanje gubitka težine tokom sušenja. Gubici mogu nastati zbog sadržaja higroskopne vlage i isparljivih tvari u tvari. Sušiti u boci do konstantne težine na određenoj temperaturi. Češće se tvar drži na temperaturi od 100-105 ºS, ali uvjeti za sušenje i dovođenje do konstantne mase mogu biti različiti.

Određivanje hlapljivih supstanci može se za neke proizvode provesti kalcinacijom. Supstanca se zagrijava u lončiću dok se isparljive tvari potpuno ne uklone. zatim postepeno povećavajte temperaturu dok se potpuno ne kalcinira na crvenoj vatri. Na primjer, GFC reguliše određivanje nečistoća natrijum karbonata u medicinskoj supstanci natrijum bikarbonatu metodom kalcinacije. Natrijum bikarbonat se razlaže na natrijum karbonat, ugljični dioksid i vodu:

Teoretski, gubitak težine je 36,9%. Prema GFC-u, gubitak težine bi trebao biti najmanje 36,6%. Razlika između teoretskog i gubitka mase naznačenog u GPC-u određuje dopuštenu granicu za nečistoće natrijevog karbonata u tvari.

Metoda destilacije u GF 11 se zove "Određivanje vode", omogućava vam da odredite higroskopnu vodu. Ova metoda se zasniva na fizičkom svojstvu para dviju tekućina koje se ne miješaju. Mješavina vode i organskog rastvarača destiluje se na nižoj temperaturi od bilo koje tečnosti. GPC1 preporučuje upotrebu toluena ili ksilena kao organskog rastvarača. Sadržaj vode u ispitivanoj supstanci određuje se njenom zapreminom u prijemniku nakon završetka procesa destilacije.

Titracija sa Fischerovim reagensom. Metoda vam omogućava da odredite ukupan sadržaj slobodne i kristalne hidratne vode u organskim i neorganskim tvarima i otapalima. Prednost ove metode je njena brzina i selektivnost u odnosu na vodu. Fischerova otopina je otopina sumpor-dioksida, joda i piridina u metanolu. Nedostaci metode, pored potrebe za striktnim pridržavanjem nepropusnosti, uključuju nemogućnost određivanja vode u prisustvu tvari koje reagiraju sa komponentama reagensa.

Definicija pepela.

Sadržaj pepela je uzrokovan mineralnim nečistoćama koje se pojavljuju u organskim materijama tokom procesa dobijanja pomoćnih materijala i opreme (prvenstveno metalnih katjona) iz početnih proizvoda, tj. karakterizira prisustvo anorganskih nečistoća u organskim tvarima.

A) Totalni pepeo– određena rezultatima sagorevanja (pepeo, mineralizacija) na visokoj temperaturi, karakteriše zbir svih neorganskih nečistoća.

Sastav pepela:
Karbonati: CaCO 3, Na 2 CO 3, K 2 CO 3, PbCO 3
Oksidi: CaO, PbO
Sulfati: CaSO 4
Hloridi: CaCl 2
Nitrati: NaNO 3

Prilikom dobijanja lijekova iz biljnog materijala, mineralne nečistoće mogu biti uzrokovane kontaminacijom biljaka prašinom, apsorpcijom mikroelemenata i anorganskih spojeva iz tla, vode itd.

b) Pepeo, nerastvorljiv u hlorovodoničkoj kiselini, dobijen nakon tretiranja ukupnog pepela razblaženom HCl. Hemijski sastav pepela su hloridi teških metala (AgCl, HgCl 2, Hg 2 Cl 2), tj. visoko toksične nečistoće.

V) Sulfatni pepeo– Sulfatni pepeo se utvrđuje prilikom procene dobrog kvaliteta mnogih organskih materija. Karakterizira Mn +n nečistoće u stabilnom sulfatnom obliku. Dobijeni sulfatni pepeo (Fe 3 (SO 4) 2, PbSO 4, CaSO 4) se koristi za naknadno određivanje nečistoća teških metala.

Nečistoće neorganskih jona – S1 –, SO 4 -2, NN 4 +, Ca +2, Fe +3(+2), Rv +2, As +3(+5)

Neprihvatljive nečistoće:
a) toksične nečistoće (CN nečistoća u jodu),
b) ima antagonistički učinak (Na i K, Mg i Ca)

Odsustvo nedozvoljenih nečistoća u medicinskoj supstanci utvrđuje se negativnom reakcijom sa odgovarajućim reagensima. U ovom slučaju poređenje se vrši sa dijelom otopine u koju su dodani svi reagensi, osim glavnog koji otvara ovu nečistoću (kontrolni eksperiment). Pozitivna reakcija ukazuje na prisutnost nečistoće i lošu kvalitetu lijeka.

Prihvatljive nečistoće – nečistoće koje ne utiču na farmakološko dejstvo i čiji je sadržaj dozvoljen u malim količinama utvrđenim tehničkim propisima.

Za utvrđivanje dopuštene granice sadržaja ionskih nečistoća u lijekovima koriste se standardne otopine koje sadrže odgovarajući ion u određenoj koncentraciji.

Neke medicinske supstance se ispituju na prisustvo nečistoća metodom titracije, na primer, određivanjem nečistoće norsulfazola u leku ftalazol. Nečistoća norsulfazola u ftalazolu se kvantitativno određuje nitritometrijom. Za titriranje 1 g ftalazola ne treba potrošiti više od 0,2 ml 0,1 mol/l NaNO2.

Opći zahtjevi za reakcije koje se koriste pri ispitivanju na prihvatljive i neprihvatljive nečistoće:
1. osjetljivost,
2. specifičnost,
3. ponovljivost korištene reakcije.

U reflektiranoj svjetlosti na mat bijeloj pozadini uočavaju se rezultati reakcija koje se javljaju sa stvaranjem obojenih proizvoda, a bijeli precipitati u obliku zamućenja i opalescencije se uočavaju u propuštenom svjetlu na crnoj pozadini.

Instrumentalne metode za određivanje nečistoća.

Razvojem analitičkih metoda, zahtjevi za čistoćom ljekovitih supstanci i doznih oblika stalno se povećavaju. U modernim farmakopejama, uz razmatrane metode, koriste se različite instrumentalne metode, zasnovane na fizičko-hemijskim, hemijskim i fizičkim svojstvima supstanci. Upotreba UV i vidljive spektroskopije rijetko daje pozitivne rezultate i to zbog činjenice da je struktura nečistoća, posebno organskih lijekova, obično drugačija. Oni su bliski strukturi samog lijeka, pa se spektri apsorpcije malo razlikuju, a koncentracija nečistoće je obično desetine puta niža od glavne tvari, što čini metode diferencijalne analize malo korisnim i omogućava procjenu nečistoće. samo približno, tj. kako se obično naziva semi-kvantitativno. Rezultati su nešto bolji ako jedna od supstanci, posebno nečistoća, formira kompleksno jedinjenje, a druga ne, tada se maksimumi spektra značajno razlikuju i već je moguće kvantitativno odrediti nečistoće.

Poslednjih godina u preduzećima su se pojavili IR-Furier uređaji koji omogućavaju određivanje sadržaja glavne supstance i nečistoća, posebno vode, bez uništavanja uzorka, ali je njihova upotreba otežana zbog visoke cene uređaja i nedostatak standardizovanih metoda analize.

Odlični rezultati u određivanju nečistoća mogući su kada nečistoća fluorescira pod uticajem UV zračenja. Tačnost ovakvih analiza je vrlo visoka, kao i njihova osjetljivost.

Široko se koristi za ispitivanje čistoće i kvantitativno određivanje nečistoća kako u ljekovitim supstancama (supstancama) tako i u doznim oblicima, što možda nije ništa manje važno, jer Prilikom skladištenja lekova nastaju mnoge nečistoće dobijene hromatografskim metodama: HPLC, TLC, GLC.

Ove metode omogućavaju da se nečistoće određuju kvantitativno, a svaka od nečistoća pojedinačno, za razliku od drugih metoda. Metode HPLC i GLC hromatografije će biti detaljnije obrađene u predavanju prof. Myagkikh V.I. Fokusiraćemo se samo na tankoslojnu hromatografiju. Metodu tankoslojne hromatografije otkrio je ruski naučnik Cvet i u početku je postojala kao hromatografija na papiru. Tankoslojna hromatografija (TLC) zasniva se na razlici u brzini kretanja komponenti analizirane mešavine u ravnom tankom sloju sorbenta kada se kroz njega kreće rastvarač (eluent). Sorbenti su silika gel, aluminijum oksid i celuloza. Poliamid, eluensi su organski rastvarači različitih polariteta ili njihove međusobne mješavine, a ponekad i s otopinama kiselina ili alkalija i soli. Mehanizam razdvajanja određen je koeficijentima raspodjele između sorbenta i tekuće faze ispitivane supstance, što je zauzvrat povezano sa mnogim, uključujući hemijska i fizičko-hemijska svojstva supstanci.

U TLC-u, površina aluminijske ili staklene ploče se premazuje suspenzijom sorbenta, suši na zraku i aktivira kako bi se uklonili tragovi rastvarača (vlaga). U praksi se obično koriste industrijske ploče sa fiksnim slojem sorbenta. Kapi analiziranog rastvora zapremine 1-10 μl se nanose na sloj sorbenta. Rub ploče je uronjen u rastvarač. Eksperiment se izvodi u posebnoj komori - staklenoj posudi zatvorenoj poklopcem. Rastvarač se kreće kroz sloj pod dejstvom kapilarnih sila. Moguće je istovremeno odvajanje nekoliko različitih mješavina. Da biste povećali efikasnost odvajanja, koristite višestruka eluiranja ili u okomitom smjeru sa istim ili različitim eluentom.

Nakon završetka procesa, ploča se suši na vazduhu i na različite načine se određuje položaj hromatografskih zona komponenti, na primer, zračenjem UV zračenjem, prskanjem reagensima za bojenje i čuvanjem u jodnoj pari. U rezultujućoj distributivnoj slici (hromatogramu), hromatografske zone komponenti smeše su locirane u obliku mrlja u skladu sa njihovom sposobnošću sorbovanja u datom sistemu.

Položaj hromatografskih zona na hromatogramu karakteriše vrednost Rf. koji je jednak omjeru puta l i koji prelazi i-ta komponenta od početne tačke do puta Vp R f = l i / l.

Vrijednost R f zavisi od koeficijenta distribucije (adsorpcije) K i i omjera volumena pokretne (V p) i stacionarne (V n) faze.

Na odvajanje u TLC-u utiče niz faktora - sastav i svojstva eluenta, priroda, disperzija i poroznost sorbenta, temperatura, vlažnost, veličina i debljina sloja sorbenta i dimenzije komore. Standardizacija eksperimentalnih uslova omogućava postavljanje Rf sa relativnom standardnom devijacijom od 0,03.

Identifikacija komponenti smjese se vrši pomoću Rf vrijednosti. Kvantitativno određivanje supstanci u zonama može se izvršiti direktno na sloju sorbenta po površini hromatografske zone, intenzitetu fluorescencije komponente ili njenoj povezanosti sa odgovarajućim reagensom, ili radiohemijskim metodama. Instrumenti za automatsko skeniranje se također koriste za mjerenje apsorpcije, transmisije, refleksije svjetlosti ili radioaktivnosti hromatografskih zona. Odvojene zone se mogu ukloniti sa ploče zajedno sa slojem sorbenta, komponenta se može desorbovati u rastvarač, a rastvor se može analizirati spektrofotometrijski. Koristeći TLC, moguće je odrediti supstance u količinama od 10 -9 do 10 -6; greška u određivanju je najmanje 5-10%.

Fizičko-hemijske ili instrumentalne metode analize

Fizičko-hemijske ili instrumentalne metode analize zasnivaju se na mjerenju, pomoću instrumenata (instrumenata), fizičkih parametara analiziranog sistema, koji nastaju ili se mijenjaju tokom izvođenja analitičke reakcije.

Brzi razvoj fizičko-hemijskih metoda analize uzrokovan je činjenicom da klasične metode hemijske analize (gravimetrija, titrimetrija) više nisu mogle zadovoljiti brojne zahtjeve kemijske, farmaceutske, metalurške, poluvodičke, nuklearne i drugih industrija, što je zahtijevalo povećanje osjetljivost metoda na 10-8 - 10-9%, njihovu selektivnost i brzinu, što bi omogućilo upravljanje tehnološkim procesima na osnovu podataka hemijske analize, kao i njihovo automatsko i daljinsko izvođenje.

Brojne moderne fizikalno-hemijske metode analize omogućavaju istovremeno obavljanje i kvalitativne i kvantitativne analize komponenti u istom uzorku. Tačnost analize savremenih fizičko-hemijskih metoda je uporediva sa preciznošću klasičnih metoda, a kod nekih je, na primer, u kulometriji, znatno veća.

Nedostaci nekih fizičko-hemijskih metoda uključuju visoku cijenu korištenih instrumenata i potrebu za korištenjem standarda. Stoga klasične metode analize još uvijek nisu izgubile na značaju i koriste se tamo gdje nema ograničenja u brzini analize i potrebna je visoka tačnost uz visok sadržaj analizirane komponente.

Klasifikacija fizičko-hemijskih metoda analize

Klasifikacija fizičko-hemijskih metoda analize zasniva se na prirodi izmjerenog fizičkog parametra analiziranog sistema, čija je vrijednost funkcija količine supstance. U skladu s tim, sve fizičko-hemijske metode podijeljene su u tri velike grupe:

Electrochemical;

Optički i spektralni;

Kromatografski.

Elektrohemijske metode analize zasnivaju se na mjerenju električnih parametara: struje, napona, ravnotežnih elektrodnih potencijala, električne provodljivosti, količine električne energije čije su vrijednosti proporcionalne sadržaju tvari u analiziranom objektu.

Optičke i spektralne metode analize zasnivaju se na mjernim parametrima koji karakterišu efekte interakcije elektromagnetnog zračenja sa supstancama: intenzitet zračenja pobuđenih atoma, apsorpcija monokromatskog zračenja, indeks loma svjetlosti, ugao rotacije ravnine polarizovani snop svetlosti itd.

Svi ovi parametri su funkcija koncentracije supstance u analiziranom objektu.

Kromatografske metode su metode za razdvajanje homogenih višekomponentnih smjesa na pojedinačne komponente sorpcijskim metodama u dinamičkim uvjetima. Pod ovim uslovima, komponente su raspoređene između dve faze koje se ne mešaju: pokretnu i stacionarnu. Distribucija komponenti zasniva se na razlici u njihovim koeficijentima raspodjele između mobilne i stacionarne faze, što dovodi do različitih brzina prijenosa ovih komponenti iz stacionarne u mobilnu fazu. Nakon razdvajanja, kvantitativni sadržaj svake komponente može se odrediti različitim metodama analize: klasičnom ili instrumentalnom.

Spektralna analiza molekularne apsorpcije

Spektralna analiza molekularne apsorpcije uključuje spektrofotometrijsku i fotokolorimetrijsku analizu.

Spektrofotometrijska analiza se zasniva na određivanju apsorpcionog spektra ili merenju apsorpcije svetlosti na strogo definisanoj talasnoj dužini, koja odgovara maksimumu apsorpcione krivulje ispitivane supstance.

Fotokolorimetrijska analiza zasniva se na poređenju intenziteta boje ispitivanog obojenog rastvora i standardno obojenog rastvora određene koncentracije.

Molekuli supstance imaju određenu unutrašnju energiju E, čije su komponente:

Energija kretanja elektrona Jegulja smještena u elektrostatičkom polju atomskih jezgara;

Energija vibracije atomskih jezgara u odnosu jedna na drugu E broji;

Energija rotacije molekula E vr

i matematički se izražava kao zbir svih gore navedenih energija:

Štoviše, ako molekula tvari apsorbira zračenje, tada se njena početna energija E 0 povećava za količinu energije apsorbiranog fotona, odnosno:

Iz gornje jednakosti proizlazi da što je valna dužina λ kraća, to je veća frekvencija vibracije, a samim tim i veća E, odnosno energija koja se daje molekuli tvari pri interakciji s elektromagnetnim zračenjem. Stoga će priroda interakcije energije zračenja sa materijom biti različita u zavisnosti od talasne dužine svetlosti λ.

Skup svih frekvencija (valnih dužina) elektromagnetnog zračenja naziva se elektromagnetski spektar. Opseg talasnih dužina je podeljen na regione: ultraljubičasto (UV) približno 10-380 nm, vidljivo 380-750 nm, infracrveno (IR) 750-100000 nm.

Energija koja se molekuli supstance prenosi zračenjem UV i vidljivih delova spektra dovoljna je da izazove promenu elektronskog stanja molekula.

Energija IC zraka je manja, pa je dovoljna samo da izazove promjenu energije vibracijskih i rotacijskih prijelaza u molekulu tvari. Tako se u različitim dijelovima spektra mogu dobiti različite informacije o stanju, svojstvima i strukturi tvari.

Zakoni apsorpcije zračenja

Spektrofotometrijske metode analize zasnovane su na dva osnovna zakona. Prvi od njih je Bouguer-Lambertov zakon, drugi zakon je Beerov zakon. Kombinovani Bouguer-Lambert-Beer zakon ima sljedeću formulaciju:

Apsorpcija monokromatske svjetlosti obojenim rastvorom direktno je proporcionalna koncentraciji supstance koja apsorbuje svetlost i debljini sloja rastvora kroz koji ona prolazi.

Bouguer-Lambert-Beerov zakon je osnovni zakon apsorpcije svjetlosti i leži u osnovi većine fotometrijskih metoda analize. Matematički se to izražava jednačinom:

ili

Vrijednost log I /I 0 naziva se optička gustina apsorbirajuće tvari i označava se slovima D ili A. Tada se zakon može napisati na sljedeći način:

Omjer intenziteta fluksa monokromatskog zračenja koje prolazi kroz ispitni objekt i intenziteta početnog fluksa zračenja naziva se prozirnost, ili transmitantnost, otopine i označava se slovom T: T = I /I 0

Ovaj odnos se može izraziti u procentima. Vrijednost T, koja karakterizira propuštanje sloja debljine 1 cm, naziva se propustljivost. Optička gustina D i propusnost T međusobno su povezani relacijom

D i T su glavne veličine koje karakterišu apsorpciju rastvora date supstance sa određenom koncentracijom na određenoj talasnoj dužini i debljini upijajućeg sloja.

Zavisnost D(C) je linearna, a T(C) ili T(l) je eksponencijalna. Ovo se striktno poštuje samo za monohromatske tokove zračenja.

Vrijednost koeficijenta ekstinkcije K ovisi o načinu izražavanja koncentracije tvari u otopini i debljini upijajućeg sloja. Ako je koncentracija izražena u molovima po litri, a debljina sloja u centimetrima, onda se naziva molarni koeficijent ekstinkcije, označen simbolom ε, i jednak je optičkoj gustoći otopine s koncentracijom od 1 mol/L stavlja se u kivetu sa debljinom sloja od 1 cm.

Vrijednost molarnog koeficijenta apsorpcije svjetlosti ovisi o:

Iz prirode otopljene tvari;

Talasna dužina monokromatske svjetlosti;

Temperature;

Priroda rastvarača.

Razlozi za nepoštivanje Bouguer-Lambert-Beer zakona.

1. Zakon je izveden i vrijedi samo za jednobojno svjetlo, stoga nedovoljna monohromatizacija može uzrokovati odstupanje zakona, i to u većoj mjeri, što je svjetlost manje monohromatska.

2. U rastvorima koji menjaju koncentraciju upijajuće supstance ili njenu prirodu mogu se javiti različiti procesi: hidroliza, jonizacija, hidratacija, asocijacija, polimerizacija, kompleksiranje itd.

3. Apsorpcija svjetlosti rastvora značajno zavisi od pH vrednosti rastvora. Kada se pH otopine promijeni, može se promijeniti sljedeće:

Stepen ionizacije slabog elektrolita;

Oblik postojanja jona, koji dovodi do promjene apsorpcije svjetlosti;

Sastav nastalih obojenih kompleksnih spojeva.

Dakle, zakon vrijedi za jako razrijeđena rješenja, a njegov opseg je ograničen.

Vizuelna kolorimetrija

Intenzitet boje rastvora može se meriti različitim metodama. Među njima su subjektivne (vizualne) kolorimetrijske metode i objektivne, odnosno fotokolorimetrijske.

Vizuelne metode su one u kojima se procjena intenziteta boje ispitne otopine vrši golim okom. U objektivnim metodama kolorimetrijskog određivanja, fotoćelije se koriste umjesto direktnog posmatranja za mjerenje intenziteta boje ispitne otopine. Određivanje se u ovom slučaju provodi u posebnim uređajima - fotokolorimetrima, zbog čega se metoda naziva fotokolorimetrijska.

Vidljive boje:

Vizuelne metode uključuju:

Metoda standardne serije;

Kolorimetrijska titracija ili metoda umnožavanja;

Metoda izjednačavanja.

Metoda standardne serije. Prilikom analize metodom standardnih serija, intenzitet boje analiziranog obojenog rastvora upoređuje se sa bojama serije posebno pripremljenih standardnih rastvora (sa istom debljinom sloja).

Metoda kolorimetrijske titracije (duplikacije) zasniva se na poređenju boje analiziranog rastvora sa bojom drugog rastvora – kontrolnog. Kontrolna otopina sadrži sve komponente ispitne otopine, osim tvari koja se određuje, i sve reagense korištene za pripremu uzorka. Iz birete joj se dodaje standardni rastvor supstance koja se određuje. Kada se ovoj otopini doda toliko da su intenziteti boje kontrolne i analizirane otopine jednaki, smatra se da analizirana otopina sadrži istu količinu analita kao što je unesena u kontrolnu otopinu.

Metoda izjednačavanja razlikuje se od prethodno opisanih vizualnih kolorimetrijskih metoda u kojima se sličnost boja standardne i ispitne otopine postiže promjenom njihove koncentracije. U metodi izjednačavanja sličnost boja postiže se promjenom debljine slojeva obojenih otopina. U tu svrhu, pri određivanju koncentracije tvari, koriste se drenažni i imerzioni kolorimetri.

Prednosti vizuelnih metoda kolorimetrijske analize:

Tehnika određivanja je jednostavna, nema potrebe za složenom skupom opremom;

Oko posmatrača može procijeniti ne samo intenzitet, već i nijanse boja rješenja.

Nedostaci:

Potrebno je pripremiti standardni rastvor ili seriju standardnih rastvora;

Nemoguće je uporediti intenzitet boje rastvora u prisustvu drugih obojenih supstanci;

Kada se dugo vremena poredi intenzitet boje očiju osobe, osoba se umori i greška u određivanju se povećava;

Ljudsko oko nije tako osjetljivo na male promjene u optičkoj gustoći kao fotonaponski uređaji, što onemogućuje otkrivanje razlika u koncentraciji do oko pet relativnih postotaka.

Fotoelektrokolorimetrijske metode

Fotoelektrokolorimetrija se koristi za mjerenje apsorpcije svjetlosti ili propusnosti obojenih otopina. Instrumenti koji se koriste u tu svrhu nazivaju se fotoelektrični kolorimetri (PEC).

Fotoelektrične metode za mjerenje intenziteta boja uključuju upotrebu fotoćelija. Za razliku od instrumenata u kojima se poređenja boja vrše vizualno, u fotoelektrokolorimetrima prijemnik svjetlosne energije je uređaj - fotoćelija. Ovaj uređaj pretvara svjetlosnu energiju u električnu energiju. Fotoćelije omogućavaju kolorimetrijska određivanja ne samo u vidljivom, već iu UV i IR području spektra. Mjerenje svjetlosnih tokova pomoću fotoelektričnih fotometara je preciznije i ne ovisi o karakteristikama oka promatrača. Upotreba fotoćelija omogućava automatizaciju određivanja koncentracije supstanci u hemijskoj kontroli tehnoloških procesa. Kao rezultat toga, fotoelektrična kolorimetrija se mnogo više koristi u tvorničkoj laboratorijskoj praksi nego vizualna kolorimetrija.

Na sl. Na slici 1 prikazan je uobičajen raspored čvorova u instrumentima za mjerenje transmisije ili apsorpcije rastvora.

Slika 1 Glavne komponente uređaja za merenje apsorpcije zračenja: 1 - izvor zračenja; 2 - monohromator; 3 - kivete za rastvore; 4 - pretvarač; 5 - indikator signala.

Fotokolorimetri se, u zavisnosti od broja fotoćelija koje se koriste u merenjima, dele u dve grupe: jednosmerni (jednokraki) - uređaji sa jednom fotoćelijom i dvosnopni (dvokraki) - sa dve fotoćelije.

Preciznost merenja dobijena sa FEC sa jednim snopom je niska. U fabričkim i naučnim laboratorijama najčešće se koriste fotonaponske instalacije opremljene sa dve fotoćelije. Dizajn ovih uređaja zasniva se na principu izjednačavanja intenziteta dva svjetlosna snopa pomoću promjenjive prorezane dijafragme, odnosno principu optičke kompenzacije dva svjetlosna toka promjenom otvora zenice dijafragme.

Šematski dijagram uređaja prikazan je na sl. 2. Svjetlost žarulje sa žarnom niti 1 se dijeli na dva paralelna snopa pomoću ogledala 2. Ovi svetlosni snopovi prolaze kroz svetlosne filtere 3, kivete sa rastvorima 4 i padaju na fotoćelije 6 i 6", koje su spojene na galvanometar 8 prema diferencijalnom kolu. Prorezna dijafragma 5 menja intenzitet svetlosnog toka koji pada na fotoćeliju. 6. Fotometrijski neutralni klin 7 služi za ublažavanje svjetlosnog toka koji pada na fotoćeliju od 6".

Fig.2. Dijagram dvosmjernog fotoelektrokolorimetra

Određivanje koncentracije u fotoelektrokolorimetriji

Za određivanje koncentracije analita u fotoelektrokolorimetriji koristi se sljedeće:

Metoda za poređenje optičkih gustoća standardnih i test obojenih otopina;

Metoda određivanja na osnovu prosječne vrijednosti molarnog koeficijenta apsorpcije svjetlosti;

Metoda kalibracione krive;

Aditivna metoda.

Metoda za poređenje optičkih gustoća standardnih i test obojenih rastvora

Za određivanje pripremiti standardnu ​​otopinu analita poznate koncentracije, koja se približava koncentraciji ispitne otopine. Optička gustina ovog rastvora određena je na određenoj talasnoj dužini D fl. Zatim se optička gustina ispitnog rastvora D x određuje na istoj talasnoj dužini i istoj debljini sloja. Poređenjem optičkih gustoća testnog i referentnog rastvora, nalazi se nepoznata koncentracija analita.

Metoda poređenja je primjenjiva za pojedinačne analize i zahtijeva obavezno poštovanje osnovnog zakona apsorpcije svjetlosti.

Metoda kalibracionog grafa. Za određivanje koncentracije tvari ovom metodom pripremite seriju od 5-8 standardnih otopina različitih koncentracija. Prilikom odabira raspona koncentracija standardnih otopina koriste se sljedeći principi:

* mora pokrivati ​​područje mogućih mjerenja koncentracije rastvora koji se proučava;

* optička gustina rastvora za ispitivanje treba da odgovara približno sredini kalibracione krive;

* poželjno je da se u ovom rasponu koncentracija poštuje osnovni zakon apsorpcije svjetlosti, odnosno da graf ovisnosti bude linearan;

* vrijednost optičke gustine mora biti u rasponu od 0,14... 1.3.

Mjeri se optička gustoća standardnih otopina i crta se graf D(C). Određivanjem D x ispitivanog rastvora, C x se nalazi iz kalibracionog grafikona (slika 3).

Ova metoda omogućava određivanje koncentracije tvari čak iu slučajevima kada se ne poštuje osnovni zakon apsorpcije svjetlosti. U ovom slučaju se priprema veliki broj standardnih otopina koje se razlikuju u koncentraciji za najviše 10%.

Rice. 3. Ovisnost optičke gustine otopine o koncentraciji (kalibracijska kriva)

Metoda aditiva je vrsta metode poređenja koja se zasniva na poređenju optičke gustine ispitnog rastvora i istog rastvora sa dodatkom poznate količine supstance koja se utvrđuje.

Koristi se za uklanjanje ometajućeg uticaja stranih nečistoća i za određivanje malih količina analita u prisustvu velikih količina stranih supstanci. Metoda zahtijeva obavezno poštivanje osnovnog zakona apsorpcije svjetlosti.

Spektrofotometrija

Ovo je metoda fotometrijske analize u kojoj se sadržaj supstance određuje njenom apsorpcijom monohromatskog svjetla u vidljivom, UV i IR području spektra. U spektrofotometriji, za razliku od fotometrije, monohromatizaciju ne obezbeđuju svetlosni filteri, već monohromatori, koji omogućavaju da se talasna dužina neprekidno menja. Kao monohromatori koriste se prizme ili difrakcijske rešetke, koje daju znatno veću monohromatičnost svjetlosti od svjetlosnih filtera, pa je tačnost spektrofotometrijskog određivanja veća.

Spektrofotometrijske metode, u poređenju sa fotokolorimetrijskim metodama, omogućavaju rješavanje šireg spektra problema:

* vrši kvantitativno određivanje supstanci u širokom opsegu talasnih dužina (185-1100 nm);

* vršiti kvantitativnu analizu višekomponentnih sistema (istovremeno određivanje više supstanci);

* odrediti sastav i konstante stabilnosti kompleksnih spojeva koji apsorbiraju svjetlost;

* odrediti fotometrijske karakteristike spojeva koji apsorbiraju svjetlost.

Za razliku od fotometara, monohromator u spektrofotometrima je prizma ili difrakciona rešetka, koja omogućava da se talasna dužina neprekidno menja. Postoje instrumenti za mjerenja u vidljivom, UV i IR području spektra. Šematski dijagram spektrofotometra je praktično nezavisan od spektralnog područja.

Spektrofotometri, kao i fotometri, dolaze u tipovima sa jednim i dvostrukim snopom. U uređajima sa dvostrukim snopom, svjetlosni tok je na neki način bifurkiran ili unutar monohromatora ili na izlazu iz njega: jedan fluks zatim prolazi kroz ispitni rastvor, drugi kroz rastvarač.

Jednosmjerni instrumenti su posebno korisni za kvantitativna određivanja zasnovana na mjerenju apsorbancije na jednoj talasnoj dužini. U ovom slučaju, jednostavnost uređaja i lakoća rada su značajna prednost. Veća brzina i lakoća mjerenja pri radu sa instrumentima s dva snopa korisni su u kvalitativnoj analizi, kada se optička gustoća mora mjeriti u velikom opsegu talasnih dužina da bi se dobio spektar. Osim toga, uređaj sa dva zraka može se lako prilagoditi za automatsko snimanje optičke gustoće koja se kontinuirano mijenja: svi moderni spektrofotometri za snimanje koriste dvosmjerni sistem u tu svrhu.

Instrumenti sa jednim i sa dva snopa su pogodni za vidljiva i UV mjerenja. Komercijalno proizvedeni IR spektrofotometri su uvijek zasnovani na dizajnu s dva snopa, budući da se obično koriste za skeniranje i snimanje velikog područja spektra.

Kvantitativna analiza jednokomponentnih sistema vrši se istim metodama kao i u fotoelektrokolorimetriji:

Poređenjem optičkih gustoća standardnih i testnih rastvora;

Metoda određivanja na osnovu prosječne vrijednosti molarnog koeficijenta apsorpcije svjetlosti;

Koristeći metodu kalibracionog grafikona,

i nema karakteristične karakteristike.

Spektrofotometrija u kvalitativnoj analizi

Kvalitativna analiza u ultraljubičastom dijelu spektra. Ultraljubičasti apsorpcijski spektri obično imaju dvije ili tri, ponekad pet ili više apsorpcionih traka. Za nedvosmislenu identifikaciju ispitivane supstance, snima se njen apsorpcioni spektar u različitim otapalima, a dobijeni podaci se upoređuju sa odgovarajućim spektrima sličnih supstanci poznatog sastava. Ako se spektri apsorpcije ispitivane supstance u različitim otapalima poklapaju sa spektrom poznate supstance, onda je moguće sa velikim stepenom verovatnoće doneti zaključak o identitetu hemijskog sastava ovih jedinjenja. Za identifikaciju nepoznate supstance po njenom spektru apsorpcije potrebno je imati dovoljan broj apsorpcionih spektra organskih i neorganskih supstanci. Postoje atlasi koji pokazuju apsorpcione spektre mnogih, uglavnom organskih, supstanci. Ultraljubičasti spektri aromatičnih ugljovodonika su posebno dobro proučavani.

Prilikom identifikacije nepoznatih jedinjenja, pažnju treba obratiti i na intenzitet apsorpcije. Mnoga organska jedinjenja imaju apsorpcione trake čiji se maksimumi nalaze na istoj talasnoj dužini λ, ali su im intenziteti različiti. Na primjer, u spektru fenola postoji apsorpciona traka na λ = 255 nm, za koju je molarni koeficijent apsorpcije na maksimumu apsorpcije ε max = 1450. Na istoj talasnoj dužini, aceton ima pojas za koji je ε max = 17 .

Kvalitativna analiza u vidljivom dijelu spektra. Identifikacija obojene supstance, kao što je boja, takođe se može izvršiti upoređivanjem njenog vidljivog spektra apsorpcije sa spektrom slične boje. Spektri apsorpcije većine boja opisani su u posebnim atlasima i priručnicima. Iz spektra apsorpcije boje može se izvesti zaključak o čistoći boje, jer u spektru nečistoća postoji niz apsorpcionih traka koje u spektru boje nema. Iz spektra apsorpcije mješavine boja može se izvući i zaključak o sastavu mješavine, posebno ako spektri komponenti mješavine sadrže apsorpcione trake koje se nalaze u različitim područjima spektra.

Kvalitativna analiza u infracrvenom području spektra

Apsorpcija IR zračenja povezana je s povećanjem vibracijske i rotacijske energije kovalentne veze ako dovodi do promjene dipolnog momenta molekula. To znači da su skoro svi molekuli sa kovalentnim vezama, u jednom ili drugom stepenu, sposobni za apsorpciju u IR području.

Infracrveni spektri poliatomskih kovalentnih spojeva obično su vrlo složeni: sastoje se od mnogih uskih apsorpcionih traka i veoma se razlikuju od konvencionalnih UV i vidljivih spektra. Razlike proizlaze iz prirode interakcije između apsorbirajućih molekula i njihove okoline. Ova interakcija (u kondenzovanim fazama) utiče na elektronske prelaze u hromoforu, tako da se apsorpcione linije šire i teže spajanju u široke apsorpcione trake. U IR spektru, naprotiv, frekvencija i koeficijent apsorpcije koji odgovaraju pojedinačnoj vezi obično se malo mijenjaju s promjenama u okolini (uključujući promjene u preostalim dijelovima molekula). Linije se također šire, ali ne dovoljno da se spoje u prugu.

Obično, kada se konstruišu IR spektri, propusnost se iscrtava na y-osi kao procenat, a ne kao optička gustina. Ovom metodom konstruisanja apsorpcione trake se pojavljuju kao depresije na krivulji, a ne kao maksimumi u UV spektrima.

Formiranje infracrvenog spektra povezano je s vibracijskom energijom molekula. Vibracije mogu biti usmjerene duž valentne veze između atoma molekula, u tom slučaju se nazivaju valentnim. Postoje simetrične vibracije istezanja, u kojima atomi vibriraju u istim smjerovima, i asimetrične vibracije istezanja, u kojima atomi vibriraju u suprotnim smjerovima. Ako se atomske vibracije javljaju s promjenom ugla između veza, one se nazivaju deformacija. Ova podjela je vrlo proizvoljna, jer se pri vibracijama istezanja uglovi deformišu u jednom ili drugom stepenu i obrnuto. Energija vibracija savijanja je obično manja od energije vibracija istezanja, a apsorpcioni pojasevi uzrokovani vibracijama savijanja nalaze se u području dužih valova.

Vibracije svih atoma molekula uzrokuju apsorpcione trake koje su individualne za molekule date supstance. Ali među tim vibracijama mogu se razlikovati vibracije grupa atoma, koje su slabo povezane sa vibracijama atoma ostatka molekula. Apsorpcione trake uzrokovane takvim vibracijama nazivaju se karakteristične trake. Uočavaju se, po pravilu, u spektrima svih molekula koji sadrže ove grupe atoma. Primjer karakterističnih traka su trake na 2960 i 2870 cm -1. Prvi pojas nastaje zbog asimetričnih vibracija istezanja C-H veze u CH 3 metilnoj grupi, a drugi zbog simetričnih vibracija istezanja C-H veze iste grupe. Takve trake sa blagim odstupanjem (±10 cm -1) uočene su u spektrima svih zasićenih ugljovodonika i općenito u spektru svih molekula koji sadrže CH 3 grupe.

Druge funkcionalne grupe mogu uticati na položaj karakterističnog pojasa, a razlika u frekvencijama može biti i do ±100 cm -1, ali takvih slučajeva je malo i mogu se uzeti u obzir na osnovu literaturnih podataka.

Kvalitativna analiza u infracrvenom području spektra provodi se na dva načina.

1. Uzmite spektar nepoznate supstance u području od 5000-500 cm -1 (2 - 20 μ) i potražite sličan spektar u posebnim katalozima ili tabelama. (ili korištenjem kompjuterskih baza podataka)

2. U spektru ispitivane supstance traže se karakteristične trake iz kojih se može suditi o sastavu supstance.

Zasnovano na apsorpciji rendgenskog zračenja od strane atoma. Ultraljubičasta spektrofotometrija je najjednostavniji i najrašireniji metod analize apsorpcije u farmaciji. Koristi se u svim fazama farmaceutske analize lijekova (testiranje autentičnosti, čistoće, kvantitativno određivanje). Razvijen je veliki broj metoda za kvalitativnu i kvantitativnu analizu...

Daju se omotači i analgetici, dovodi se O2 kako bi se osigurala adekvatna ventilacija pluća i koriguje se ravnoteža vode i elektrolita. 7. Fizičko-hemijske metode za određivanje fenola 7.1. Fotokolorimetrijsko određivanje masenog udjela fenola u prečišćenoj industrijskoj otpadnoj vodi nakon postrojenja za uklanjanje katrana u hemijskoj toksičnoj proizvodnji fenola 1. Svrha rada. ...

Kontrola u ljekarni, pravila i rokovi skladištenja i izdavanja lijekova. Apotekarska kontrola se vrši u skladu sa Naredbom Ministarstva zdravlja Ruske Federacije od 16. jula 1997. br. 214 „O kontroli kvaliteta lekova koji se proizvode u apotekama“. Naredbom su odobrena tri dokumenta (prilozi naredbi 1, 2, 3): 1. “Uputstvo za kontrolu kvaliteta lijekova proizvedenih u apotekama”...

Naslovi. Trgovački nazivi pod kojima je JIC registrovan ili proizveden u Ruskoj Federaciji također će biti navedeni kao glavni sinonim. 4 Metodološka osnova za klasifikaciju lijekova Broj lijekova u svijetu se stalno povećava. Na farmaceutskom tržištu u Rusiji trenutno kruži više od 18.000 naziva lijekova, što je 2,5 puta više nego 1992.

Kao što je poznato, farmakopejska analiza ima za cilj utvrđivanje autentičnosti, utvrđivanje čistoće i kvantificiranje aktivne tvari ili sastojaka složenog doznog oblika. Uprkos činjenici da svaka od ovih faza farmakopejske analize rješava svoj specifični problem, one se ne mogu razmatrati izolovano. Stoga, izvođenje reakcije autentičnosti ponekad daje odgovor na prisustvo ili odsustvo određene nečistoće. U PAS-Na preparatu se provodi kvalitativna reakcija s otopinom željeznog (III) klorida (kao derivat salicilne kiseline stvara ljubičastocrvenu boju). Ali pojava taloga u ovoj otopini nakon tri sata ukazuje na prisutnost primjese 5-aminosalicilne kiseline, koja nije farmakološki aktivna. Međutim, takvi primjeri su prilično rijetki.

Određivanje određenih konstanti - tačke topljenja, gustine, specifičnog indeksa apsorpcije - omogućava da se istovremeno izvede zaključak o autentičnosti i čistoći date supstance. Kako su metode za određivanje određenih konstanti za različite lijekove identične, proučavamo ih u općim metodama analize. Trebat će vam poznavanje teoretskih osnova i sposobnost donošenja odluka u kasnijim analizama različitih grupa lijekova.

Farmakopejska analiza je sastavni dio farmaceutske analize i predstavlja skup metoda za proučavanje lijekova i doznih oblika, utvrđenih u Državnoj farmakopeji i drugim ND (FS, FSP, GOST) i koji se koriste za utvrđivanje autentičnosti, čistoće i kvantitativne analize.

U kontroli kvaliteta lijekova koriste se fizičke, fizičko-hemijske, hemijske i biološke metode analize. ND testovi uključuju nekoliko glavnih faza:

opis;

rastvorljivost;

autentičnost;

fizičke konstante (tačke topljenja, ključanja ili destilacije, indeks prelamanja, specifična rotacija, gustina, spektralne karakteristike);

transparentnost i boja rastvora;

kiselost ili alkalnost, pH rastvora;

određivanje nečistoća;

gubitak težine nakon sušenja;

sulfatni pepeo;

kvantitacija.

Ovisno o prirodi lijeka, neki od ovih testova mogu biti ili odsutni ili drugi uključeni, kao što su kiselinska vrijednost, jodna vrijednost, vrijednost saponifikacije itd.

Privatna farmakopejska monografija za bilo koji lijek počinje dijelom "Opis", koji uglavnom karakterizira fizička svojstva tvari:

stanje agregacije (čvrsta, tečna, plinovita), ako je supstanca čvrsta, tada se određuju stepen njene disperzije (finokristalinični, grubokristalini) i oblik kristala (igličasti, cilindrični).

boja supstance – važan pokazatelj autentičnosti i čistoće. Većina lijekova je bezbojna, odnosno bijele su boje. Bojenje vizualno pri određivanju stanja agregacije. Mala količina supstance stavlja se u tankom sloju na Petrijevu zdjelu ili staklo sata i gleda na bijeloj pozadini. U Državnom fondu X1 postoji članak „Određivanje stepena bjeline droge u prahu“. Određivanje se vrši instrumentalnom metodom pomoću posebnih fotometara “Specol-10”. Zasnovan je na spektralnim karakteristikama svjetlosti reflektirane od uzorka lijeka. Oni mjere tzv koeficijent refleksije– odnos veličine reflektovanog svetlosnog toka i veličine upadnog. Izmjerene refleksije omogućavaju određivanje prisutnosti ili odsustva boje ili sivkaste nijanse u supstancama izračunavanjem stepena bjeline (α) i stepena sjaja (β). Budući da je pojava nijansi ili promjena boje, u pravilu, posljedica kemijskih procesa - oksidacije, redukcije, čak i ova početna faza proučavanja tvari nam omogućava da izvučemo zaključke. Ovo metoda je isključena iz GF X11 izdanja.

Miris retko određivana odmah nakon otvaranja pakovanja na udaljenosti od 4-6 cm. Nema mirisa nakon otvaranja pakovanja odmah prema metodi: 1-2 g supstance se ravnomerno raspoređuje na staklo sata prečnika 6-8 cm i nakon 2 minuta se određuje miris na udaljenosti od 4-6 cm.

Možda postoje uputstva u odjeljku "Opis". o mogućnosti promjene tvari tokom skladištenja. Na primjer, u preparatu kalcijum hlorida naznačeno je da je vrlo higroskopan i rastvara se u vazduhu, a natrijum jodid - na vazduhu postaje vlažan i razgrađuje se sa oslobađanjem joda; kristalni hidrati, u slučaju vremenskih uticaja ili nepoštivanja uslova kristalizacije u proizvodnji, više neće imati željeni izgled niti oblik kristala, niti boju.

Dakle, proučavanje izgleda neke supstance je prva, ali vrlo važna faza u analizi supstanci, te je potrebno znati povezati promjene izgleda sa mogućim hemijskim promjenama i izvući ispravan zaključak.

Rastvorljivost(GF XI, broj 1, str. 175, GF XII, broj 1, str. 92)

Rastvorljivost je važan pokazatelj kvaliteta lijeka. U pravilu, RD sadrži određenu listu otapala koja najpotpunije karakterizira ovo fizičko svojstvo tako da se u budućnosti može koristiti za procjenu kvalitete u jednoj ili drugoj fazi proučavanja ove ljekovite tvari. Tako je rastvorljivost u kiselinama i alkalijama karakteristična za amfoterna jedinjenja (cinkov oksid, sulfonamidi), organske kiseline i baze (glutaminska kiselina, acetilsalicilna kiselina, kodein). Promena rastvorljivosti ukazuje na prisustvo ili pojavu tokom skladištenja manje rastvorljivih nečistoća, što karakteriše promenu njenog kvaliteta.

U SP XI, rastvorljivost znači nije fizička konstanta, već svojstvo izraženo približnim podacima i služi za približne karakteristike lijekova.

Zajedno sa tačkom topljenja, rastvorljivost supstance pri konstantnoj temperaturi i pritisku je jedan od parametara, prema kojem utvrđuju autentičnost i čistoća (dobar kvalitet) gotovo svih lijekova.

Preporučuje se upotreba rastvarača različitih polariteta (obično tri); Ne preporučuje se upotreba rastvarača niskog ključanja i zapaljivih (dietil etar) ili vrlo toksičnih (benzen, metilen hlorid).

Pharmacopeia XI ed. prihvaćeno dva načina da se izrazi rastvorljivost :

U dijelovima (omjer tvari i rastvarača). Na primjer, za natrijum hlorid prema FS, rastvorljivost u vodi se izražava u omjeru 1:3, što znači da nije potrebno više od 3 ml vode za rastvaranje 1 g ljekovite tvari.

U konvencionalnim terminima(GF XI, str. 176). Na primjer, za natrijum salicilat u PS rastvorljivost je data uslovno - „veoma lako rastvorljiv u vodi“. To znači da je za otapanje 1 g supstance potrebno do 1 ml vode.

Farmakopeja XII izdanje samo uslovno (u smislu 1 g)

Konvencionalni pojmovi i njihova značenja dati su u tabeli. 1. (GF XI, broj 1, str. 176, GF XII, broj 1, str. 92).

Konvencionalni uslovi rastvorljivosti

Uvjetni izraz odgovara određenom rasponu volumena rastvarača (ml), unutar kojeg bi trebalo doći do potpunog rastvaranja jednog grama ljekovite tvari.

Proces rastvaranja se provodi u rastvaračima na temperatura 20°S. Kako bi se sačuvala ljekovita supstanca i rastvarač, masa lijeka se izmjeri na način (sa preciznošću od 0,01 g) da se ne potroši više od 100 ml za utvrđivanje rastvorljivosti vode, a ne više od 10- 20 ml organskih rastvarača.

Ljekovita supstanca (supstanca) smatra se rastvorljivim , ako se u rastvoru ne detektuju čestice supstance kada se posmatra u prolaznoj svetlosti.

Metodologija . (1 način). Izvagana masa lijeka, prethodno samljevena u fini prah, dodaje se izmjerenoj zapremini rastvarača koja odgovara njegovoj minimalnoj zapremini i protresa se. Zatim, u skladu sa tabelom. 1, postepeno dodajte rastvarač do maksimalne zapremine i neprestano mućkajte 10 minuta. Nakon tog vremena, u rastvoru se golim okom ne bi trebalo otkriti čestice supstance. Na primjer, odvažite 1 g natrijum benzoata, stavite ga u epruvetu sa 1 ml vode, promućkajte i postepeno dodajte 9 ml vode, jer natrijum benzoat je lako rastvorljiv u vodi (od 1 do 10 ml).

Za sporo rastvorljive lijekovi kojima je potrebno više od 10 minuta za potpuno rastvaranje, Dozvoljeno je zagrijavanje u vodenom kupatilu do 30°C. Posmatranje se vrši nakon hlađenja rastvora na 20°C i snažnog mućkanja u trajanju od 1-2 minuta. Na primjer, kofein je sporo rastvorljiv u vodi (1:60), kodein je sporo i slabo rastvorljiv u vodi (100-1000), kalcijum glukonat je sporo rastvorljiv u 50 delova vode, kalcijum laktat je sporo rastvorljiv u vodi, borna kiselina polako rastvorljiv u 7 delova .glicerina.

Metoda 2. Rastvorljivost, izražena u dijelovima, pokazuje volumen rastvarača u ml potreban za rastvaranje 1 g supstance.

Metodologija. (2. metoda) Masa lijeka izmjerena na ručnoj vagi rastvara se u navedenoj ND zapremini rastvarača. U otopini ne smije biti čestica neotopljene tvari.

Rastvorljivost u dijelovima je naznačena u farmakopejskim monografijama za sljedeće lijekove: borna kiselina(rastvoriti u 25 dijelova vode, 25 dijelova alkohola, 4 dijela kipuće vode); kalijum jodid(rastvorljiv u 0,75 delova vode, 12 delova alkohola i 2,5 delova glicerina); natrijum bromid(rastvorljiv u 1,5 delova vode, 10 delova alkohola); kalijum bromid(rastvorljiv u 1,7 delova vode i mešanog alkohola); kalijum hlorid i natrijum hlorid(r. u 3 sata vode).

U slučaju testiranja, na primjer, natrijum bromida, postupite na sljedeći način: izmjerite 1 g natrijum bromida na ručnoj vagi, dodajte 1,5 ml vode i protresite dok se potpuno ne otopi.

Opća farmakopejska monografija" Rastvorljivost » SP XII izdanje dopunjeno je opisom metoda za određivanje rastvorljivosti supstanci nepoznate i poznate rastvorljivosti.

Tačka topljenja (T ° pl)

Tačka topljenja je konstantna karakteristika čistoća supstance a ujedno i njegovu autentičnost. Iz fizike je poznato da je tačka topljenja temperatura na kojoj je čvrsta faza neke supstance u ravnoteži sa talinom. Čista supstanca ima jasnu tačku topljenja. Budući da lijekovi mogu imati malu količinu nečistoća, više nećemo vidjeti tako jasnu sliku. U ovom slučaju se određuje interval u kojem se tvar topi. Obično se ovaj interval nalazi unutar 2 ◦ C. Produženi interval ukazuje na prisustvo nečistoća u neprihvatljivim granicama.

Prema formulaciji Državnog fonda X1 pod tačka topljenja supstance razumeju temperaturni interval između početka topljenja (pojava prve kapi tečnosti) i kraja topljenja (potpuni prelazak supstance u tečno stanje).

Ako supstanca ima nejasan početak ili kraj topljenja, odrediti temperatura tek početka ili kraja topljenja. Ponekad se supstanca topi razgradnjom, u ovom slučaju je određena temperatura raspadanja, odnosno temperatura na kojoj se to dešava iznenadna promena supstance(npr. pjenjenje).

Metode određivanje tačke topljenja

Izbor metode je diktiran dvije tačke:

stabilnost tvari pri zagrijavanju i

sposobnost mljevenja u prah.

Prema GF X1 izdanju, postoje 4 načina za određivanje T ° pl:

Metoda 1 – za supstance koje se mogu samleti u prah i koje su stabilne kada se zagreju

Metoda 1a – za supstance koje se mogu samleti u prah, Ne otporan na toplotu

Metode 2 i 3 - za supstance koje se ne usitnjavaju u prah

Metode 1, 1a i 2 uključuju korištenje 2 uređaja:

PTP ( uređaj za određivanje Tmel): poznato vam iz kursa organske hemije, omogućava vam da odredite tačku topljenja supstanci unutar od 20 ◦ Od do 360 ◦ WITH

Uređaj koji se sastoji od tikvice okruglog dna u koju je zatvorena epruveta, u koju je umetnut termometar sa pričvršćenom kapilarom koja sadrži početnu supstancu. Spoljna tikvica je napunjena do ¾ zapremine rashladnom tečnošću:

voda (omogućava vam da odredite Tmelt do 80 ◦ C),

Vazelinsko ulje ili tečni silikoni, koncentrirana sumporna kiselina (omogućava vam da odredite Tmelt do 260 ◦ C),

mješavina sumporne kiseline i kalijum sulfata u omjeru 7:3 (omogućava vam da odredite Tmel iznad 260 ◦ C)

Tehnika je opća, bez obzira na uređaj.

Fino mljevena suha tvar stavlja se u kapilaru srednje veličine (6-8 cm) i unosi u uređaj na temperaturi 10 stepeni nižoj od očekivane. Podešavanjem brzine porasta temperature, bilježi se temperaturni raspon promjena tvari u kapilari.Istovremeno se sprovode najmanje 2 određivanja i uzima se aritmetički prosjek.

Tačka topljenja se određuje ne samo za čiste supstance, već i za njihove derivate– oksimi, hidrazoni, baze i kiseline izolovani iz njihovih soli.

Za razliku od GF XI u GF XII ed. temperatura topljenja kapilarnom metodom znači ne interval između početka i kraja topljenja, već krajnja temperatura topljenja , što je u skladu s Evropskom farmakopejom.

Granice temperature destilacije (T° kip.)

GF vrijednost je definirana kao interval između početne i krajnje tačke ključanja pri normalnom pritisku. (101,3 kPa – 760 mmHg). Interval je obično 2°.

Pod inicijalom Tačka ključanja razumjeti temperaturu na kojoj je prvih pet kapi tečnosti destilirano u prijemnik.

Ispod finala– temperatura na kojoj 95% tečnosti prelazi u prijemnik.

Duži interval nego što je naznačeno u odgovarajućem FS ukazuje na prisustvo nečistoća.

Uređaj za određivanje TPP se sastoji od

boca otporna na toplotu sa termometrom u koji se stavlja tečnost,

frižider i

prijemna boca (gradirani cilindar).

Privredna komora, uočeno eksperimentalno dovode do normalnog pritiska prema formuli:

Tispr = Tnabl + K (r – r 1)

Gdje je: p – normalni barometarski tlak (760 mm Hg)

r 1 – barometarski pritisak tokom eksperimenta

K – povećanje tačke ključanja na 1 mm pritiska

Dakle, određuju se temperaturne granice destilacije autentičnosti i čistoće etar, etanol, hloretil, fluorotan.

GFS GF XII " Određivanje temperaturnih granica za destilaciju » dopunjeno definicijom tačke ključanja a privatno FS preporučuje utvrđivanje očvršćavanje ili tačka ključanja za tečne lijekove.

Gustina(GF XI, br. 1, str. 24)

Gustina je masa po jedinici zapremine supstance. Izraženo u g/cm3.

ρ = m/ V

Ako se masa mjeri u gramima, a zapremina u cm3, tada je gustina masa 1 cm3 supstance.

Gustina se određuje piknometrom (do 0,001). ili hidrometar (preciznost mjerenja do 0,01)

Za dizajn uređaja pogledajte GF X1 izdanje.