Citološki pregled i njegov značaj u onkologiji. Citološka analiza: zašto i kako se radi Za određivanje se koristi citološka metoda

Na trećem mestu po broju bolesti ženska polovinačovječanstva, primarni zadatak je rano otkrivanje patologije, a još bolje - preduslova za bolest. Citološki pregled je metoda koja se može nositi s takvim zadatkom.

Šta je citološka studija

Studija, koja uzima u obzir stanje ćelija, naziva se citološka. Ova procedura ima mnoge prednosti u odnosu na druge metode zbog informativnosti rezultata i odsustva traume tkiva i organa prilikom uzimanja materijala za analizu.

Razlika između histološkog i citološkog pregleda opisana je u ovom videu:

Kome je dodijeljen

• Studija je uključena u preventivni pregled ženske polovine, počevši od 18 godina.
• Može biti i zakazivanje liječnika u vezi s potrebom za dijagnozom u slučaju sumnje na patologiju.

Pregled maloletnih devojčica vrši se uz saglasnost roditelja.

Zašto vam je potreban citološki pregled urina, krvi, sputuma itd. kod žena i muškaraca.

Zašto prolaziti kroz to

Citološkim pregledom se može utvrditi prisustvo ćelija raka u trenutku kada tijelo ne pokazuje nikakve simptome koji ukazuju na početni patološki proces. I kao što znate, u ranim fazama su potpuno izlječivi.

Osim toga, procedura pruža informacije:

• o mogućem zapaljenom procesu u materici,
• o prisutnosti infekcije
• o hormonskim promjenama.

U nastavku pročitajte o metodama istraživanja u citološkoj dijagnostici.

Vrste postupaka

Metoda citološkog pregleda predviđa laboratorijsko proučavanje materijala uzetog u obliku razmaza s površina organa regije maternice.

Proučavanje ćelija može se izvesti pomoću sljedećih metoda:

• Metoda centrifugiranja uključuju, ako je potrebno, da bi se dobio rezultat, odvajanje stanične membrane od opće strukture.
• Mikroskopska metoda Postoji svjetlo i elektronika.
• Životno istraživanje omogućava posmatranje procesa koji se odvijaju u ćeliji.
• Metoda označenog atoma- biohemijski procesi koji se odvijaju u ćeliji se prate uvođenjem radioaktivnog izotopa u ćeliju.

U nastavku pročitajte šta pokazuje citološki pregled.

Indikacije za držanje

Citološki pregled se propisuje u sljedećim slučajevima:

• pacijent je neplodan
• sumnja se na eroziju grlića materice,
• pacijent se sprema da zatrudni,
• žena dugo uzima hormonske lekove,
• iscjedak iz vagine,
• postoji sumnja na infekciju genitalnih organa, uočljive su manifestacije:
  • bradavice,
  • bradavice;
• pacijentkinja ima neredovnu menstruaciju,
• pregled se obavlja uoči ugradnje spirale.

Kako se odvija citološki pregled grlića materice, video u nastavku će pokazati:

Kontraindikacije za držanje

Studija može pokazati netačne informacije ako se provodi:

• tokom upalnog procesa u maternici, povećan broj leukocita može uticati na tačnost određivanja prisustva atipičnih ćelija;
• menstrualno krvarenje također nije pogodno vrijeme za analizu.

Da li je bezbedno uzimati materijal za citološki pregled, pročitajte u nastavku.

Sigurnost metode

Ispituje se biološki materijal uzet metodama koje ne oštećuju organe i ne narušavaju njihov integritet. Stoga je postupak potpuno siguran.

Priprema za analizu

Da bi manipulacija bila uspješna, a uzeti materijal pogodan za istraživanje, moraju biti ispunjeni određeni uvjeti:

• Posebna, nikakva posebna priprema nije potrebna.
• Prije uzimanja brisa potrebno je da žena izbjegava seksualni kontakt najmanje 24 sata.
• Ako se pacijent liječi od akutne infekcije, tada će biti ispravno uzeti materijal za istraživanje 60 dana nakon završetka liječenja.
• Ako postoji sumnja u dobiveni rezultat, preporučuje se ponovno ponavljanje proučavanja biološkog materijala.
• Važno je da je prijem biomaterijala pravilno usklađen u vremenu menstrualnog ciklusa pacijentice. Ne treba ga uzimati kasnije od pet dana pre očekivanog početka ciklusa, a tokom menstruacije preporučuje se analiza počev od petog dana ciklusa. Ovo pravilo se mora poštovati ako je svrha studije utvrđivanje prekanceroznih stanja ili dijagnosticiranje raka.
• Kada se radi test za utvrđivanje efekta hormonskog liječenja, preporučuje se uzimanje materijala dvije sedmice nakon završetka kursa.
• Ako se pacijentkinja pregleda kako bi se razumio uzrok problema s menstrualnim ciklusom, tada se svaka tri dana propisuje bris za analizu.
• U slučaju razjašnjenja pitanja upalnih procesa u području maternice, bris se može obaviti bilo kojeg dana, osim u periodu menstrualnog ciklusa.
• Da biste dobili neiskrivljene rezultate studije, potrebno je ne provoditi nikakve postupke tri dana prije nje:
  • ispiranje,
  • korištenje svijeća, krema;
  • sudjelovanje u drugim studijama područja maternice, na primjer, ultrazvučna dijagnostika;
  • pijte manje tečnosti tako da mokrite oko tri sata pre uzimanja brisa.

Karakteristike

• Postupak je bezbolan jer nema implantacije u tkivu materice. Osjećaji prilikom uzorkovanja materijala su pomalo neugodni, ali to je vrlo kratak trenutak.
• Pacijentkinja se nalazi na ginekološkoj stolici, specijalista četkicom uzima iscjedak na površini materice, iz cervikalnog kanala, prema procjeni ljekara, iz mokraćnog kanala.

Najveći moguća posledica procedure - krvavi problemi nekoliko dana nakon uzimanja brisa. Ovo nije opasan faktor i javlja se zbog činjenice da je četka dodirnula posudu.

Dešifriranje rezultata i normi citološkog pregleda brisa itd. opisano u nastavku.

Dešifrovanje rezultata

Stručnjaci procjenjuju stanje ćelija koje oblažu površinu. Poznato je da vagina i cerviks imaju različite tipove glavnih stanica sluznice:

• na grliću materice gornji sloj predstavljaju cilindrične ćelije,
• Vagina ima slojevit epitel na površini.

Prilikom analize podataka uzimaju se u obzir mnogi faktori, sve promjene u odnosu ćelija, kao i njihova unutrašnja struktura.

Standardna interpretacija rezultata može imati zaključak citološkog pregleda u obliku jedne ili više opcija od pet:

• Ćelije su nepromijenjene.
• Promjene pronađene tokom citološkog pregleda ukazuju na prisustvo upalnog procesa.
• Postoji indikacija displazije (neke ćelije sa uvećanim jezgrima).
• Prekancerozno stanje (neke ćelije imaju odstupanja od norme u stanju hromozoma i citoplazme).
• u biološkom materijalu.

Prosječna cijena procedure

Cijena zahvata ovisi o cjenovnoj politici klinike u koju se pacijent prijavio, skupu radova koje je potrebno izvršiti i nekim drugim karakteristikama. U prosjeku, citološki pregled košta 780 rubalja.

Tehnika uzimanja materijala za citološki pregled prikazana je u ovom videu:

U toku citološke studije proučava se struktura ćelija kako bi se otkrili maligni, benigni tumori i lezije netumorske prirode. Glavna svrha studije je potvrditi ili opovrgnuti činjenicu malignosti ćelija uzetih za analizu.

Metode citološkog istraživanja zasnivaju se na proučavanju pod mikroskopom strukture ćelija, ćelijskog sastava tečnosti i tkiva.

Postoje takve metode citoloških studija:

• svjetlosna mikroskopija;
• elektronska mikroskopija;
• metoda centrifugiranja. Koristi se kada je potrebno odvojiti ćelijske membrane od opšte strukture;
• metoda označenog atoma. Koriste se za proučavanje biohemijskih procesa u ćelijama: za to se u njih unosi označeni radioaktivni izotop;
• cjeloživotno učenje. Ova metoda istraživanja omogućava proučavanje dinamičkih procesa koji se odvijaju u ćeliji.

Zaključak citološke studije temelji se na karakteristikama promjena u citoplazmi, ćelijskom jezgru, nuklearno-citoplazmatskom odnosu, formiranju kompleksa i ćelijskih struktura.

Citološka analiza se koristi tokom preventivnog pregleda, za pojašnjenje dijagnoze, tokom operacije, za pravovremeno otkrivanje recidiva i kontrolu toka lečenja.

Citološki pregled brisa

Kao materijal za analizu koriste se:

• tečnosti: urin, sekret prostate, sputum, endoskopski brisevi raznih organa, iscjedak iz bradavica, otisci i strugotine sa ulcerativnih i erodiranih površina, rana i fistula, tečnost iz seroznih i zglobnih šupljina;
• punktati: biološki materijali dobijeni tokom dijagnostičke punkcije izvedene tankom iglom;
• brisevi iz šupljine i grlića materice.

Većina ovih citoloških studija razmaza se radi ako je potrebno, kako bi se postavila i razjasnila dijagnoza. Ali preporučuje se citološki pregled brisa iz grlića materice (Papa bris): jednom godišnje - za žene starije od 19 godina, vodeći seksualni život; dva puta godišnje - žene koje uzimaju hormonske kontraceptive imale su genitalni herpes; više od dva puta godišnje - žene koje pate od neplodnosti, krvarenje iz materice, gojazni, koji često mijenjaju seksualne partnere, uzimaju estrogene, koji imaju bradavice na genitalijama, otkriven je genitalni herpes.

Citološki pregled grlića materice

Za citološki pregled grlića materice posebnom drvenom lopaticom se uzima bris s vanjskog i unutrašnjeg dijela cerviksa i sa svodova vagine. Zatim se prebacuje na staklo i fiksira.

Radi se citološki pregled grlića maternice da bi se otkrile kancerogene ćelijske promjene, a u zaključku liječnik ukazuje na jednu od pet faza stanja stanica:

• faza 1. Ćelije sa devijacijama nisu pronađene;
• faza 2. Postoje manje promjene u strukturi ćelija uzrokovane upalom unutrašnjih genitalnih organa. Ovo stanje ćelija ne izaziva strah, ali se ženi preporučuje dodatni pregled i liječenje;
• stadijum 3. Nađen je mali broj ćelija sa strukturnim devijacijama. U tom slučaju se preporučuje ponovno uzimanje brisa ili histološki pregled izmijenjenog tkiva;
• stadijum 4. Nalaze se pojedinačne ćelije sa malignim promenama. Konačna dijagnoza se ne postavlja, propisuje se dodatni pregled;
• stadijum 5. U brisu je pronađen veliki broj ćelija raka.

Pouzdanost takve citološke studije je velika, ali može dati samo informaciju o području iz kojeg su ćelije uzete za analizu. Da biste procijenili stanje jajovoda, jajnika, materice, trebali biste se podvrgnuti sveobuhvatnom pregledu.

Klinička citologija je priznata punopravna metoda morfološke analize koja se temelji na proučavanju i evaluaciji ćelijskog materijala dobivenog na različite načine iz patološkog žarišta.

U praktičnom i istraživačkom radu privlačni su jednostavnost, brzina i lako ponavljanje. Ovo posljednje omogućava korištenje citološke analize za proučavanje dinamike morfoloških promjena u toku bolesti i procesa liječenja. Osim toga, citološki pregled ne zahtijeva velike materijalne troškove, reagensi i oprema su jeftini. Sve navedeno omogućava da se metoda široko koristi kako za morfološko verifikaciju u polikliničkom okruženju tako i za i za sprovođenje masovnih preventivnih pregleda, odabira rizičnih grupa uz naknadno sistematsko praćenje rizičnih osoba.

U našoj zemlji klinička citologija je dio laboratorijske dijagnostike, a to se objašnjava činjenicom da je tradicionalno proučavanje ćelijskog sastava uključeno u kompleks kliničkih laboratorijske pretrage- krv, koštana srž, eksudati, iscjedak razna tijela.

Međutim, za razliku od klasičnih laboratorijskih metoda, koje su obično kvantitativne, klinička citologija je deskriptivna. Ovo posljednje približava citologiju drugoj morfološkoj metodi - histologiji.

S tim u vezi, treba napomenuti da je u Sjedinjenim Državama u prošlosti Za 50 godina klinička citologija je postala grana patoanatomske dijagnostike i ušla je u upotrebu u 96% patoanatomskih laboratorija.

Poznato je da citološka slika odražava histološku strukturu i po mnogo čemu su histološki kriterijumi pogodni za ocjenu citoloških preparata. Treba podsjetiti da se pri opisivanju rezultata citološke studije koriste dijagnostički, a ne kvantitativni termini.

Dakle, metodološki se citološki pregled značajno razlikuje od svih ostalih laboratorijskih metoda.

Snažan podsticaj razvoju kliničke citologije bio je razvoj i unapređenje instalacija, instrumenata i alata za dijagnostičko ispitivanje.

Potreba za morfološkom verifikacijom doprinijela je brzom i značajnom povećanju broja biopsija, uključujući, i pretežno, biopsije punkcije.

I ako je rana klinička citologija bila pretežno eksfoliativna citologija: studija tečnosti- eksudati, voda za pranje; sekreta- sputum, urin; mrlje sa grlića materice, sa površine tumora, tada preovladava punkcijska citologija. U osnovi, materijal za istraživanje dobiva se punkcijom tumorske formacije fina igla, punkcije pod kontrolom ultrazvuka, rendgen, kompjuterska tomografija. Značajan udio studija u savremenoj kliničkoj citologiji čine studije razmaza i komadića dobijenih tokom trepanbiopsije, mrlja-otisaka sa hirurškog i biopsijskog materijala, poteza kistom i struganja tokom endoskopskih studija.

Posljednjih godina dijagnostička citologija je grana patomorfologije koja se najbrže razvija. Glavni dijagnostički pravac kliničke citologije je onkocitologija. U konačnici, citološka analiza se radi prvenstveno kako bi se dobio odgovor na pitanje prisutnosti maligne neoplazme. U procesu diferencijalne dijagnoze utvrđuje se priroda patološkog procesa i utvrđuju upalne, reaktivne, proliferativne ili prekancerozne lezije, kao i benigni tumori.

Izbor metode za uzimanje materijala određen je prirodom lezije, lokalizacijom i mogućnošću provođenja instrumentalnih studija. Poželjno je koristiti u kompleksu sve dostupne metode uzimanja materijala. Konkretno, u slučaju lezija mokraćne bešike, nativni urin se može koristiti za citološki pregled (efikasnost citološke dijagnoze je 40-45%), ispiranje alkoholom (efikasnost citološke dijagnoze je 60-65%), briseve-otiske tumora komadi uzeti tokom cistoskopije (efikasnost citološke oko 90% dijagnostike. Uz sveobuhvatan pregled, efikasnost citološke dijagnoze je oko 100%

Uloga morfoloških studija u dijagnostici tumora stalno raste. Samo detaljna morfološka karakteristika neoplazme može u potpunosti zadovoljiti kliničare i omogućiti razumniji odabir metode liječenja (hirurški, zračenje, kemoterapija i njihove kombinacije), budući da tumori drugačija struktura, porijeklo i stepen ćelija atipije različito reaguju na terapiju.

Kao što je poznato, morfološka dijagnostika bolesti je najpouzdanija i mnoge stare i nove metode laboratorijske dijagnostike, koje su od velikog značaja, posebno u zbiru, ne mogu isključiti morfološke metode istraživanja iz kliničke prakse. Istovremeno, morfološke studije u klinici dobijaju poseban značaj ako se analiziraju u poređenju sa svim kliničkim podacima u cjelini.

Maksimizirati interese klinike, interese određenog bolesna osoba morfološka dijagnoza treba da bude izuzetno tačna i da objektivno odražava karakteristike zatečene onkomorfološke forme.

Trenutno je pitanje efikasnosti citološke dijagnostike nedvosmisleno riješeno, a vrijednost ove metode u praksi je nesumnjiva. Citološka analiza omogućava procjenu prirode i težine proliferacije epitela, izdvajajući grupu displazija i na osnovu toga formirati grupe "visokog rizika". Citološki pregled omogućava direktno praćenje prirode staničnih promjena u epitelu kod osoba iz grupe "visokog rizika", što je gotovo nemoguće drugim morfološkim metodama.

Neuporedive prednosti u odnosu na druge metode ima citološka studija u otkrivanju raka u početnim fazama. Razvoj endoskopskih tehnika, ultrazvučnih metoda istraživanja u velikoj je mjeri doprinio širokom uvođenju citološke analize u dijagnostiku neoplazmi iz gotovo svih tkiva tijela, uključujući i unutrašnje organe koji su ranije bili nedostupni neoperativnoj morfološkoj analizi.

Kada se prepoznaju takozvani "rani karcinomi", citološka metoda često ima prednosti u odnosu na druge metode istraživanja. Dokaz za to je citološka dijagnoza slučajeva raka želuca, pluća, Bešika i drugih organa u odsustvu kliničkih, radioloških i endoskopskih manifestacija, čak i prije pojave znakova otkrivenih ovim metodama.

Cjelokupno iskustvo postojanja i kontinuiranog unapređenja kliničke citologije pokazuje da citološki pregled omogućava ne samo da se sa dovoljno visokom pouzdanošću konstatuje prisustvo maligne neoplazme, već i u većini slučajeva da se utvrdi histogeneza (poreklo, pripadnost tkiva) i stepen diferencijacije tumora. Ovo poslednje je veoma važno za kliniku, jer je poznato da je osetljivost na različite hemo- i radijacione efekte u velikoj meri određena stepenom diferencijacije neoplazme. Osim toga, nivo diferencijacije tumora može se koristiti kao prilično značajan prognostički indikator.

Takve visoki nivo dijagnostika omogućava upotrebu prihvaćenih međunarodnih morfoloških klasifikacija u radu, što je izuzetno važno, štaviše, doprinosi razvoju odgovarajućih citoloških klasifikacija. S tim u vezi, treba napomenuti da je izrada savremenih citoloških klasifikacija u skladu sa opšteprihvaćenim jedan od hitnih naučnih i praktičnih zadataka kliničke citologije.

Trenutno, uspjeh u osiguravanju zdravlja stanovništva u velikoj mjeri zavisi od provođenja masovnih preventivnih pregleda i to prije svega grupa sa povećanim rizikom od raznih bolesti, posebno malignih neoplazmi.

Provođenje efikasnih masovnih preventivnih pregleda, kako pokazuju naše iskustvo i iskustvo mnogih zemalja, nemoguće je bez primjene citološke metode, koja je posljednjih godina dobila puno priznanje i široku primjenu. Na sadašnjem nivou, citološki pregled je jedna od efikasnih dijagnostičkih metoda u bilo kojoj fazi progresije tumora iu tom pogledu omogućava: prikaz prirode i težine proliferacije ćelija; za dijagnosticiranje malignih tumora bilo koje lokalizacije u bilo kojoj fazi procesa.

Rana i pravovremena dijagnoza tumora organizacijski se sastoji od dvije faze:

1. Masovni skrining populacije (skrining cijele populacije ili samo rizičnih grupa) radi otkrivanja tumora ili znakova koji ne dozvoljavaju da se tumor isključi.

2. Pojašnjavanje dijagnoze u relativno malim grupama odabranim tokom skrininga.

U oba stadijuma kliničke dijagnostike citologija igra važnu ulogu, a upotrebu ove metode karakteriše niz karakteristika.

U prvoj fazi postavljaju se posebni zahtjevi za citološki pregled kao skrining test, a prije svega visoka osjetljivost (tj. visoka učestalost otkrivanja tumorskih stanica kod pacijenata sa malignim neoplazmama i nizak broj tzv. "rezultati) u jednom pregledu materijala.

Već je dokazano da je citološki pregled brisa sa grlića maternice veoma efikasan skrining test za karcinom ove lokalizacije, jer povećava otkrivanje tumora za oko 10 puta, u poređenju sa vizuelnom detekcijom; istovremeno se značajno povećava relativna učestalost otkrivanja raka u ranim i pretkliničkim fazama procesa.

U drugoj fazi ranih dijagnostika tumora citološku metodu, uz potrebu za visokom osjetljivošću, nameće se i zahtjev za visokom specifičnošću. Za citološki pregled u prvoj fazi, visoka specifičnost je manje važna, jer se rezultati skrininga uvijek provjeravaju u drugoj fazi dijagnoze.

Studije rađene citološkom metodom

1. Citološki pregled punkcionog materijala.

Citološki pregled punktata dobijenih finom iglom (biopsija finom iglom) iz tumora, tumorskih formacija pečata bilo koje lokalizacije: glava, vrat, dojke, štitne žlijezde, limfni čvorovi, kosti, meka tkiva ekstremiteta, koža, pluća, medijastinum, trbušni organi i retroperitonealni prostor,

2. Citološki pregled eksfolijativnog materijala.

Citološki pregled sekreta, izlučevina, iscjedka i struganja s površine erozija, čireva, rana, fistula, sputuma, ispiranja, eksudata, transudata.

3. Citološki pregled endoskopskog materijala.

Proučavanje materijala dobijenog tokom bronhoskopije, bronhijalne kateterizacije, ezofago-, gastro-, duodeno-, laboratorijske, rektoromano-, kolono-, cistoskopije i drugih vrsta endoskopskih pregleda u bilo kojoj lokalizaciji patološkog procesa.

4. Citološki pregled biopsijskog i hirurškog materijala

Citološki pregled brisa - otisaka, struganja sa biopsijskih komada i hirurškog materijala.

Citokemijska studija materijala - uključujući glikogen, lipide, DNK, RNK, enzime, itd.

Određivanje spolnog hromatina u tumorskim ćelijama.

Citološki pregled materijala dobijenog preventivnim pregledima stanovništva.

Studije vaginalnog epitela i urocitograma u cilju određivanja zasićenosti organizma estrogenom uz izračunavanje formule sazrijevanja, CPI, EI, itd.

Organizacija rada citološke laboratorije (CL)

Funkcionalne odgovornosti osoblja KZ.

Šef CL

Organizuje i obezbjeđuje rad odjeljenja, izrađuje plan rada odjeljenja sa raspodjelom odgovornosti između zaposlenih.

Organizuje i kontroliše dostavu citološkog materijala i rezultata ispitivanja u laboratoriju iz pridruženih zdravstvenih ustanova (za isporuku citološkog materijala odgovoran je glavni lekar ustanove koja šalje materijal), ako postoji centralizovana dostava - glavni lekar dr. bazna institucija.

Organizuje i kontroliše posete medicinskog osoblja pridruženim zdravstvenim ustanovama radi hitnih citoloških pregleda, punkcija, konsultacija složenih slučajeva, kliničkih i biopsijskih konferencija i pregleda citoloških laboratorija.

Odabire slučajeve za analizu na kliničkim i biopsijskim konferencijama, zajedno sa zamjenikom. glavni ljekar za medicinske poslove, sastavlja dnevni red, učestvuje u organizaciji kliničkih i biopsijskih konferencija (savjetuje govornike, vrši preliminarnu studiju citoloških preparata, dijapozitiva i dr.).

Vrši godišnju analizu rada KZ i predstavlja je upravi zdravstvene ustanove.

Nadzire rad na sastavljanju zbirke mikropreparata za stalno dopunjavanje, kreirajući fototeku muzeja.

Savjetuje doktore kliničkih odjela o pitanjima kliničke citologije.

Organizuje usavršavanje lekara i laboratorijskih asistenata. U tu svrhu organizuje i sprovodi periodične i tematske konferencije, uključujući i one o proučavanju citološkog materijala; razvoj novih citoloških i citokemijskih metoda; analizira složene slučajeve citološke dijagnostike.

Osigurava spremnost rada odjeljenja po prijemu na citološki pregled infektivnog materijala.

Odgovoran je za blagovremeno podnošenje zahtjeva za potrebne materijale, reagense, alate, opremu, kontroliše njihovu potrošnju i upotrebu.

Odgovoran za poštovanje od strane zaposlenih u odjelu sigurnosnih pravila, zaštite od požara, skladištenja otrovnih tvari.

Citolog

provodi citološku studiju preventivnog, dijagnostičkog, hormonskog, citogenetskog materijala; po potrebi obavlja hitni citološki pregled, sudjeluje u zajedničkom radu sa endoskopistom, kirurgom i drugim specijalistima u pribavljanju materijala, po potrebi samostalno obavlja punkcione biopsije;

ostavlja mikropreparacije za arhiviranje, fotografisanje, demonstraciju na konferenciji o kliničkoj biopsiji;

upućuje laboratorijskog asistenta o metodama obrade citološkog materijala, metodama bojenja, broju citoloških preparata;

kontroliše kvalitet i vremenski raspored rada laboratorijskih asistenata, pruža im metodološku pomoć;

u nejasnim slučajevima razgovara o lijekovima sa drugim ljekarima odjeljenja i konsultuje se sa načelnikom. CL;

vrši mikroskopski pregled citološkog materijala, opisuje mikroskopsku sliku i postavlja citološku dijagnozu. Prilikom postavljanja dijagnoze malignog tumora, teške epitelne displazije, procesa koji zahtijevaju hormonsku terapiju i operaciju, zračenje ili citostatsku terapiju, rezultat studije potpisuje voditelj. CL;

izvještava šef TsL o svim nedostacima u proizvodnom radu;

obavlja organizacione i metodološke poslove;

Senior Assistant

organizuje, obezbjeđuje i kontroliše rad srednjeg i mlađeg laboratorijskog osoblja;

održava rasporede, obračunava plate, ispisuje kem. reagensi, materijal za zavoje itd.;

priprema osnovne hemijske rastvore. reagensa, vrši obračun i skladištenje hem. reagensi;

organizuje izučavanje srednjeg i mlađeg osoblja u laboratoriji;

pomaže glavi odjela u izradi izvještaja i prijava za hemij. reagensi i oprema;

prati sanitarno-epidemiološko stanje laboratorije.

Laborant (bolničar-laborant)

obavlja mikroskopske studije profilaktičkog i hormonskog materijala;

izrađuje dokumentaciju za registraciju citološkog materijala;

obrađuje citološki materijal uz pomoć dodatnih tehnika;

vrši hitnu proizvodnju citoloških preparata;

izrađuje izdavanje mikropreparata iz arhive;

brine o instrumentima i opremi;

priprema kem. reagensi;

učestvuje u organizaciono-metodičkom radu na poboljšanju kvaliteta gradiva;

mjesečni izvještaji o obavljenom poslu.

Isporuka, registracija i etiketiranje materijala

Materijal za citološki pregled treba dostaviti u laboratoriju što je prije moguće nakon prijema. (tečni urin, sadržaj cista, eksudati vode, sputum). Na vazduhu osušeni brisevi mogu se čuvati.

Bočice sa materijalom i čaše za bris moraju biti označene (navedeno je ime pacijenta).

U smjeru koji prati materijal treba biti:

prezime, ime i patronim, pol i starost pacijenta;

kako i odakle je materijal dobijen;

u kom obliku se šalje (tečnost, stakleni razmaz), količina;

kratku anamnezu sa obaveznim naznakom prisustva i prirode štetnih efekata, prethodni tretman (posebno hormonski, zračenje, hemoterapija);

podaci iz drugih metoda istraživanja (rendgenski snimak, endoskopija itd.), ako se sumnja na sistemsku bolest (hemoblastoza) - test krvi;

opis statusa localis;

klinička dijagnoza.

Metode dobijanja i priroda materijala za citološko ispitivanje

Materijal za citološki pregled može se dobiti na različite načine. Prije svega to je:

ali) Eksfolijativna citologija gdje se analiziraju:

iscjedak iz različitih organa (mliječne žlijezde, bronhija itd.). Za pripremu preparata na staklo se nanese kapljica pražnjenja i priprema se razmaz. Također možete napraviti otiske sa mjesta ekstrakcije (bradavica mlečne žlezde, izlaz fistule). Bronhijalni iscjedak se obično sakuplja u obliku sputuma u sudu, priprema preparata je detaljno opisana u dijelu o respiratornim studijama,

tečnosti i sadržaj cista se dobijaju punkcijom šupljina (abdominalne, pleuralne i dr.) i cista. Ako nema dovoljno materijala, onda se nanosi na staklo i raspoređuje u obliku tankog mrlja. Značajne količine tečnosti se prethodno centrifugiraju, a zatim se iz sedimenta pripremaju razmazi. Materijal vode za pranje obrađuje se na isti način,

otisci sa sluzokože i kože, ako su dostupni, mogu se napraviti direktno na staklu. U drugim slučajevima, brisevi se pripremaju od struganja lopaticom, od tampona.

Za proučavanje eksfolijativnog materijala u ginekologiji postoje dokazane metode, čiji je opis u odgovarajućem odjeljku.

b) Punkciona citologija- jedna od najčešćih vrsta istraživanja u kliničkoj citologiji.

Tumorske formacije se probijaju, u pravilu, tankom iglom. Aspiraciona biopsija zahtijeva određenu vještinu. Osim toga, da bi se dobio punopravni materijal, mora se ispuniti niz uslova. Konkretno, igla za ubijanje i špric moraju biti suvi. Preliminarna anestezija (uvođenje novokaina) se ne smije provoditi. Za punkciju bogato vaskulariziranih formacija (tiroidna žlijezda, vaskularni tumori, kost i dr.) potrebno je koristiti iglu sa mandrinom, koja se uklanja nakon što se igla ubode na mjesto sa kojeg se materijal treba izvući. dobiti. Na isti način, slijedeći gore opisana pravila i korištenjem posebnih uređaja, punkcije se izvode pod kontrolom rendgenskog zraka, ultrazvuka ili kompjuterske tomografije.

c) Upotreba za citološki pregled potezi-otisci iz biopsijskog i hirurškog materijala značajno povećava efikasnost citološke dijagnostike. Osim toga, morfološki zaključak se može dobiti mnogo ranije od histološkog zaključka.Treba napomenuti izuzetnu vrijednost ovakvih paralelnih studija (citoloških i histoloških) u mogućnosti citohistoloških poređenja, što zauzvrat značajno obogaćuje i jednu i drugu metodu. Za pripremu lijeka potrebno je struganje s biopsije ili hirurškog materijala tankim mrljama razmazati po staklu. Otisci sa reza biopsije ili komada hirurški uklonjenog tkiva nanose se dodirivanjem površine reza na staklo. Ako su otisci napravljeni od tkiva bogatog krvlju (jetra, slezena itd.), potrebno je na filter papiru ukloniti krv sa površine reza i tek onda napraviti otiske na staklu.

d) Sa razvojem endoskopska tehnika obavezan citološki pregled postao je pristupačniji. Savremeni endoskopski aparati imaju posebne uređaje za uzimanje materijala za morfološki pregled. Kada se posebno može dobiti endoskopija;

potezi četkicom,

voda za pranje,

brisevi,

brisevi - otisci iščupanih biopsija.

Izbor metode za uzimanje materijala određen je prirodom lezije, lokalizacijom i mogućnošću provođenja instrumentalnih studija. Poželjno je koristiti u kompleksu sve dostupne metode uzimanja materijala. Konkretno, u slučaju lezija mokraćne bešike, nativni urin se može koristiti za citološki pregled (efikasnost citološke dijagnoze je 40-50%), ispiranje alkoholom (efikasnost citološke dijagnoze je 60-65%), bris-otisci tumora komadi uzeti tokom cistoskopije (efikasnost citološke oko 90% dijagnostike. Uz sveobuhvatan pregled, efikasnost citološke dijagnoze je oko 100%

Citološki pregled je obavezna komponenta različitih metoda kliničkog pregleda i potrebno je prilikom ginekološkog pregleda uzeti bris sa grlića materice i iz cervikalnog kanala, ukoliko se sumnja na patologiju tijela materice, aspirat.

endoskopija:

a) bronhoskopija - brisevi četkice, transbronhijalni punktati, brisevi iz materijala iščupanih biopsija, ispiranja,

b) gastroskopija - potezi kistom, otisci iščupanih biopsija,

c) kolonoskopija, rektoskopija - bris sa pamučnog štapića, potezi kistom, otisci biopsija,

d) cistoskopija - nativni urin, ispiranje alkohola, otisci, sa biopsijskih komada.

e) laringoskopija - mrlje sa zahvaćenih područja i otisci s komadića,

f) koža i sluzokože - brisevi strugotina sa zahvaćenih područja, kod tumora - punkcija tankom iglom.

Meka tkiva, mliječna žlijezda, limfni čvorovi, štitna žlijezda - punkcija tankom iglom.

Punkcija vođena ultrazvukom (tiroidna žlijezda, tumori vrata, jetra, slezena, bubrezi, materica, jajnici, prostate retroperitonealni tumori).

Citološki pregled se obavezno mora podvrgnuti tačkama seroznih šupljina, cistama, iscjetku iz struganja mliječne žlijezde itd.

Stakalca za preparate moraju biti čista, bez masti i suha.

Priprema stakla

1. Čaše se temeljno peru četkom u toploj vodi sa sapunom (ili sa deterdžent) voda.

2. Temeljno isperite u tekućoj toploj vodi.

3. Zatim kuvati 1-2 sata u vodi sa dodatkom sode (2-3%) ili deterdženta.

4. Nakon toga dobro isperite vruća voda i oprati u tekućoj vodi (1-2 sata).

Citološka metoda se zasniva na mikroskopskom pregledu i evaluaciji ćelijskog materijala dobijenog na različite načine iz patološkog žarišta.

Citološka metoda je grana onkomorfologije. Ni u kom slučaju se ne smije suprotstavljati histološkom.

Prednosti i prednosti citološke metode:

1. apsolutna bezopasnost;
2. brzina (u uslovima opremljenosti radnog mesta citologa u okviru operacione jedinice, hitan citološki pregled može se obaviti u roku od 10 minuta). Moderna Diff-Quic tehnika omogućava bojenje razmaza u roku od 15 s, ali se nakon hitnog mikroskopskog pregleda preparati moraju bojati po Pappenheimu, tek tada su pogodni za arhivsku pohranu, odnosno imaju dokumentarnu vrijednost;
3. relativna jednostavnost i dostupnost metode (citološki pregled ne zahtijeva velike materijalne troškove, skupe reagense, alate i opremu);
4. mogućnost korišćenja višestrukih citoloških studija, što je posebno važno kako za procenu dinamike morfoloških promena u toku bolesti, tako i za određivanje terapeutski efekat tretman u toku;
5. mala količina odgovarajućeg materijala za mikroskopski pregled.

Svrha studije koja se razmatra je postavljanje ispravne dijagnoze, ušteda vremena, izbjegavanje hirurška intervencija pri izvođenju biopsije i uznemirenosti pacijenta, bez odlaganja početka liječenja.

Dijagnostički citološki pregled sličan je histološkom pregledu biopsijskog materijala:

1. zajednički cilj (intravitalno prepoznavanje patološki proces);
2. predmet proučavanja (ćelijska i nećelijska komponenta patološkog procesa);
3. principi boja.

Istovremeno, prilikom pripreme brisa neminovno se narušavaju prostorni odnosi strukturnih elemenata tkiva, što značajno ograničava dijagnostičke mogućnosti citološke metode i čini histološku metodu informativnijom u određivanju nozologije tumora i apsolutne u utvrđivanju njegove invazivnosti.

Citološki pregled je poželjniji u slučajevima kada su biopsija komada tkiva i histološki pregled nemogući ili vrlo nepoželjni (ako se sumnja na melanom), ako je potrebno brzo dobiti nalaz mikroskopijom dostupnog materijala u poliklinici i , konačno, u masi preventivni pregledi stanovništva.

Citološka metoda omogućuje procjenu prirode i težine proliferacije epitela, identifikaciju grupe displazija, što omogućava razumnije formiranje grupa s povećanim rizikom od raka različitih lokalizacija. Dinamičko praćenje ove kategorije osoba i sprovođenje njihove morfološke kontrole je praktično nemoguće drugim (posebno invazivnim) metodama istraživanja.

Upotreba citološkog pregleda omogućava postavljanje dijagnoze malignih tumora bilo kojoj lokalizaciji iu bilo kojoj fazi procesa. To je u velikoj mjeri olakšano razvojem endoskopske tehnologije, koja omogućava namjerno pribavljanje materijala za istraživanje od unutrašnje organe ranije nedostupan za morfološke analize bez hirurške intervencije.

Kod prepoznavanja raka u vrlo ranim fazama, citološka metoda ponekad ima prednosti u odnosu na druge dijagnostičke testove. Poznati su slučajevi citološke dijagnostike klinički, radiografski i endoskopski „tihih“ karcinoma želuca, pluća, mokraćne bešike itd.

Dakle, uz odgovarajuće metode uzorkovanja materijala, citološka metoda omogućava:

1. instalirati pravi karakter proces;
2. procijeniti prevalenciju malignog procesa;
3. utvrditi klijanje primarnog tumora u susjedne organe i tkiva;
4. ukazati na izvor metastaza u prisustvu adekvatnog materijala (razlikovati metastaze u kostima od primarnih tumora kostiju, metastaze u plućima - od primarnih rak pluća).

Tumačenje citoloških preparata je složen proces.

Kao rezultat višegodišnje rasprave o specifičnosti malignih ćelija, prihvaćeno je da ne postoje patognomonični znakovi koji su svojstveni samo ćeliji malignog tumora, te bi morfolog, a posebno citomorfolog, u svom radu trebao koristiti kombinaciju znakova. atipije ćelija, kritički procjenjujući njihovo prisustvo i ozbiljnost. Svaki od znakova nema nezavisnu vrijednost.

Uobičajeni znakovi maligniteta ćelija:

1. nepravilan raspored ćelija u grupi, nanošenje slojeva jedne na drugu;
2. nedostatak jasnih granica ćelija;
3. kombinacija unutar jednog kompleksa ili grupe mladih i degenerativno promijenjenih stanica ćelijskih elemenata. Zbog poremećene opskrbe tumora krvlju dolazi do nekroze i na citogramu se pojavljuju stanice sa znacima distrofije. Istovremeno, tumor karakterizira nekontrolirana i vrlo intenzivna reprodukcija tumorskih elemenata. Kombinacija distrofično-nekrotičnih i proliferativno-hiperplastičnih procesa uzrokuje pojavu takvih formacija;
4. povećanje ili smanjenje veličine ćelije (na primjer, prisustvo malih i velikih ćelijskih oblika raka pluća, sarkoma gigantskih stanica i malih stanica);
5. promjena oblika ćelija (poikilocitoza);
6. polimorfizam ćelija;
7. fenomen hemijske anaplazije - bazofilija citoplazme;
8. promjene u citoplazmi: prisutnost inkluzija u njoj, pojava znakova keratinizacije, vakuolizacija različite težine;
9. polimorfizam jezgara;
10. povećanje veličine jezgra;
11. kršenje nuklearno-citoplazmatskog omjera;
12. neravnomjerna raspodjela hromatina;
13. gruba struktura hromatina;
14. nuklearna hiperhromija;
15. kombinacija hipo-, normo- i hiperhromnih jezgara unutar jedne grupe ćelija;
16. prisustvo "golih" jezgara, golih nuklearnih struktura, polimorfnih "golih" jezgara;
17. povećanje veličine i broja nukleola;
18. polimorfizam nukleola;
19. povećanje broja mitoza;
20. prisustvo patoloških mitoza, značajan broj njih.

Kliničar i morfolog moraju raditi zajedno kako bi postavili ispravnu dijagnozu. Ako citolog u svakom pojedinačnom slučaju mora imati kliničke podatke, onda kliničar, zauzvrat, treba da nauči jezik morfologa, njegov pristup i zahtjeve za materijal koji je usmjeren na studiju.

Prilikom slanja materijala na citološki pregled, kliničar mora pravilno i detaljno popuniti prateći formular, navesti godine starosti, pol, broj ambulantne kartice ili anamnezu. Informacije o objektu proučavanja vrlo su važne za citologa: lokalizacija patološkog žarišta (ili nekoliko žarišta). U slučaju uzimanja materijala sa više lokacija iste formacije ili različitih formacija, kliničar je dužan da obilježi briseve i da relevantne podatke u obrascu uputnice. Zaključak citologa treba da odražava i označavanje brisa.

Rezultati citološke studije uvelike ovise o tome koliko je ciljno uzet materijal, kolika je njegova količina i sigurnost. Citološki materijal se prenosi na posebno pripremljena i obrađena staklena stakalca (čista, bez masnoća, suha) i raspoređuje se u tankom sloju. Za ravnomerno postavljanje celokupnog dobijenog materijala, broj slajdova ne treba ograničavati. Najvažnije je da razmazi budu što tanji, a iglom pažljivo olabavite sadržane ugruške i gusta područja ili ih prebacite i rasporedite na nekoliko stakala. Debeli razmazi i razmazi s visokim sadržajem krvi su vrlo slabo fiksirani, što negativno utječe na kvalitetu bojenja ćelijskog materijala i ozbiljno ograničava mogućnosti njegove mikroskopske interpretacije.

Ukoliko je potrebno izvršiti reviziju citoloških preparata u savjetodavne svrhe, kliničar na obrascu uputnice ukratko navodi svrhu revizije, podatke o kliničkom pregledu pacijenta i navodi brojeve svih citoloških i histoloških studija koje su urađene na ovom pacijentu. Kako bi se izbjegla pogrešna interpretacija staničnih promjena, citologu su potrebne sveobuhvatne informacije o svim vrstama tretmana koji se obavlja (hirurška, kemo-, hormonska, fizio- i medikamentozna terapija) uz obaveznu naznaku doze i datuma završetka liječenja. U nedostatku takvih podataka, ćelije identificirane na citogramu s promjenama karakterističnim za terapijsku patomorfozu ili proliferativne i reparativno-regenerativne procese citolog može pogrešno smatrati tumorskim elementima.

Formulacija citološkog zaključka je složen i mukotrpan proces. Prije nego što pređe na mikroskopsko proučavanje citoloških preparata svakog pacijenta, klinički citolog mora se upoznati sa svojim kliničkim podacima, mentalno zamisliti normalnu strukturu organa ili tkiva iz kojeg je uzet materijal, znati granice varijabilnosti ovog tkiva pod razna fiziološka stanja, benigni i maligni tumori. Zaključak citologa zasniva se na rezultatima proučavanja ćelijskog sastava citograma, uzimajući u obzir podatke kliničkog pregleda.

U kliničkoj citologiji postoje 3 odjeljka: eksfolijativni, punkcijski, endoskopski.

Eksfolijativna citologija se zasniva na fiziološkoj "deskvamaciji" ćelija sa sluzokože (folium - list, ex - otpada). Primjer eksfoliativne citologije je mikroskopski pregled sputum, urin, sok prostate, ispiranje raznih organa, bris iz grlića materice, iscjedak iz bradavice mliječne žlijezde, otisci sa erodiranih površina, rane, fistule; tečnosti iz zglobnih i seroznih šupljina, cerebrospinalna tečnost itd.

U posljednje dvije decenije, metoda punkcijske citologije je postala široko rasprostranjena, takođe ima dugu istoriju, ali ne u istoj meri kao eksfolijativna citologija.

Primjer punkcijske citologije je materijal limfnih čvorova, koštane srži, koštanih neoplazmi, štitne žlijezde i mliječnih žlijezda. Potrebna je punkcija bilo kog organa posebna obuka i iskustvo. Velika važnost za uspješnu studiju ima izbor mjesta punkcije, količinu i kvalitet dobijenog ćelijskog materijala. Trenutno se ciljane punkcije formacija često provode pod kontrolom ultrazvuka, kompjuterske tomografije.

Dobivanje materijala za citološki pregled uz pomoć punkcija je u određenoj mjeri traumatično. Što se tiče punkcijskih i aspiracionih biopsija, donedavno su postojale sugestije o mogućoj diseminaciji tumora tokom ovih zahvata. Danas je općeprihvaćeno da je postojeći minimalni rizik nadoknađen ogromnom dobrom za pacijente zbog realne mogućnosti tačne morfološke dijagnoze bolesti (posebno u preoperativnoj fazi iu slučaju vrlo čestih malignih procesa, za pregled konzervativne metode liječenje - zračenje, kemoterapeutsko, kemozračenje).

Treća grana kliničke citologije, endoskopska citologija, ima relativno noviju povijest. Efikasnost citomorfološke metode u utvrđivanju prirode procesa umnogome zavisi od sposobnosti endoskopista da uzme materijal za citološki i histološki pregled. Neophodno je pridržavati se pravila da endoskopist uzima prvu biopsiju iz najpromijenjenijeg dijela sluznice. Ako je pogriješio u odabiru mjesta za biopsiju, naknadne biopsije možda neće biti precizno izvedene zbog pojave krvarenja sluznice. Četkanje (citologija četkice) se smatra poželjnijim za rak jednjaka i ravnog tipa rani rak želuca.

Priprema briseva-otisaka iz biopsijskog endoskopskog materijala takođe ima svoje karakteristike. Citološki preparati se pripremaju nekoliko laganih dodira na predmetno staklo odsječaka tkiva pažljivo uklonjenih iglom iz čeljusne pincete, i "valjanjem" komada na predmetno staklo. Potrebno je osigurati da igla i stakalca budu suhi, pincete nemaju tragove formalina, jer ulazak vode i formalina naglo pogoršava kvalitetu boje razmaza, a time i njegovu interpretaciju.

Priroda patologije koju identificira endoskopist određuje količinu materijala koji se mora uzeti za morfološki pregled. Kod vizuelne slike čira na želucu dovoljno je pripremiti 3-5 brisa, a ako se sumnja na maligni čir, materijal se uzima sa sluznice svih rubova čira i raspoređuje na 10-12 staklenih pločica. Najbolja boja razmaza sa želučane sluznice je hematoksilin-eozin, za identifikaciju područja intestinalne metaplazije - mucikarmin ili alcijansko plavo.

IN kliničku slikučir na želucu razlikuju faze egzacerbacije, izlječenja i remisije. Za vrijeme egzacerbacije ulceroznog procesa u citogramu prevladavaju elementi upale, a u epitelu želučane sluznice izražene su distrofične promjene i fagocitoza. U periodu zarastanja čira na prvom mestu su promene u epitelu regenerativnog reda. Kako se upalni proces smiri i dno ulkusa očisti od nekrotičnih masa, počinje regeneracija želučane sluznice. Sa praktične tačke gledišta, važno je uzeti u obzir težinu regenerativnih izraslina nediferenciranog epitela kako bi se isključila mogućnost pogrešne dijagnoze karcinoma tokom mikroskopskog pregleda i citološkog i histološkog materijala, posebno u slučajevima razvoja epitelna displazija III stepena. Prema literaturi, kada se proučavaju gastrobiopsije, postotak lažno pozitivne dijagnoze karcinoma kreće se od 1,5 do 10,0, a kod pregleda razmaza otiska nešto je manji - 1,0-6,0. Proučavanje endoskopskog materijala citološkim i histološkim metodama ima široku primjenu za diferencijalnu dijagnozu bolesti želuca, otkrivanje hiperplastičnih, metaplastičnih i displastičnih procesa, kao i za određivanje stupnja kontaminacije želučane sluznice Helicobacter pylori. Razjašnjenje oblika gastritisa je prerogativ histološke metode, što je povoljno razlikuje od svih ostalih komponenti sveobuhvatnog gastrološkog pregleda osoba sa gastričnim simptomima.

Rani karcinom želuca se citološki prepoznaje u 92-96,5% slučajeva. Kod pacijenata s uznapredovalim oblikom karcinoma želuca, sadržaj informacija citološke metode uvelike varira: njegova maksimalna vrijednost (95,0%) zabilježena je kod egzofitnog karcinoma, minimalna (71,0%) - kod stenoze. U slučajevima maligniteta hroničnog ulkusa i ulcerativnog karcinoma, proučavanje citološkog materijala omogućava značajno češće utvrđivanje maligne prirode procesa (u 82,0% slučajeva u odnosu na 45,0, 59,0 i 68% kada se koriste rendgenski, endoskopski i histološke metode).

Veoma je preporučljivo koristiti citološku metodu prilikom pregleda pacijenata sa sumnjom na rak pluća. U specijalizovanim medicinskim ustanovama pregled pacijenata sa lokalnim radiološkim promenama treba da obuhvati bronhoskopiju uz obavezno uzimanje materijala za citološke i histološke studije koje omogućavaju dijagnostiku karcinoma u 82,0-85,0% slučajeva. Jednostavnije, ali manje efektivno je mikroskopsko ispitivanje spontano izdvojenog sputuma (osetljivost metode - 20-40,0%). Bolje se pokazao način dobijanja indukovanog sputuma, tj. prikupljeni nakon desetominutne inhalacije sa rastvorom enzima (osetljivost metode - 60-80,0%). Da bi se provjerila priroda perifernih plućnih formacija, indicirana je transtorakalna punkcija. Proučavanje razmaza punkcionog materijala omogućava citološki prepoznavanje raka i određivanje njegovog histološkog oblika (u 89,0% odnosno 93% slučajeva).

Citološki znaci različitih oblika karcinoma pluća dobro su proučeni i predstavljeni u Citološkoj klasifikaciji tumora (WHO, 1982). Ako u brisevima ima dovoljnog ćelijskog materijala, citolog može identificirati sve vrste raka pluća. Poteškoće objektivne i subjektivne prirode mogu se javiti kod malog broja i loše očuvanosti tumorskih ćelija, sa mozaičnom strukturom tumora, diferencijalne dijagnoze slabo diferenciranog epidermoidnog i adenonog karcinoma, prepoznavanja bronhoalveolarnog adenokarcinoma i srednjeg podtipa malih ćelija pluća. rak.

Proučavanje citološkog materijala dobivenog punkcijom neoplazmi mliječne žlijezde često se svodi na razjašnjenje pitanja prisutnosti ili odsutnosti raka, iako su dijagnostičke mogućnosti citološke metode mnogo šire. Analiza citograma omogućava kod 80-87,0% pacijenata sa karcinomom dojke da se utvrdi maligna priroda procesa, da se utvrdi stepen diferencijacije tumorskih ćelija, u nekim slučajevima da se identifikuju posebni oblici raka (medularni, apokrini, mukozni, Paget). U benignim procesima mliječne žlijezde, ćelijski sastav punktata omogućuje identifikaciju hiperplastičnih promjena u epitelu, procjenu njihove težine, a ponekad i nozološku dijagnostiku (cista, papiloma, fibroadenom, tumor u obliku lista).

Citološki skrining za rak grlića materice je priznat i široko se koristi u cijelom svijetu. Zadatak citologa je postavljanje dijagnoze upalnih procesa, virusne infekcije, displastične promjene u epitelu grlića materice i rani karcinom grlića materice. U tom cilju, zaposleni u citološkim laboratorijama obezbjeđuju kvalifikovani mikroskopski pregled prvobitno uzetih briseva, kao i materijala dobijenog tokom dubinskog pregleda i dinamičkog praćenja žena sa utvrđenom patologijom genitalija. Svjetsko iskustvo u primjeni citološke metode dokazalo je njenu stvarnu sposobnost prepoznavanja najinicijalnijih oblika raka grlića materice (cr. in situ i stadijum I).

Sa porastom incidencije karcinoma tijela materice, registrovanog u mnogim zemljama svijeta, kao i u Bjelorusiji, postala je neophodna upotreba citološke metode za dijagnostiku prekancera i karcinoma ove lokalizacije. Atipična hiperplazija endometrijuma je prekancerozno stanje endometrijuma. Citogram stanične atipične hiperplazije endometrija je osebujan: u razmazima se nalaze grupe i mali slojevi ćelija endometrija s uvećanim, umjereno polimorfnim prilično laganim jezgrama s homogenim fino dispergiranim hromatinom i nekonturiranom citoplazmom. Da bi prepoznao ovu varijantu atipične hiperplazije endometrijuma, citolog treba da kombinuje ciljano, temeljito proučavanje ćelijskog sastava citograma sa sposobnošću da identifikuje manje izražene znakove atipije ćelija endometrijuma.

Onkonosološka dijagnoza malignih tumora malih ćelija, koji se javljaju uglavnom u djece i uključuju ne-Hodgkinov limfom, neuroblastom, rabdomiosarkom i Ewingov sarkom, izuzetno je važna. Njihova tačna preoperativna citološka dijagnoza doprinosi histogenetski utemeljenom liječenju, što pozitivno utiče na prognozu bolesti. Sve vrste sarkoma malih ćelija karakteriše relativno homogeni ćelijski sastav zaobljenih nediferenciranih blast ćelija, raštrkanih, labavih, fokalnih nakupina, redova i lanaca, što omogućava citologu da dijagnostikuje malignu prirodu procesa. Prepoznavanje histogeneze neoplazme moguće je kada se među nediferenciranim ćelijama otkrije više diferenciranih tumorskih elemenata, koje imaju svjetlosno-optički određene znakove neuralne, mioblastne ili limfoidne diferencijacije. Obavezno uzmite u obzir podatke kliničkog pregleda pacijenta. Treba imati na umu da je kod ne-Hodgkinovih limfoma ćelijski sastav homogen, raštrkane tumorske ćelije leže u istoj ravnini preparata i imaju visoku mitotičku aktivnost. Razmazi sadrže limfoglandularna tijela i funkcionalno aktivne makrofage.

Citološku sliku rabdomiosarkoma karakterizira miksoidna pozadina lijeka i izražen polimorfizam tumorskih elemenata uz prisustvo dvo- i multinuklearnih stanica.

Citograme tumora neuroblastoma karakterizira ćelijski sastav malih nediferenciranih i diferenciranih neuroblasta smještenih izolovano i u bliskim klasterima sa formiranjem pseudorozeta, fokalnim prisustvom neuropila i pojedinačnih ganglijskih ćelija.

Visoka celularnost razmaza, kombinacija malih „tamnih“ i više diferenciranih ćelija koje leže muflasto oko krvnih sudova i/ili u obliku rozeta, lanaca, kao i oštro pozitivna PAS reakcija u tumorskim ćelijama omogućavaju citološki dijagnosticirati Ewingov sarkom.

Posljednjih godina značajno se povećao interes onkomorfologa za kvantitativne i imunomorfološke metode istraživanja. Upotreba savremene opreme (analizatori slike visoko društvo), kompjuterske tehnike i specijalizovani matematički programi omogućavaju prelazak sa subjektivnih i samo kvalitativnih dijagnostičkih metoda na objektivne i kvantitativne metode citomorfološke analize. Upotreba imunomorfoloških metoda, uz standardne metode citološkog i histološkog pregleda, može značajno poboljšati kvalitet pojašnjene dijagnostike, što je važno za rješavanje problema nozološke dijagnostike tumora i procjenu prognoze bolesti. U kliničkoj citologiji bliskoj budućnosti, telepatologija će zauzeti svoje mjesto, uz pomoć koje se otvaraju izgledi za tačnu dijagnostiku i kvalificirano savjetovanje preparata na daljinu.

Ćelijski nivo organizacije života

§ 16. Istorija proučavanja ćelije. Metode citološkog istraživanja.

Istorija proučavanja ćelije.

Svijet ćelija ostao je potpuno nepoznat sve do sredine 17. stoljeća, kada su ljudi naučili kako brusiti sočiva i pomoću njih proširiti mogućnosti vida.

Jedan od prvih kreatora mikroskopa bio je Robert Hooke fizičar, meteorolog, biolog, inženjer, arhitekta. IN 1665 objavio je album crteža pod nazivom "makrografija", koji je predstavio svoja zapažanja pod mikroskopom.

Jedan od Hookeovih nadarenih savremenika bio je Holanđanin Anthony van Leeuwenhoek, koji je stvorio 200 mikroskopa vlastitog posebnog dizajna. Leeuwenhoek je postigao povećanje objekata 270 puta i napravio izvanredna otkrića.

Robert Brown 1833 otkrio jezgro u ćeliji. Poslije 1825. Jan Purkinje razvio efikasne metode za pripremu i bojenje preparata za mikroskopsku opremu.

Ćelijska teorija je predložena za biljke u 1837 Nemački botaničar Matija Šlajden, a proširio na životinjski svijet od strane njegovog prijatelja, fiziologa Theodor Schwann. Nešto kasnije je dopunjena Rudolf Virchow, koji u 1885 formulisao propoziciju "Svaka ćelija dolazi iz ćelije."

Sredinom XIX veka. ćelijska teorija postao univerzalno priznat i osnova za nauku o ćeliji - citologija. Do kraja XIX veka. otkrivene su mnoge ćelijske komponente. Naučnici su ih opisali i dali im imena.

Ali unutra 1945 citolozi su prvo pregledali ćelije uz pomoć elektronski mikroskop i vidio mnoge ranije nepoznate strukture. Dakle, odlučujuću ulogu u razvoju citologije imaju nova otkrića u drugim naukama, posebno u fizici.

Metode citološkog istraživanja.

Glavna metoda je metoda svjetlosne mikroskopije. Podrazumijeva upotrebu svjetlosnog mikroskopa, ali se pod svjetlosnim mikroskopom mogu pregledati samo posebno pripremljeni citološki preparati.

Za pripremu preparata citolozi koriste stakalce i posebno pripremljene predmete koji se mogu vidjeti.

Najčešće su ove strukture bezbojne, pa ih je potrebno farbati posebnim bojama, svaki put različitim, ovisno o tome koje strukture želite vidjeti.

Postoje dvije metode: metoda pripreme preparata pod pritiskom - predmet koji se proučava jednostavno se usitnjava u jedan sloj između stakala i pokrivnog stakla i metoda pripreme tankih preseka, koji se sastoje od jednog sloja ćelija.

Koristi se za proučavanje živih ćelija metoda fazno-kontrastne mikroskopije. Zasnovan je na činjenici da se pojedinačni dijelovi prozirne ćelije međusobno razlikuju po gustoći i lomu svjetlosti.

Prilikom proučavanja živih ćelija, oni također koriste metoda fluorescentne mikroskopije. Njegovo značenje leži u činjenici da brojne supstance imaju sposobnost da sijaju kada apsorbuju svetlosnu energiju. Na primjer, ako pregledamo biljne stanice u fluorescentnom mikroskopu, tada će na tamnoplavom tijelu biti vidljiva crvena zrna, sjajno svijetle - to su hloroplasti.

Postoji metoda koja koristi označene izotope - autoradiografska metoda- registracija tvari označenih izotopima. Pomoću ove metode možete vidjeti koji dijelovi ćelije dobivaju tvari označene radioaktivnim izotopima.

Metoda elektronske mikroskopije citolog je otkrio one ćelijske strukture koje su manje od valne dužine svjetlosti. Zahvaljujući ovoj metodi, postalo je moguće razmotriti viruse i organele na kojima se odvija sinteza proteina (ribosomi).

Citolozi također mogu dobiti i proučavati različite ćelijske komponente koristeći ćelijsko frakcioniranje.Ćelija se prvo uništava, a zatim se ćelijske strukture izoluju pomoću posebnog uređaja - centrifuge.

Metoda ćelijske kulture je metoda dugotrajnog skladištenja i uzgoja u posebnim hranljivim medijima ćelija, tkiva, malih organa ili njihovih dijelova izolovanih iz ljudskog, životinjskog ili biljnog tijela. Važna prednost ove metode je mogućnost posmatranja vitalne aktivnosti ćelija pomoću mikroskopa.

Vrijednost citoloških metoda u dijagnostici i liječenju bolesti ljudi.

1) Citološke metode koristi se u medicini za istraživanja fiziološko stanje ljudskog tijela na osnovu proučavanja strukture ćelija. Koriste se za otkrivanje bolesti krvi, prepoznavanje malignih i benignih tumora, mnogih bolesti respiratornog, probavnog, mokraćnog, nervnog sistema i njihovo liječenje.

2) matične ćelije je nezrela ćelija sposobna za samoobnavljanje i razvoj u specijalizovane ćelije tela. U tijelu odrasle osobe, matične ćelije se nalaze uglavnom u koštana srž i to u vrlo malim količinama u svim organima i tkivima. Mogu se koristiti za liječenje mnogih bolesti.

§ 17. Građa ćelija prokariota i eukariota.

Jedinstvo strukture ćelija.

Sadržaj bilo koje ćelije odvojen je od spoljašnjeg okruženja posebnom strukturom - plazma membrana (plazmalema). Ova izolacija vam omogućava da stvorite vrlo posebno okruženje unutar ćelije, za razliku od onoga što je okružuje. Stoga se u ćeliji mogu dogoditi oni procesi koji se ne dešavaju nigdje drugdje, oni se nazivaju životni procesi.

Unutrašnje okruženje naziva se živa ćelija ograničena plazma membranom citoplazma. To uključuje hijaloplazma(osnovna transparentna supstanca) i ćelijske organele, kao i razne nestalne strukture - inkluzije. Organele koje se nalaze u bilo kojoj ćeliji također uključuju ribosom, gdje se odvija sinteza proteina.

Struktura eukariotskih ćelija.

eukarioti su organizmi čije ćelije imaju jezgro. Core- ovo je organela eukariotske ćelije, u kojoj se pohranjuju nasljedne informacije zapisane u hromozomima i iz koje se kopiraju nasljedne informacije. hromozom je DNK molekul integriran s proteinima. Jezgro sadrži nucleolus- mjesto gdje se formiraju druge važne organele uključene u sintezu proteina - ribozomi. Ali ribosomi se formiraju samo u jezgri, a rade (tj. sintetiziraju protein) u citoplazmi. Neki od njih su slobodni u citoplazmi, a neki su vezani za membrane, formiraju mrežu koja se naziva endoplazmatski.

Ribosomi- nemembranske organele.

Endoplazmatski retikulum je mreža tubula ograničenih membranama. Postoje dva tipa: glatka i zrnasta. Ribosomi se nalaze na membranama granularnog endoplazmatskog retikuluma, pa se u njemu odvija sinteza i transport proteina. A glatki endoplazmatski retikulum je mjesto sinteze i transporta ugljikohidrata i lipida. Nema ribozome.

Za sintezu proteina, ugljikohidrata i masti potrebna je energija koju u eukariotskoj ćeliji proizvode "energetske stanice" ćelije - mitohondrije.

Mitohondrije- dvomembranske organele u kojima se odvija proces ćelijskog disanja. Organska jedinjenja se oksidiraju na mitohondrijskim membranama i hemijska energija se akumulira u obliku posebnih energetskih molekula. (ATP).

U ćeliji postoji i mjesto gdje se organska jedinjenja mogu akumulirati i odakle se mogu transportovati - to je golgijev aparat, sistem ravnih membranskih vrećica. Učestvuje u transportu proteina, lipida, ugljenih hidrata. Organele unutarćelijske probave formiraju se i u Golgijevom aparatu - lizozomi.

Lizozomi- jednomembranske organele, karakteristične za životinjske ćelije, sadrže enzime koji mogu razgraditi proteine, ugljikohidrate, nukleinske kiseline, lipide.

Ćelija može sadržavati organele koje nemaju membransku strukturu, kao što su ribozomi i citoskelet.

citoskelet- ovo je mišićno-skeletni sistem ćelije, uključuje mikrofilamente, cilije, flagele, ćelijski centar koji proizvodi mikrotubule i centriole.

Postoje organele koje su karakteristične samo za biljne ćelije, - plastidi. Postoje: hloroplasti, hromoplasti i leukoplasti. Proces fotosinteze odvija se u hloroplastima.

Takođe u biljnim ćelijama vakuole- otpadni proizvodi ćelije, koji su rezervoari vode i jedinjenja rastvorenih u njoj. Eukariotski organizmi uključuju biljke, životinje i gljive.

Struktura prokariotskih ćelija.

prokarioti su jednoćelijski organizmi koji nemaju jezgro.

Prokariotske ćelije su male veličine, zadržavaju genetski materijal u obliku kružnog DNK molekula (nukleoida). Prokariotski organizmi uključuju bakterije i cijanobakterije, koje su se nekada zvale modrozelene alge.

Ako se proces aerobnog disanja javlja kod prokariota, tada se za to koriste posebne izbočine plazma membrane - mezozomi. Ako su bakterije fotosintetske, tada se proces fotosinteze odvija na fotosintetskim membranama - tilakoidi.

Sinteza proteina kod prokariota se odvija u ribozomi. U prokariotskim ćelijama ima malo organela.

Hipoteze o porijeklu organela eukariotske ćelije.

Prokariotske ćelije su se pojavile na Zemlji ranije od eukariotskih.

1) simbiotska hipoteza objašnjava mehanizam nastanka nekih organela eukariotske ćelije - mitohondrija i fotosintetskih plastida.

2) Hipoteza invaginacije- tvrdi da porijeklo eukariotske ćelije potiče iz činjenice da je predak bio aerobni prokariot. Organele u njemu nastale su kao rezultat invaginacije i ljuštenja dijelova membrane, nakon čega je uslijedila funkcionalna specijalizacija u jezgru, mitohondrijima, hloroplastima drugih organela.

§ 18. Ćelijske membrane. transport tvari kroz membrane. Površinski aparat ćelije, njegove funkcije.

Ćelijske membrane.

biološke membrane- to su tanke susjedne strukture molekularnih dimenzija koje se nalaze na površini ćelija i subcelularnih dijelova, kao i tubuli i vezikuli koji prodiru u protoplazmu. Funkcija bioloških membrana je regulacija transporta jona, šećera, aminokiselina i drugih metaboličkih proizvoda.

U srcu svake membrane nalazi se dvostruki sloj fosfolipida.

Međutim, bilipidni sloj još nije gotova membrana, već samo njena osnova. Proteini pozvani membranskih proteina. Proteini membrane određuju mnoga svojstva membrana. Uključeni u membrane i ugljikohidrate, formiraju komplekse s proteinima ili lipidima. Membrana se sastoji od bilipidnog sloja u kojem plutaju (ili su fiksirane) proteinske molekule, formirajući u njoj neku vrstu mozaika.

Struktura membrane odgovara njenim funkcijama: transport, barijera i receptor.

1) Funkcija barijere. Membrana je barijera koja sprečava ulazak raznih hemijske supstance i drugi agenti.

2) Funkcije receptora. Površina membrane ima veliki skup receptora koji omogućavaju specifične reakcije sa različitim agensima.

3) Transportna funkcija. Transport jona i supstanci odvija se kroz membranu.

Pokrivajući ćeliju i odvajajući je od okoline, biološke membrane osiguravaju integritet ćelija i organela. Održava neravnomjernu raspodjelu kalija, natrijuma, hlorida i drugih jona između protoplazme i okoline.

Najvažnija membrana u ćeliji je plazmalema- površinska membrana. Obavlja funkcije barijere, transporta, receptora, signalizacije.

transport tvari kroz membrane.

Postoje dva aktivna procesa: egzocitoza i endocitoza.

Supstance se uklanjaju iz ćelije egzocitoza- fuzija intracelularnih vezikula sa plazma membranom. Supstance mogu ući u ćeliju kroz endocitoza. U procesu endocitoze, plazma membrana formira udubljenja i raste, koji se zatim, ljušteći, pretvaraju u vezikule ili vakuole.

Postoje dvije vrste endocitoze:

- pinocitoza- apsorpcija tečnosti i rastvorenih materija uz pomoć malih mehurića;

- Fagocitoza- apsorpcija velikih čestica kao što su mikroorganizmi ili ostaci ćelija.

U slučaju fagocitoze nastaju veliki mjehurići koji se tzv vakuole.

Molekule prolaze kroz membrane zahvaljujući sljedećim procesima: jednostavna difuzija, olakšana difuzija, aktivni transport.

jednostavna difuzija- ovo je primjer pasivnog transporta, on prelazi iz područja sa većom koncentracijom molekula u područje sa nižom koncentracijom. Jednostavnom difuzijom, nepolarne (hidrofobne) supstance rastvorljive u lipidima i male nenabijene molekule (na primjer, voda) prodiru u ćeliju. Međutim, većina tvari se transportuje kroz membranu uz pomoć transportnih proteina koji su uronjeni u nju. Postoje dva oblika žalbe: olakšanu difuziju i aktivni transport.

Olakšana difuzija zbog gradijenta koncentracije, a molekuli se kreću duž tog gradijenta. Međutim, molekul je nabijen, tako da na njegov transport utječu i gradijent koncentracije i membranski potencijal.

aktivni transport je transport otopljenih tvari protiv gradijenta koncentracije koristeći energiju ATP-a. Energija je neophodna jer se tvar mora kretati, suprotno svojoj prirodnoj težnji da se kreće difuzijom, u suprotnom smjeru. Primjer je natrijum-kalijum pumpa. Prema zakonima difuzije, joni Na se neprestano kreću unutar ćelije, a K+ joni se stalno kreću van ćelije. Kršenje potrebne koncentracije ovih jona dovodi do smrti ćelije.

Površinski aparat ćelije.

Raznolikost prokariotskih i eukariotskih stanica sastoji se od dijelova: površinskog aparata, citoplazme, nuklearnog aparata.

Površinski aparatiĆelija obavlja tri funkcije koje su univerzalne za sve vrste ćelija: barijeru, transport, receptor. Također može obavljati niz specifičnih funkcija (na primjer, mehaničku turgorsku funkciju ćelijskog zida u biljnim ćelijama). Površinski aparat ćelije čine sistemi: plazma membrana, epimembranski kompleks i submembranski (tj. pidmembrana) mišićno-skeletni aparat.

plazma membrana, ili plazmalema, je glavni, univerzalni sistem površinskog aparata za sve ćelije. Ispod njega je submembranski sistem koji je uključen u transmembranski transport i prijem i dio je citoplazme.

Supramembranska struktura površinski aparati vrše interakciju ćelija sa spoljašnjim okruženjem ili sa drugim ćelijama. Životinjske ćelije imaju epimembranski kompleks, odnosno glikokaliks, igra važnu ulogu u receptorskoj funkciji ćelija. Glikokaliks se sastoji od ugljikohidrata, relativno je tanak i elastičan.

Izvedene supramembranske strukture uključuju ćelijski zid. To moraju biti ćelije biljaka, gljivica i bakterija. Ćelijski zid biljaka sadrži celulozu, gljive - hitin, bakterije - murein. Prilično je krut, ne skuplja se. Preko puta ćelijski zid propušta vodu, soli, molekule mnogih organskih supstanci. Fenomen plazmolize i deplazmolize u biljnim stanicama.

Plazmoliza- to je odvajanje citoplazme od membrane kada je ćelija uronjena u hipertonu, tj. eksterno koncentrovan, rastvor. Ako se životinjske ćelije urone u hipertonični rastvor, one se smanjuju. Ponekad plazmolizirane ćelije ostaju žive. Ako se takve ćelije urone u vodu, u kojoj je koncentracija soli niža nego u ćeliji, dolazi do deplazmolize.

Deplazmoliza- ovo je povratak citoplazme biljnih ćelija iz stanja plazmolize u prvobitno stanje.