Bağışıklık sisteminin dendritik hücreleri. T-hücreleri kukladır veya kanseri tedavi etmek için T-lenfositlerin nasıl yeniden programlanacağı Çocuklar: beyaz cisimlerin normu

Timus T-lenfositleri, T-hücre reseptörleri (eng. TCR) ve çeşitli yardımcı reseptörler (yüzey belirteçleri) edinerek farklılaşır. Edinilmiş bağışıklık yanıtında önemli bir rol oynarlar. Yabancı antijenleri taşıyan hücrelerin tanınmasını ve yok edilmesini sağlarlar, monositlerin, NK hücrelerinin etkisini arttırırlar ve ayrıca immünoglobulin izotiplerinin değiştirilmesinde yer alırlar (bağışıklık tepkisinin başlangıcında, B hücreleri IgM'yi sentezler, daha sonra IgG üretimine geçerler, IgE, IgA).

• 1 T-lenfosit Çeşitleri
  • 1.1 T yardımcıları
  • 1.2 T-öldürücüler
  • 1.3 T-baskılayıcılar
• 2 Timusta farklılaşma
  • 2.1 β-seçimi
  • 2.2 Pozitif seçim
  • 2.3 Negatif seçim
• 3 Aktivasyon
• 4 Not

T-lenfosit türleri

T-hücresi reseptörleri (eng. T-Hücresi Reseptörü (TCR)), antijen sunan hücrelerin yüzeyinde Majör Histo-uyumluluk Kompleksi (MHC) molekülleri ile bağlantılı işlenmiş antijenlerin tanınmasından sorumlu olan T-lenfositlerin ana yüzey protein kompleksleridir. T hücresi reseptörü, başka bir polipeptit membran kompleksi olan CD3 ile ilişkilidir. CD3 kompleksinin işlevleri, hücreye sinyal iletiminin yanı sıra membran yüzeyinde T hücresi reseptörünün stabilizasyonunu içerir. T hücresi reseptörü, diğer yüzey proteinleri, TCR ko-reseptörleri ile ilişkilendirilebilir. Korreseptöre ve gerçekleştirilen işlevlere bağlı olarak, iki ana T hücresi türü ayırt edilir.

T yardımcıları

T yardımcıları (İngiliz yardımcısından - asistandan) - Ana işlevi adaptif bağışıklık tepkisini arttırmak olan T-lenfositleri. T-öldürücüleri, B-lenfositleri, monositleri, NK hücrelerini doğrudan temas yoluyla ve ayrıca hümoral olarak sitokinleri serbest bırakarak aktive ederler. T yardımcılarının ana özelliği, hücre yüzeyinde CD4 yardımcı reseptör molekülünün varlığıdır. T-yardımcıları, T-hücre reseptörü majör histo-uyumluluk kompleksi II sınıfının (eng. Major Histo-uyumluluk Kompleksi II (MHC-II)) moleküller ile bağlantılı bir antijen ile etkileşime girdiğinde antijenleri tanır.

T-katiller

T yardımcıları ve T katilleri bir grup oluşturur efektör T-lenfositleri bağışıklık tepkisinden doğrudan sorumludur. Aynı zamanda, başka bir hücre grubu var. düzenleyici T-lenfositler işlevi, efektör T-lenfositlerin aktivitesini düzenlemek olan. T-efektör hücre aktivitesinin düzenlenmesi yoluyla bağışıklık tepkisinin gücünü ve süresini modüle ederek, düzenleyici T-hücreleri vücudun kendi antijenlerine karşı toleransı korur ve otoimmün hastalıkların gelişmesini engeller. Birkaç baskılama mekanizması vardır: hücreler arasında doğrudan temasla doğrudan ve uzaktan, örneğin çözünür sitokinler aracılığıyla uzaktan gerçekleştirilen.

T-baskılayıcılar

γδ T-lenfositleri, modifiye edilmiş bir T-hücresi reseptörüne sahip küçük bir hücre popülasyonudur. Alıcısı iki α ve β alt biriminden oluşan diğer birçok T hücresinin aksine, γδ lenfositlerinin T hücresi reseptörü γ ve δ alt birimlerinden oluşur. Bu alt birimler, MHC kompleksleri tarafından sunulan peptit antijenleri ile etkileşime girmez. γδ T-lenfositlerinin lipid antijenlerinin tanınmasında rol oynadığı varsayılmaktadır.

Timusta farklılaşma

Tüm T hücreleri kırmızı hematopoietik kök hücrelerden elde edilir. kemik iliği Timusa göç eden ve olgunlaşmamış olarak farklılaşan timositler. Timus, MHC ile sınırlı ve kendi kendine toleranslı, tamamen işlevsel bir T hücre repertuarının geliştirilmesi için gerekli mikro ortamı yaratır.

Timosit farklılaşması ikiye ayrılır Farklı aşamalarçeşitli yüzey belirteçlerinin (antijenler) ifadesine bağlı olarak. En erken aşamada, timositler CD4 ve CD8 ko-reseptörlerini eksprese etmez ve bu nedenle çift negatif (İngiliz Çift Negatif (DN)) (CD4-CD8-) olarak sınıflandırılır. Bir sonraki aşamada, timositler her iki alıcıyı da ifade eder ve Çift Pozitif (DP) (CD4+CD8+) olarak adlandırılır. Son olarak, son aşamada, alıcılardan sadece birini (English Single Positive (SP)) ifade eden hücreler seçilir: ya (CD4+) ya da (CD8+).

Erken aşama birkaç alt aşamaya ayrılabilir. Bu nedenle, DN1 alt aşamasında (Çift Negatif 1), timositler aşağıdaki belirteç kombinasyonuna sahiptir: CD44+CD25-CD117+. Bu belirteç kombinasyonuna sahip hücreler aynı zamanda erken lenfoid progenitörleri (İngiliz Erken Lenfoid Progenitörleri (ELP)) olarak da adlandırılır. Farklılaşmalarında ilerleyen ELP hücreleri aktif olarak bölünür ve sonunda diğer hücre tiplerine (örneğin B-lenfositleri veya miyeloid hücreler) dönüşme yeteneğini kaybeder. DN2 alt aşamasına (Çift Negatif 2) gidildiğinde, timositler CD44+CD25+CD117+ eksprese eder ve erken T-hücresi progenitörleri (Early T-hücresi Progenitörleri (ETP)) haline gelir. DN3 (Çift Negatif 3) alt aşaması sırasında, ETP hücreleri CD44-CD25+ kombinasyonuna sahiptir ve işleme girer β-seçimi.

β seçimi

T hücresi reseptör genleri, üç sınıfa ait tekrar eden segmentlerden oluşur: V (değişken), D (çeşitlilik) ve J (birleştirme). Somatik rekombinasyon sürecinde, her sınıftan birer gen segmenti birleştirilir (V(D)J rekombinasyonu). V(D)J bölümlerinin birleşik dizisi, her bir reseptör zincirinin değişken alanları için benzersiz diziler ile sonuçlanmaktadır. Değişken alan dizilerinin oluşumunun rastgele doğası, çok sayıda farklı antijeni tanıyabilen ve sonuç olarak hızla gelişen patojenlere karşı daha etkili koruma sağlayan T hücrelerinin üretilmesine izin verir. Bununla birlikte, aynı mekanizma genellikle T hücresi reseptörünün işlevsel olmayan alt birimlerinin oluşumuna yol açar. TCR-β reseptör alt birimini kodlayan genler, DN3 hücrelerinde rekombinasyona uğrayan ilk genlerdir. İşlevsel olmayan bir peptidin oluşma olasılığını dışlamak için, TCR-β alt birimi, sözde oluşturan, değişmez ön-TCR-a alt birimi ile bir kompleks oluşturur. TCR öncesi reseptör. İşlevsel bir pre-TCR reseptörü oluşturamayan hücreler apoptoz ile ölür. β-seçimini başarıyla geçen timositler, DN4 alt aşamasına (CD44-CD25-) geçer ve işleme tabi tutulur. pozitif seçim.

pozitif seçim

Ön TCR reseptörünü yüzeylerinde eksprese eden hücreler, majör histo-uyumluluk kompleksi (MHC) moleküllerine bağlanamadıkları için hala immünokompetan değildir. MHC moleküllerinin TCR reseptörü tarafından tanınması, timositlerin yüzeyinde CD4 ve CD8 koreseptörlerinin varlığını gerektirir. Pre-TCR reseptörü ile CD3 ko-reseptörü arasında bir kompleksin oluşumu, β alt birim genlerinin yeniden düzenlenmesinin inhibisyonuna yol açar ve aynı zamanda CD4 ve CD8 genlerinin ekspresyonunun aktivasyonuna neden olur. Böylece timositler çift pozitif (DP) (CD4+CD8+) olur. DP timositleri, her iki MHC kompleksini (MHC-I ve MHC-II) eksprese eden kortikal epitel hücreleri ile etkileşime girdikleri yerde aktif olarak timus korteksine göç eder. Kortikal epitelyumun MHC kompleksleri ile etkileşime giremeyen hücreler apoptoza girerken, böyle bir etkileşimi başarıyla tamamlayan hücreler aktif olarak bölünmeye başlar.

negatif seçim

Pozitif seçilim geçiren timositler, timusun kortiko-medüller sınırına göç etmeye başlar. Medullaya girdikten sonra, timositler, medüller timik epitel hücrelerinin (mTEC'ler) MHC komplekslerinde sunulan vücudun kendi antijenleriyle etkileşime girer. Kendi antijenleriyle aktif olarak etkileşime giren timositler apoptoza uğrar. Negatif seçim, vücudun immünolojik toleransının önemli bir unsuru olan, otoimmün hastalıklara neden olabilen kendi kendini aktive eden T hücrelerinin ortaya çıkmasını engeller.

aktivasyon

Timusta pozitif ve negatif seçilimi başarıyla geçen, vücudun çevresine ulaşan ancak antijenle teması olmayan T lenfositlere denir. saf T hücreleri(İng. Naif T hücreleri). Saf T hücrelerinin ana işlevi, vücudun bağışıklık sistemi tarafından önceden bilinmeyen patojenlere yanıt vermektir. Saf T hücreleri antijeni tanıdıktan sonra aktive olurlar. Aktive hücreler aktif olarak bölünmeye başlar ve birçok klon oluşturur. Bu klonlardan bazıları efektör T hücreleri, bu tip lenfositlere özgü işlevleri yerine getiren (örneğin, T yardımcıları durumunda sitokin salgılarlar veya T-öldürücüler durumunda etkilenen hücreleri lize ederler). Aktive olmuş hücrelerin diğer yarısı, hafıza T hücreleri. Bellek hücreleri, bir antijenle ilk temastan sonra, aynı antijenle tekrarlanan etkileşim oluşana kadar inaktif formda kalır. Böylece, hafıza T hücreleri, daha önce hareket eden antijenler hakkında bilgi depolar ve birincil olandan daha kısa sürede gerçekleştirilen ikincil bir bağışıklık tepkisi oluşturur.

T-hücresi reseptörü ve ko-reseptörlerinin (CD4, CD8) majör histo-uyumluluk kompleksi ile etkileşimleri, saf T hücrelerinin başarılı aktivasyonu için önemlidir, ancak efektör hücrelere farklılaşma için kendi başlarına yeterli değildir. Aktive hücrelerin müteakip çoğalması için, sözde etkileşim. kostimülatör moleküller. T yardımcıları için bu moleküller, T hücresinin yüzeyindeki CD28 reseptörü ve antijen sunan hücrenin yüzeyindeki immünoglobulin B7'dir.

notlar

1. Murphy K., Travers P., Walport M. Janeway's Immunobiology. - New York: Garland Science, 2011. - 888 s. - ISBN 0-8153-4123-7.
2. Alberts B., Johnson A., Lewis J., Raff M., Roberts K., Walter P. Hücrenin Moleküler Biyolojisi. - New York: Garland Science, 2002. - 1367 s. - ISBN 0-8153-3218-1.
3. Holtmeier W., Kabelitz D. Gammadelta T hücreleri, doğuştan gelen ve uyarlanabilir bağışıklık tepkilerini birbirine bağlar // Kimyasal immünoloji ve alerji. - 2005. - Cilt. 86.-S. 151-83. - ISBN 978-3-8055-7862-2. - DOI:10.1159/000086659 - PMID 15976493.
4. Schwarz B. A., Bhandoola A. Kemik iliğinden timusa insan ticareti: timopoez için bir ön koşul // Immunol. Rev.. - 2006. - Cilt. 209.-S. 47–57. - DOI:10.1111/j.0105-2896.2006.00350.x - PMID 16448533.
5. Sleckman B. P. Lenfosit antijen reseptörü gen düzeneği: çoklu düzenleme katmanları // Immunol Res. - 2005. - Cilt. 32. - S. 153-8.

t lenfositler daha yüksektir, t lenfositler normaldir, t lenfositler artar, t lenfositler azalır

T-lenfositler Hakkında Bilgi

T-lenfositler, veya T hücreleri(lat. t hymus "timus") - timusta memelilerde öncülerden gelişen lenfositler - kırmızı kemik iliğinden giren pretimositler. Timusta, T-lenfositleri, T-hücre reseptörleri (TCR, English TCR) ve çeşitli yardımcı reseptörler (yüzey belirteçleri) edinerek farklılaşır. Edinilmiş bağışıklık yanıtında önemli bir rol oynarlar. Yabancı antijenleri taşıyan hücrelerin tanınmasını ve yok edilmesini sağlarlar, monositlerin, NK hücrelerinin etkisini arttırırlar ve ayrıca immünoglobulin izotiplerinin değiştirilmesinde yer alırlar (bağışıklık tepkisinin başlangıcında, B hücreleri IgM'yi sentezler, daha sonra IgG üretimine geçerler). , IgE, IgA).

T-lenfosit türleri

T-hücresi reseptörleri, majör histo-uyumluluk kompleksi (MHC) molekülleri ile ilişkili işlenmiş antijenlerin tanınmasından sorumlu olan T-lenfositlerin ana yüzey protein kompleksleridir. Majör Histouyumluluk Kompleksi (MHC)) antijen sunan hücrelerin yüzeyinde. T hücresi reseptörü, başka bir polipeptit membran kompleksi olan CD3 ile ilişkilidir. CD3 kompleksinin işlevleri, hücreye sinyal iletiminin yanı sıra membran yüzeyinde T hücresi reseptörünün stabilizasyonunu içerir. T hücresi reseptörü, ko-reseptörleri olan diğer yüzey proteinleri ile birleşebilir. Korreseptöre ve gerçekleştirilen işlevlere bağlı olarak, iki ana T hücresi türü ayırt edilir.

T yardımcıları

T yardımcıları (İngiliz yardımcısından - asistandan) - Ana işlevi adaptif bağışıklık tepkisini arttırmak olan T-lenfositleri. Doğrudan temas yoluyla T-öldürücüleri, B-lenfositleri, monositleri, NK hücrelerini aktive ederler ve ayrıca hümoral olarak sitokinleri serbest bırakırlar. T yardımcılarının ana özelliği, hücre yüzeyinde CD4 yardımcı reseptör molekülünün varlığıdır. Yardımcı T hücreleri, T hücre reseptörü, majör histo-uyumluluk kompleksi sınıf II moleküllerine bağlı bir antijen ile etkileşime girdiğinde antijenleri tanır. Majör Histouyumluluk Kompleksi II (MHC-II)).

T-katiller

T yardımcıları ve T katilleri bir grup oluşturur efektör T-lenfositleri bağışıklık tepkisinden doğrudan sorumludur. Aynı zamanda, başka bir hücre grubu var. düzenleyici T-lenfositler işlevi, efektör T-lenfositlerin aktivitesini düzenlemek olan. T efektör hücre aktivitesinin düzenlenmesi yoluyla bağışıklık tepkisinin gücünü ve süresini modüle ederek, düzenleyici T hücreleri vücudun kendi antijenlerine karşı toleransı korur ve otoimmün hastalıkların gelişmesini engeller. Birkaç baskılama mekanizması vardır: hücreler arasında doğrudan temasla doğrudan ve uzaktan, örneğin çözünür sitokinler aracılığıyla uzaktan gerçekleştirilen.

γδ T-lenfositleri

T-lenfositler, modifiye edilmiş bir T-hücresi reseptörüne sahip küçük bir hücre popülasyonudur. Reseptörü tarafından oluşturulan diğer birçok T hücresinin aksine α (\displaystyle \alpha ) ve β (\displaystyle \beta ) alt birimler, T hücre reseptörü γ δ (\displaystyle \gamma \delta )-lenfositler oluşur γ (\displaystyle \gama ) ve δ (\displaystyle \delta ) alt birimler. Bu alt birimler, MHC proteinleri tarafından sunulan peptit antijenleri ile etkileşime girmez. varsayılır ki γ δ (\displaystyle \gamma \delta ) T-lenfositler, lipid antijenlerinin tanınmasında rol oynar.

T-baskılayıcılar

Bağışıklık tepkisinin merkezi düzenlemesini sağlayan T-lenfositler.

Timusta farklılaşma

T-lenfositlerin farklılaşma aşamaları

Tüm T hücreleri, timusa göç eden ve olgunlaşmamış olarak farklılaşan kırmızı kemik iliği hematopoietik kök hücrelerinden kaynaklanır. timositler. Timus, MHC ile sınırlı ve kendi kendine toleranslı, tamamen işlevsel bir T hücre repertuarının geliştirilmesi için gerekli mikro ortamı yaratır.

Timosit farklılaşması, çeşitli yüzey belirteçlerinin (antijenler) ifadesine bağlı olarak farklı aşamalara ayrılır. En erken aşamada, timositler CD4 ve CD8 ko-reseptörlerini eksprese etmez ve bu nedenle çift negatif (İngiliz Çift Negatif (DN)) (CD4-CD8-) olarak sınıflandırılır. Bir sonraki aşamada, timositler her iki alıcıyı da ifade eder ve çift pozitif (İng. Double Positive (DP)) (CD4+CD8+) olarak adlandırılır. Son aşamada, ko-reseptörlerden (İng. Single Positive (SP)) sadece birini eksprese eden hücreler seçilir: (CD4+) veya (CD8+).

Erken aşama birkaç alt aşamaya ayrılabilir. Bu nedenle, DN1 alt aşamasında (İngiliz Çift Negatif 1) timositler aşağıdaki işaretleyici kombinasyonuna sahiptir: CD44 + CD25 -CD117 +. Bu belirteç kombinasyonuna sahip hücrelere erken lenfoid progenitörler de denir. Erken Lenfoid Progenitörler (ELP)). Farklılaşmalarında ilerleyen ELP, aktif olarak bölünür ve sonunda diğer hücre tiplerine (örneğin, B-lenfositleri veya miyeloid hücreler) dönüşme yeteneğini kaybeder. DN2 alt aşamasına (İng. Double Negative 2) gidildiğinde, timositler CD44 + CD25 + CD117 + eksprese eder ve erken T hücresi progenitörleri haline gelir (eng. Erken T-hücresi Progenitörleri (ETP)). DN3 alt aşamasında (İng. Double Negative 3) ETP hücreleri CD44-CD25+ kombinasyonuna sahiptir ve işleme girer β-seçimi.

β seçimi

T hücresi reseptör genleri, üç sınıfa ait tekrar eden segmentlerden oluşur: V (eng. değişken), D (eng. çeşitlilik) ve J (eng. birleştirme). Somatik rekombinasyon sırasında, her sınıftan birer gen segmenti birbirine bağlanır (V(D)J rekombinasyonu). V(D)J segment dizilerinin rastgele kombinasyonu, reseptör zincirlerinin her biri için benzersiz değişken alan dizileriyle sonuçlanır. Değişken alan dizilerinin oluşumunun rastgele doğası, çok sayıda farklı antijeni tanıyabilen ve sonuç olarak hızla gelişen patojenlere karşı daha etkili koruma sağlayan T hücrelerinin üretilmesine izin verir. Bununla birlikte, aynı mekanizma genellikle T hücresi reseptörünün işlevsel olmayan alt birimlerinin oluşumuna yol açar. Reseptörün β-alt birimini kodlayan genler, DN3 hücrelerinde rekombinasyona uğrayan ilk genlerdir. İşlevsel olmayan bir peptidin oluşma olasılığını dışlamak için, β-alt birimi, T-hücresi reseptörünün değişmez α-alt birimi ile sözde oluşturan bir kompleks oluşturur. pre-T hücre reseptörü (pre-TCR). Fonksiyonel pre-TCR oluşturamayan hücreler apoptoz ile ölür. β-seçimini başarıyla geçen timositler, DN4 alt aşamasına (CD44 -CD25 -) geçer ve işleme tabi tutulur. pozitif seçim.

pozitif seçim

Yüzeylerinde pre-TCR eksprese eden hücreler, majör histo-uyumluluk kompleksinin moleküllerine bağlanamadıkları için hala immünokompetan değildir. MHC moleküllerinin T hücre reseptörü tarafından tanınması, timositlerin yüzeyinde CD4 ve CD8 ko-reseptörlerinin varlığını gerektirir. Pre-TCR ve CD3 ko-reseptörü arasında bir kompleksin oluşumu, β-alt birim genlerinin yeniden düzenlenmesinin inhibisyonuna yol açar ve aynı zamanda CD4 ve CD8 genlerinin ekspresyonunun aktivasyonuna neden olur. Böylece timositler çift pozitif (DP) (CD4+CD8+) olur. DP-timositler, her iki MHC sınıfının (MHC-I ve MHC-II) proteinlerini eksprese eden kortikal epitel hücreleri ile etkileşime girdikleri yer olan timus korteksine aktif olarak göç eder. Kortikal epitelyumun MHC proteinleri ile etkileşime giremeyen hücreler apoptoza girerken, bu etkileşimi başarıyla gerçekleştiren hücreler aktif olarak bölünmeye başlar.

negatif seçim

Pozitif seçilim geçiren timositler, timusun kortiko-medüller sınırına göç etmeye başlar. Medullaya girdikten sonra, timositler, medüller timik epitel hücreleri (mTEC'ler) üzerinde MHC proteinleri ile kombinasyon halinde sunulan vücudun kendi antijenleriyle etkileşime girer. Kendi antijenleriyle aktif olarak etkileşime giren timositler apoptoza uğrar. Negatif seçim, vücudun immünolojik toleransının önemli bir unsuru olan otoimmün hastalıklara neden olabilen kendi kendini aktive eden T hücrelerinin ortaya çıkmasını engeller.

İlk çalışma her zaman bir lökosit sayımıdır ("Hematolojik çalışmalar" bölümüne bakınız). Periferik kan hücrelerinin sayısının hem bağıl hem de mutlak değerleri değerlendirilir.

Ana popülasyonların (T-hücreleri, B-hücreleri, doğal öldürücüler) ve T-lenfositlerin alt popülasyonlarının (T-yardımcıları, T-CTL'ler) belirlenmesi. Bağışıklık durumunun birincil çalışması ve ciddi bozuklukların tespiti için bağışıklık sistemi DSÖ, CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, CD4/CD8 oranının belirlenmesini tavsiye etmiştir. Çalışma, ana lenfosit popülasyonlarının nispi ve mutlak sayısını belirlemeye izin verir: T-hücreleri - CD3, B-hücreleri - CD19, doğal öldürücüler (NK) - CD3-CD16++56+, T lenfositlerin alt popülasyonları (T- yardımcıları CD3+ CD4+, T-sitotoksik CD3+ CD8+ ve oranları).

Araştırma yöntemi

Lenfositlerin immünofenotiplenmesi, akış sitometrelerinde lazer akış sitoflorometrisi kullanılarak bağışıklık sistemi hücreleri üzerinde yüzeysel diferansiyel anginaya karşı monoklonal antikorlar kullanılarak gerçekleştirilir.

Lenfositlerin analizi için bölge seçimi, tüm lökositlerin yüzeyinde bulunan ek işaretleyici CD45'e göre yapılır.

Numune alma ve saklama koşulları

Sabahları kübital toplardamardan kesinlikle aç karnına alınan venöz kan, test tüpünde belirtilen işarete kadar vakum sistemine alınır. Antikoagülan olarak K2EDTA kullanılır. Numune alındıktan sonra numune tüpü, kanı antikoagülanla karıştırmak için 8-10 kez yavaşça ters çevrilir. Depolama ve nakliye kesinlikle 18–23°С'de dikey pozisyon 24 saatten fazla değil

Bu koşullara uyulmaması yanlış sonuçlara yol açar.

Sonuçların yorumlanması

T-lenfositler (CD3+ hücreleri). Artan bir miktar, akut ve kronik lenfositik lösemide gözlenen bağışıklık sisteminin hiperaktivitesini gösterir. Göreceli indekste bir artış, bazı virüslerde meydana gelir ve Bakteriyel enfeksiyonlar hastalığın başlangıcında, kronik hastalıkların alevlenmesi.

Mutlak T-lenfosit sayısındaki bir azalma, hücresel bağışıklığın bir eksikliğini, yani bağışıklığın hücresel efektör bağlantısının bir eksikliğini gösterir. Çeşitli etiyolojilerin iltihaplanmalarında, malign neoplazmalarda, travma, ameliyat, kalp krizi, sigara içme, sitostatik alma sonrası tespit edilir. Hastalığın dinamiklerindeki sayılarındaki artış, klinik olarak olumlu bir işarettir.

B-lenfositler (CD19+ hücreleri) Azalma, fizyolojik ve konjenital hipogamaglobulinemi ve agamaglobulinemi, bağışıklık sisteminin neoplazmaları, immünosupresanlarla tedavi, akut viral ve kronik bakteriyel enfeksiyonlar ve dalağın çıkarılmasından sonraki durum ile gözlenir.

CD3-CD16++56+ fenotipli NK lenfositleri Doğal öldürücü hücreler (NK hücreleri), büyük granüler lenfositlerin bir popülasyonudur. Virüsler ve diğer hücre içi antijenler, tümör hücreleri ve allojenik ve ksenojenik kökenli diğer hücrelerle enfekte olmuş hedef hücreleri parçalayabilirler.

NK hücrelerinin sayısındaki artış, antitransplantasyon bağışıklığının aktivasyonu ile ilişkilidir, bazı durumlarda bronşiyal astımda görülür, viral hastalıklar, nekahat döneminde malign neoplazmalar ve lösemi ile artar.

CD3+CD4+ fenotipli yardımcı T lenfositler Otoimmün hastalıklarda mutlak ve nispi miktarlarda artış gözlenir, alerjik reaksiyonlar, biraz bulaşıcı hastalıklar. Bu artış, bağışıklık sisteminin antijene uyarıldığını gösterir ve hiperreaktif sendromların teyidi görevi görür.

Mutlak ve nispi T hücrelerinin sayısında bir azalma, düzenleyici bağışıklık bağlantısını ihlal eden hiporeaktif bir sendromu gösterir, HIV enfeksiyonu için patognomik bir işarettir; meydana gelir kronik hastalıklar(bronşit, pnömoni, vb.), katı tümörler.

CD3+ CD8+ fenotipli T-sitotoksik lenfositler Hemen hemen tüm kronik enfeksiyonlarda, viral, bakteriyel, protozoal enfeksiyonlarda artış saptanır. HIV enfeksiyonunun karakteristiğidir. Viral hepatit, uçuk, otoimmün hastalıklarda azalma görülür.

CD4+/CD8+ oranı CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) oranının araştırılması, yalnızca HIV enfeksiyonunun izlenmesi ve ARV tedavisinin etkinliğinin kontrol edilmesi için önerilir. T-lenfositlerin, T-yardımcı alt popülasyonlarının, CTL'nin ve bunların oranının mutlak ve göreli sayısını belirlemenizi sağlar.

Değer aralığı 1.2–2.6'dır. Konjenital immün yetmezliklerde (DiGeorge, Nezelof, Wiskott-Aldrich sendromu), viral ve bakteriyel enfeksiyonlarda, kronik süreçlerde, radyasyona maruz kalma ve toksik durumlarda azalma görülür. kimyasal maddeler, multipl miyelom, stres, yaşla birlikte azalır, endokrin hastalıkları, katı tümörler. HIV enfeksiyonu için patognomik bir işarettir (0,7'den az).

Otoimmün hastalıklarda, akut T-lenfoblastik lösemi, timoma, kronik T-lösemide 3'ten fazla değerde bir artış.

Orandaki değişiklik, belirli bir hastadaki yardımcıların ve CTL'lerin sayısıyla ilgili olabilir. Örneğin, hastalığın başlangıcında akut pnömonide CD4+ T hücrelerinin sayısındaki azalma, indekste bir azalmaya yol açarken, CTL'ler değişmeyebilir.

Patolojilerde bağışıklık sistemindeki değişikliklerin ek araştırması ve tespiti için akut veya kronik bir enflamatuar sürecin varlığının ve aktivitesinin derecesinin bir değerlendirmesini gerektiren durumlarda, CD3+HLA-DR+ fenotipi ile aktive edilmiş T-lenfositlerin ve CD3+CD16+ ile TNK hücrelerinin sayısının sayılması tavsiye edilir. +56+ fenotip.

CD3+HLA-DR+ fenotipli T ile aktive olan lenfositler Geç aktivasyon belirteci, bağışıklık hiperreaktivitesinin bir göstergesi. Bu işaretleyicinin ifadesi ile, bağışıklık tepkisinin şiddeti ve gücü yargılanabilir. Akut hastalığın 3. gününden sonra T-lenfositlerde görülür. Hastalığın olumlu seyri ile normale döner. T-lenfositlerdeki ekspresyon artışı, kronik inflamasyonla ilişkili birçok hastalıkla ilişkilendirilebilir. Hepatit C, pnömoni, HIV enfeksiyonu, katı tümörler, otoimmün hastalıkları olan hastalarda artışı kaydedildi.

CD3+CD16++CD56+ fenotipli ТNK lenfositleri Yüzeylerinde CD16++ CD 56+ işaretleri taşıyan T-lenfositler. Bu hücreler hem T hem de NK hücrelerinin özelliklerine sahiptir. Çalışma, akut ve kronik hastalıklar için ek bir belirteç olarak önerilmektedir.

Periferik kandaki azalmaları çeşitli organa özgü hastalıklarda ve sistemik hastalıklarda gözlenebilir. otoimmün süreçler. Çeşitli etiyolojilerin enflamatuar hastalıklarında, tümör süreçlerinde bir artış kaydedildi.

T-lenfosit aktivasyonunun erken ve geç belirteçlerinin incelenmesi (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) ayrıca akut ve kronik hastalıklarda IS'deki değişiklikleri değerlendirmek, teşhis, prognoz, hastalığın seyrinin izlenmesi ve devam eden tedavi için reçete edilir.

CD3+CD25+ fenotipi, IL2 reseptörü ile T ile aktive olan lenfositler CD25+ bir erken aktivasyon belirtecidir. T-lenfositlerin (CD3+) fonksiyonel durumu, IL2 (CD25+) için eksprese edici reseptörlerin sayısı ile kanıtlanır. Hiperaktif sendromlarda bu hücrelerin sayısı artar (akut ve kronik lenfositik lösemi, timoma, greft reddi), ek olarak, artışları iltihaplanma sürecinin erken bir aşamasını gösterebilir. Periferik kanda, hastalığın ilk üç gününde tespit edilebilirler. Konjenital immün yetmezlikler, otoimmün süreçler, HIV enfeksiyonu, mantar ve bakteriyel enfeksiyonlarda bu hücrelerin sayısında azalma gözlenebilir, iyonlaştırıcı radyasyon, yaşlanma, ağır metal zehirlenmesi.

CD8+CD38+ fenotipli T-sitotoksik lenfositler CTL lenfositlerinde CD38+ varlığı, çeşitli hastalıklar. HIV enfeksiyonu için bilgilendirici gösterge, yanık hastalığı. Kronik inflamatuar süreçlerde, onkolojik ve bazı endokrin hastalıklarda CD8+CD38+ fenotipine sahip CTL'lerin sayısında bir artış gözlenir. Terapi sırasında oran azalır.

CD3-CD56+ fenotipli doğal öldürücülerin alt popülasyonu CD56 molekülü, yaygın olarak temsil edilen bir yapışkan moleküldür. sinir dokusu. Doğal öldürücülere ek olarak, T-lenfositler de dahil olmak üzere birçok hücre tipinde eksprese edilir.

Bu göstergedeki bir artış, CD3-CD16+ fenotipli NK hücrelerinden daha düşük sitolitik aktiviteye sahip olan belirli bir öldürücü hücre klonunun aktivitesinin genişlemesini gösterir. Bu popülasyonun sayısı hematolojik tümörler (NK hücreli veya T hücreli lenfoma, plazma hücreli miyelom, aplastik büyük hücreli lenfoma), kronik hastalıklar ve bazı viral enfeksiyonlarla artar.

Azalma, birincil immün yetmezliklerde not edilir, viral enfeksiyonlar, sistemik kronik hastalıklar, stres, sitostatik ve kortikosteroidlerle tedavi.

CD95+ reseptörü apoptoz için reseptörlerden biridir. Apoptoz, hasarlı, yaşlı ve enfekte hücrelerin vücuttan uzaklaştırılması için gerekli olan karmaşık bir biyolojik süreçtir. CD95 reseptörü, bağışıklık sisteminin tüm hücrelerinde eksprese edilir. Apoptoz için reseptörlerden biri olduğu için bağışıklık sisteminin işleyişinin kontrolünde önemli bir rol oynar. Hücreler üzerindeki ifadesi, hücrelerin apoptoza hazır olup olmadığını belirler.

Hastaların kanındaki CD95+-lenfosit oranındaki azalma, hastalığın nüksetmesine, patolojik sürecin kronikleşmesine, hastalığın nüksetmesine yol açabilen, kusurlu ve enfekte olmuş kendi hücrelerinin ayıklanmasının son aşamasının etkinliğinin ihlal edildiğini gösterir. otoimmün hastalıkların gelişimi ve tümör transformasyonu olasılığında bir artış (örneğin, papillomatöz enfeksiyonlu rahim ağzı kanseri ). CD95 ekspresyonunun belirlenmesi miyelo- ve lenfoproliferatif hastalıklarda prognostik değere sahiptir.

Viral hastalıklarda, septik durumlarda ve narkotik ilaç kullanımında apoptoz yoğunluğunda artış gözlenir.

Aktive lenfositler CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Test, T-lenfositlerin fonksiyonel durumunu yansıtır ve hastalığın seyrini izlemek ve çeşitli etiyolojilerin enflamatuar hastalıkları için immünoterapiyi izlemek için önerilir.

Hücre aktivasyonu, dinlenme durumundan işlevsel olarak aktif duruma geçişleri olarak anlaşılır - makrofajlar reaktif oksijen türleri üretir, mast hücreleri granülleri atar, kas hücreleri kasılır, vb. Bir lenfosit durumunda, aktivasyon aynı zamanda dinlenme durumundan (G0) çıkmak anlamına gelir, ancak biraz farklı bir anlamda: dinlenme lenfositi dışarıdadır. Hücre döngüsü, ve aktivasyonu, döngüye giriş anlamına gelir. Lenfositlerin aktivasyonunun bu sonucu derinden işlevseldir, çünkü lenfositlerin işlevinin herhangi bir tezahüründen önce üremeleri gerekir (çünkü her klondaki ilk hücre sayısı küçüktür). Bu, popülasyonu klonal bir yapıya sahip olmayan doğal öldürücüler - lenfositler için geçerli değildir. NK hücrelerinin aktivasyonu, çoğalma ile ilişkili değildir ve sitotoksik bir işlevi yerine getirmeye hazır olma durumuna geçiş anlamına gelir.
T hücre aktivasyonunun moleküler temeli
Lenfositler dahil olmak üzere hücrelerin aktivasyonu her zaman birçok genin ekspresyonu ile ilişkilidir. Lenfositler söz konusu olduğunda, aktivasyon her şeyden önce klonun proliferatif genişlemesini sağlayan genlerin ekspresyonuna yol açmalıdır. T hücrelerinin çoğalma için hazırlanmasının özü, öncelikle otokrin genlerin ifadesinden oluşur. Büyüme faktörü- IL-2 ve reseptörü veya daha doğrusu bu reseptörün a-zinciri, reseptörün işlevlerini yerine getirmesi için bir koşul olarak görev yapan sitokin için gerekli afinite seviyesinin elde edilmesini sağlar. Bu genlerin her ikisi de uyarılabilir; dinlenme durumunda, kapatılırlar, ancak tetikleyici bir etkiye yanıt olarak ifade edilirler. Geni açma sinyali, belirli proteinler - transkripsiyon faktörleri ile spesifik etkileşim alanlarını içeren düzenleyici (promoter) bölgesinden gelir. Bu proteinlerin bazıları başlangıçta hücrede aktif bir formda bulunur, ancak çoğu yoktur ve de novo sentezlenebilir veya fosforilasyon veya inhibitör alt birimin çıkarılmasıyla aktive edilebilir. Böylece aktivasyonun moleküler temeli, indüklenebilir genlerin dahil edilmesini sağlayan gerekli transkripsiyon faktörlerinin oluşumudur.
T-lenfositler, aktivasyon indükleyicileri tarafından aktive edilir. Fizyolojik koşullar altında, böyle bir indükleyici antijenik bir uyarıcıdır. Kendi başına, T-helper'ın APC ile teması üzerine antijen tanıma, membran reseptörünün uzaysal ayrışması ve çekirdekte lokalize olan genler nedeniyle gen aktivitesini etkileyemez. TCR, bir antijene bağlandıktan sonra hücreye girer, çekirdeğe göç etmek ve gen aktivitesini etkilemek için değil, bölünmek için girer. Bununla birlikte, antijenik kompleks, bir kostimülatör etki ile kombinasyon halinde TCR'ye bağlandığında, çekirdeğe ulaşan ve gen ekspresyonunu düzenleyen bir sinyal ortaya çıkar. Sinyal iletimi kaskad prensibine göre gerçekleştirilir. Sinyal iletiminin farklı aşamalarında, enzim molekülleri (esas olarak sinyal iletiminin ardışık her aşamasında proteinleri aktive eden protein kinazlar) ve ayrıca adaptör ve GTP bağlayıcı proteinler tarafından gerçekleştirilir. Sinyal başlangıçta çifttir, çünkü iletimi TCR ve CD28'den eş zamanlı olarak gerçekleştirilmektedir. Daha sonra bu yollar kesişir ve tekrar birkaç kola ayrılır. Her sinyal yolu boyunca sinyal iletiminin nihai sonucu, bir transkripsiyon faktörünün oluşumudur. Şek. 3.90, transkripsiyon faktörlerinin oluşumu ve gen aktivasyonu ile sonuçlanan hücre içi sinyal iletiminin tipik bir şemasını göstermektedir. T hücrelerinin aktivasyonu, NF-AT, NF-kB ve AP-1 olmak üzere üç transkripsiyon faktörünün oluşumunu gerektirir. Daha sonra, dendritik hücreler tarafından sunulan bir antijenin tanınması üzerine T-yardımcı aktivasyon örneğini kullanarak hücre içi sinyal iletiminin uygulanmasını ele alıyoruz.
MHC-II-peptid kompleksinin bağlanması, TCR molekülünde ve bununla ilişkili CD4 çekirdek eptor molekülünde konformasyonel değişikliklere neden olur. Bunun sadece reseptörlerin yapısını mı değiştirdiği yoksa oligomerize olup olmadığı henüz tam olarak bilinmemektedir. Bu tür değişiklikler, CD4 ile bağlantılı reseptör ve koreseptör - Lck (p56lck) ve CD3 ile bağlantılı Fyn (p59fyn) ile bağlantılı tirozin kinazları aktive eder. Bu tirozin kinazlar, reseptöre doğrudan bitişik olmaları ve reseptör kompleksine girmeleri nedeniyle reseptör veya proksimal olarak adlandırılır. Bu kinazların her ikisi de Src kinaz ailesine aittir. Bu ailenin kinazları SH1, SH2 ve SH3 alanlarını içerir (SH - Src-homolojisinden) (Şekil 3.91). İlk etki alanı vardır enzimatik aktivite, geri kalanı diğer kinazlar ve adaptör proteinlerle etkileşime girer. Tirozin kinazların işlevi, enzimatik olanlar da dahil olmak üzere işlevlerin aktivasyonu ve tezahürü için gerekli olan tirozin kalıntısındaki hedef proteinleri fosforile etmektir. Reseptör kinazların hedefleri çoktur. Bunlar, Fyn ve Lck moleküllerinin kendilerini (otofosforilasyonlarına neden olan) ve ayrıca TCR polipeptit zincirlerini ve diğer kinazları içerir. Lck kinazın hedefleri özellikle çeşitlidir.
Bununla birlikte, reseptör kinazların aktivasyonunun ilk koşulu, tam tersine, yeniden sağlayan fosforilasyonlarıdır.

hiperfosforileden normale geçer. Gerçek şu ki, hareketsiz bir hücrede, Lck kinazın SH2 alanı, yapısal olarak aktive edilmiş Csk kinaz tarafından C-terminal tirozin tortusu Y505'in fosforilasyonu nedeniyle katlanmış bir formdadır. Fosforillenmiş Y505, molekülün C-terminalinin çekildiği Sffi alanındaki bir tirozin tortusu ile bir fosfat grubu aracılığıyla etkileşime girer. Bu formda enzim aktif değildir, çünkü SH1 alanındaki fonksiyonel olarak önemli Y394 tortusu fosforile edilemez. Böyle bir fonksiyonel blokajı kaldırmak için, fosforilasyon gereklidir, ardından tirozin fosfatazların katılımıyla gerçekleştirilen molekülün yerleştirilmesi gerekir. Reseptör kinazların "çalışma" durumuna transferindeki ana rol, sitoplazmik alanı tirozin fosfataz aktivitesine sahip olan CD45 molekülü tarafından oynanır. Dendritik hücre ile T-helper arasındaki yakın temasın oluşmasını engelleyen bu büyük molekülün önce immün sinaps bölgesinden çıkarıldığı ve daha sonra bazı moleküllerin bu bölgeye geri dönerek görevlerini yerine getirdikleri daha önce belirtilmişti. fonksiyon - reseptör tirozin kinaz moleküllerinin fosforilasyonu. Y394 tortusu fosforilasyon için uygun hale geldiğinde, Lck tirozin kinaz aktivitesi gösterebilir.
TCR-CD3 kompleksinin polipeptit zincirlerinden iletilen sinyallerin üretilmesinde en önemlisi, ITAM aktivasyon dizisinin y-, 5-, e- ve Z-zincirlerinin sitoplazmik bölgesinde bulunmasıdır. defalarca bahsedildi. Bu motifin yapısı şu şekildedir: YXXI / L / VX (6-8) YXXI / L / V (burada Y tirozindir, X herhangi bir kalıntıdır, I / L / V izolösin, lösin veya valindir) (Şek. 3.92). Tirozin kalıntılarının fosforilasyonu

Pirinç. 3.92. Aktivasyon ve inhibitör motiflerin özelliklerinin karşılaştırılması (ITAM ve ITIM)

ITAM'da bu bölgeyi, daha uzakta bulunan sinyal moleküllerinin benzer bölgeleri tarafından tanınması için erişilebilir hale getirir. TCR polipeptit zincirleri arasında, sinyal iletimi için en önemli olan Z zinciridir. Her biri bir ITAM bölgesine sahip olan TCR'nin y-, 5- ve e-zincirlerinin aksine, Z-zincirinin sitoplazmik kısmı, tirozin kinaz ZAP-70'in tirozin kalıntıları ile etkileşime girmek üzere tasarlanmış 3 ITAM dizisi içerir. (Z ile ilişkili proteinden - ^- ilişkili proteinden; kütle 70 kDa) - liganda bağlandığında TCR'den sinyal iletiminde önemli bir faktör. Z zincirinin fosforilasyonu, T hücre aktivasyonunun en sorumlu ve aynı zamanda en savunmasız aşamasıdır. Bu molekülün tüm ITAM motiflerinin fosforilasyonunu sağlamak için gerekli olduğuna inanılmaktadır. uzun süreli bakım T lenfositlerin teması ve dentritik hücreler. Dinlenme halindeki bir T hücresinin Z zincirinde, 1 tirozin tortusu fosforile edilir; fosforilasyonun olmaması apoptoz gelişimine yol açar (Şekil 3.93). Z zinciri ve ZAP kinazın etkileşiminden sonra başlar

Pirinç. 3.94. T hücresi aktivasyonu sırasında sinyal yollarının şeması. MHC molekülünün kompleksinin bir antijenik epitop ile birlikte uyarılma ile birlikte tanınması, hücre aktivasyonu için gerekli olan 3 transkripsiyon faktörünün oluşumunu sağlayan 5 basamak yoluyla çekirdeğe iletilen sinyallerin tetiklenmesini indükler. Kalın kontur, gösterildiği faktörleri daire içine almıştır yüksek derece kostimülasyona bağımlılık

Bir aktivasyon sinyalinin iletimi için birkaç paralel yol şeklinde tam ölçekli bir süreç ortaya çıkar (Şekil 3.94).
ZAP-70 molekülü, Syk ailesinin tirozin kinazlarına aittir. İki SH2 alanından oluşan bir tandem içerir. F zinciri ile etkileşiminin koşulu, ITAM f zincirindeki tirozin kalıntılarının ön fosforilasyonudur. Fosforilasyondan sonra, ITAM fchain motiflerindeki 2. tirozin tortusu, ZAP-70 kinazın S^-domenlerinin tirozini ile etkileşime girer. Sonuç olarak, phchain tirozinin fosfat grubu, ZAP-70 molekülünün Sffi bölgesinin tirozini ile ortak hale gelir. Bunu, ZAP-70 molekülünün enzimatik alanındaki tirozin kalıntılarının fosforilasyonu, tirozin kinazlar Lck ve muhtemelen Fyn tarafından gerçekleştirilir, bu da molekülün enzimatik (kinaz) aktivitesinin dahil edilmesine yol açar.
Daha fazla sinyal iletimi, ZAP-70'in ana substratı - adaptör protein LAT (T-hücrelerinin aktivasyonu için Linker'dan - T-hücresi aktivasyon bağlayıcısı) ile etkileşiminden kaynaklanmaktadır. Bu protein zarla ilişkilidir ve salların bir parçasıdır. ZAP-70 tarafından katalize edilen fosforilasyondan sonra LAT, daha fazla sinyal transdüksiyonunda yer alan sinyal moleküllerini bağlama yeteneğini kazanır: adaptör proteinler SLP-76, Grb2, faktör Vav ve ayrıca PLCy1 ve PI3K enzimleri. Bahsedilen proteinlerin bazılarının aktivasyonu LAT'a doğrudan değil dolaylı olarak bağlıdır. Yani, SH3 alanları aracılığıyla

Grb2 ailesinin adaptör proteinleri, SLP-76 ve Sos faktörleri, sinyal yolağına bağlıdır. SLP-76, sırayla, PLСy1 ve GTPase Ras'ın sinyal yoluna bağlantıya aracılık eder. PLCy1'in aktivasyonu, lenfosit aktivasyonu sırasında hücre içi sinyal iletiminde yer alan üçüncü (Src ve Syk'den sonra) tirozin kinaz ailesi olan Btk ailesine ait Itk tirozin kinazın katılımıyla gerçekleşir. LAT'ın doğrudan ve dolaylı katılımı ile aktivasyon sürecinde yer alan tüm sinyal faktörleri, hücre zarına alınır ve fosfoinositid bileşenleri ile etkileşime girer. SLP-76, Vav ve Nck'nin etkileşimi sırasında oluşan kompleks, aktive hücrelerin hücre iskeletindeki yeniden düzenlemelerin aracıları olarak hizmet eden hücre iskeleti proteinleri PAK ve WASP ile reaksiyona girer.
Aktive edilmiş PLCy1, membrana bağlı kalan diasilgliserol (DAG) ve inositol-1,4,5-trifosfat oluşturmak üzere fosfatidilinositol 4,5-bifosfatın parçalanmasını katalize eder (Şekil 3.95). İnositol trifosfat sitoplazmaya girer ve hücre içi depolamadan Ca2+ iyonlarının salınmasına neden olan endoplazmik retikulumun yüzeyindeki reseptörlerle etkileşime girer. İkincisinin tükenmesi, hücre zarında Ca2+ iyonlarının hücre dışı boşluktan hücreye girdiği Ca2+'ya bağlı kanalların açılmasına neden olur. Sonuç olarak, hücre sitoplazmasındaki serbest Ca2+ iyonlarının konsantrasyonu artar. Ca2+ iyonları, transkripsiyon faktörü NF-AT'nin (aktive edilmiş T hücrelerinin nükleer faktörü - aktive edilmiş T hücrelerinin nükleer faktörü) sitoplazmik bileşenini fosforile eden kalsinörin fosfatazı aktive eder (Şekil 3.96). Bu, faktörün çekirdeğe göç etmesine, nükleer bileşenle etkileşime girmesine ve T hücre aktivasyonunda yer alan genlerin promotör bölgelerinde (IL2, IL2R, vb.).
Diasilgliserol geleneksel olarak protein kinaz C'yi (PKC) - serin / tre- aktive eden bir faktör olarak kabul edilmiştir.

Pirinç. 3.96. Ca2+-bağımlı T-hücresi aktivasyon bağlantısı ve bunun siklosporin A tarafından bloke edilmesi. İnositol trifosfata bağımlı sinyal yolu, transkripsiyon faktörü NF-AT'nin çekirdeğe mobilizasyonuna yol açar. Bu yol, siklofilin ile kombinasyon halinde, sitoplazmik faktör NF-AT'nin fosforilasyonundan sorumlu olan kalsinörin fosfatazı inaktive edebilen siklosporin A tarafından bloke edilebilir (bu, çekirdeğe göçü için bir koşul olarak hizmet eder)

T hücrelerinin aktivasyonunda anahtar faktörlerden biri olarak kabul edilen onine kinaz. Ancak, diaçilgliserol tarafından aktive edilen PKC izoformlarının T hücrelerinin aktivasyonu ile ilgili olmadığı ortaya çıktı. “Olgunluğunun” zirvesinde immün sinapsta görünen izoform 0 PKC'yi içerir. İmmün sinaps içine alınması, P13K ve Vav'nin aktivitesine bağlıdır (ikinci faktör, PKC0 taşınmasındaki rolü çok önemli olan hücre iskeleti ile ilişkilidir). Vav aktivasyonu sadece TCR üzerinden değil, aynı zamanda CD28 üzerinden de sinyal vermeye bağlı olduğundan ve CD28'e bağlı yol, PI3K'nın katılımıyla gerçekleştirildiğinden (CD28 ile ilişkilidir - aşağıya bakınız), PI3K ve Vav'ın farklı temsil ettiği açık hale gelir. Aynı sinyal yolunun aşamaları ve Bu nedenle, PKC0 molekülünün aktivasyonuna katılım, CD28 yoluyla birlikte uyarılmaya bağlıdır. Aynı zamanda, PKC0 Lck kinaz tarafından fosforile edildiğinden (ve dolayısıyla aktive edildiğinden) PKC0 aktivasyonunda TCR'den gelen sinyallerin rolü şüphesizdir. Diasilgliserol dahil olmak üzere diğer faktörlerin PKC0 aktivasyonuna katılmasına izin verilir, ancak bu etkiler ikincildir. Aktive hücrelerin apoptozunu önlemek ve IL2 ve IL2R genlerinin, AP-1 ve NF-kB'nin ekspresyonu için gerekli olan üç kritik transkripsiyon faktöründen ikisini açmak için PKC0'ın aktivasyonu gereklidir. AP-1'in PKC0'a bağlı aktivasyonu, MAP kademesinin Rac/JNK dalı aracılığıyla gerçekleştirilir (aşağıda tartışılacaktır). Transkripsiyon faktörü NF-kB'nin aktivasyonuna yol açan yol aşağıdakileri içerir:

ara bağlantılar sıralı olarak etkinleştirilir (PKC0'ın katılımıyla) faktörleri CARMA-1, Bcl-10 ve MALT-1, IKK. IKK, NF-kB - IkK'nin inhibitör alt birimini fosforile ederek, ona sonraki bozunmasını önceden belirleyen ubikuitini bağlama yeteneği verir. Bu, çekirdeğe göç eden ve T hücresi aktivasyon genlerinin ekspresyonu için gerekli olan üçten biri olan bir transkripsiyon faktörü olarak görev yapan aktif NF-kB alt birimini serbest bırakır. Doğuştan gelen bağışıklık hücrelerinin aktivasyonunda anahtar rol oynayan transkripsiyon faktörü NF-kB yukarıda tartışılmıştır (bkz. Bölüm 2.2.4).
T-lenfositlerin, MAP kaskadı veya MAP modülünün (Mitojenle aktive olan kinazlar - mitojenle aktive olan kinazlar) aktivasyonu tarafından tetiklenen başka bir sinyal yolu da hücre aktivasyonu sırasında yaygın olarak kullanılır. Rolü esas olarak transkripsiyon faktörü AP-1'i (c-jun/c-fos dimer) indüklemektir. Bu kademenin 3 dalı vardır ve üç tip MAP kinazın (MAP ^ - ERK1 / ERK2 (Hücre dışı sinyalle düzenlenen kinazlar - hücre dışı sinyallerle düzenlenen kinazlar), p38 ve JNK (c-Jun NH2-'den) oluşumuna yol açar. terminal kinazlar - c -Jun NH2-terminal kinazlar) MAP-kinazların aktivasyonuna yol açan kaskadlar, adaptör proteinlerin ve düşük moleküler ağırlıklı GTPazların katılımıyla açılır.Adaptör proteinlerden biri olan Grb2 (Büyüme faktörü reseptörüne bağlı protein 2) ), LAT faktörü ile etkileşim üzerine aktive olur.Aktif Grb2, LAT ile aktive olan başka bir proteine, SLP-76'ya kendiliğinden bağlanır ve Sos (Son of Sevenless'tan) Sos, bir guanin nükleotid değiştirme faktörüdür: GDP'nin GTP ile değiştirilmesine neden olur. küçük G proteinlerinde (yani, guanin nükleotid bağlayıcı proteinler) Bu nedenle, SLP-76/Grb2/Sos kompleksi, G-protein Ras'in aktivasyonuna neden olarak, ilişkili GDP'yi GTP'ye dönüştürür. Ras-GTP, serin / treonin kinazı aktive eder Raf ( MAP kinaz kinaz kinaz - MKKK) Bir dizi reaksiyon aşağıdaki gibidir: R af, MEK'i (MAP kinaz kinaz - MCK) aktive eder ve MEK, yukarıda bahsedilen MAP kinazları ERK1 ve ERO'yu aktive eder. MAP kademesinin JNK dalının aktivasyonu, yukarıda bahsedilen Vav faktörü tarafından başlatılır (LAT'a bağlı olarak ve hücre iskeletinin aktivasyonu ve ayrıca PKC0 ile ilişkilidir, yukarıya bakınız). G-protein Rac (Rho ailesi) ile kompleks halinde GDP'nin GTP'ye dönüştürülmesine neden olur. Rac-GTP, MEKK kinazını (MKKK olarak hareket ederek) aktive eder, JNKK kinazını (MKK) aktive eder, bu da JNK MAP kinazını aktive eder. MAP modülünün p38 MAP kinaz oluşumuna yol açan üçüncü yolu da Rho ailesinin G proteinlerine bağlıdır. Genel hatlarıyla diğer iki yola benzer, ancak daha az ayrıntılı olarak incelenmiştir.
MAP kinazları ERK1/ERK2, JNK ve p38, TXY motifindeki treonin ve tirozin kalıntılarının fosforilasyonu ile aktive edilir ve farklı kalıntılar (sırasıyla Glu, Pro ve Gly) üç tip kinazda X rolünü oynar. Bu MAP kinazlar, birçok olayda yer alan transkripsiyon faktörlerinin oluşumunu belirler. hücresel süreçler. ERK1/ERK2, transkripsiyon faktörleri АР-1 ve Elk-1, JNK - faktörleri ATF2, Elk-1 ve c-Jun (komponent АР-1), p38 - faktörleri ATF2, Elk-1 ve MEF-2C'nin oluşumuna neden olur.
T hücresi aktivasyonu sırasında yukarıdaki sinyal yollarının aktivasyonu, CD28 molekülü boyunca paralel TCR bağlanması ve birlikte uyarılması ile gerçekleşir. Bu zar molekülleri aracılığıyla devreye giren sinyal yollarının farklılaşması ve bu yolların etkileşiminin deşifre edilmesi tam olarak tamamlanmamıştır. Bununla birlikte, genel tablo, birlikte uyarılmanın moleküler temeline ilişkin genel bir anlayış sağlamaya yetecek kadar net bir şekilde ortaya çıkmaktadır. TCR bağlanması ko-reseptör bağlanması ile koordine edildiğinde, TCR-CD3 kompleksinin yapısı değişir, CD4, CD45 fosfatazın yanı sıra Fyn ve Lck reseptör tirozin kinazlarının aktivasyonuna neden olur. "Yakın" olayların nihai sonucu, reseptör kompleksinin Z-zincirinin fosforilasyonu ve bir aktivasyon sinyalinin ZAP-70 kinaza iletilmesidir. Ayrıca, adaptör proteinler LAT, SLP-76 ve Vav'nin katılımıyla, sinyal iletiminde yer alan bölge, zara bağlı kinazlar, hücre iskeleti ve küçük G proteinleri dahil olmak üzere önemli ölçüde genişler. Ca2+ mobilizasyonuna ve transkripsiyon faktörü NF-AT'nin aktivasyonuna (PLCil aktivasyonu, inositol trifosfat oluşumu ve kalsinörin aktivasyonu yoluyla) giden sinyal yolu, birlikte uyarılma sırasında üretilen sinyallerin doğrudan katılımı olmadan gerçekleştiriliyor gibi görünmektedir. Diğer yollar aşağı yukarı birlikte uyarıcı sinyale bağlıdır.
CD28 aracılığıyla birlikte uyarmanın en doğrudan sonucu, fiziksel olarak CD28 molekülü ile bağlantılı olan membran enzimi PI3K'nın aktivasyonudur. Bu enzim, bir inositol trifosfat kaynağı olarak hizmet eden fosfatidilinositol 4,5-bifosfat oluşumunu katalize eder. Ancak bu olay doğrudan aktivasyonla ilgili değildir ve hazırlık niteliğinde sayılabilir. Hücre aktivasyonu üzerine, fosfatidilinositol trifosfat, hücre iskeletinin aktivasyonuna dahil olmaktan sorumlu olan ve PKC0 protein kinazın işe alınması ve aktivasyonunda yer alan bir düğüm faktörü olan Vav'i aktive eder. Bu enzim, transkripsiyon faktörleri NF-kB ve AP-1'in oluşumuna yol açan sinyal yolunun işleyişi için önemlidir. Her iki durumda da, PKC0'ın rolü en çok MAP kademesinin Rac/JNK dalının dahil edilmesinde belirgindir. MAP kademesinin Raf/ERK ve Rac/p38 dalları, PKC0'a ve dolayısıyla birlikte uyarılmaya daha az bağımlıdır. Bu nedenle, kostimülasyonun moleküler temeli, üç anahtar faktörün - PI3K, Vav faktörü ve protein kinaz C izoformu 0'ın katılımıyla uygulanan sinyal yollarının T-yardımcı aktivasyon sürecine dahil edilmesidir. tetikleyici T-hücresi aktivasyon genleri, ikisinin (AP-1 ve NF-kB) ekspresyonu birlikte uyarılmaya bağlıdır ve NF-AT üretimi için tek başına birlikte uyarılma gerekli değildir.
Böylece sonuç olarak T hücresinde 3 transkripsiyon faktörü oluşur - NF-AT, NF-kB AP-1. Bu faktörler farklı şekillerde oluşur. Aktif NF-AT, NF-AT - NF-ATc ve NF-ATn'nin sitoplazmik ve nükleer alt bileşenlerini içeren bir dimerin birleşmesi sonucu oluşur. NF-ATn, T hücre çekirdeğinde her zaman mevcut olan kurucu bir faktör ise, NF-ATc'nin kalsinörin katalizli fosforilasyonu ile elde edilen çekirdeğe göç etmesi için aktive edilmesi gerekir (yukarıya bakın). Transkripsiyon faktörü NF-kB, IkB-NF-kB kompleksinden inhibitör IkB alt biriminin bölünmesiyle aktive edilir. Yukarıda bahsedildiği gibi, bu, IkB, PKC0'ın katılımıyla aktive olan IKK kinazı tarafından fosforile edildiğinde meydana gelir. Fosforillenmiş alt birim bozunma için uygun hale gelir

ubikuitin yolu boyunca. Faktör AP-1, iki indüklenebilir proto-onkogenin protein ürünlerinin bir dimeridir - c-fos ve c-jun. Bu genlerin ekspresyonu ve protein sentezi, uygun transkripsiyon faktörlerini, yani Elk-1 (c-fos için) ve JNK (c-jun için) gerektirir. Yukarıda bahsedildiği gibi, Elk-1 ve JNK, MAP kademesinin çeşitli dallarının son ürünleridir. De novo sentezlenen c-fos ve c-jun proteinleri, transkripsiyon faktörü AP-1'i oluşturan homo- ve heterodimerleri oluşturur.
Göz önünde bulundurulan üç faktör (NF-AT, NF-kB ve AP-1), başta IL2 ve IL2R olmak üzere T hücre aktivasyon genlerinin uyarılması için gereklidir. IL2 geninin promotör bölgesi, transkripsiyon faktörleri için 9 bağlanma bölgesi içerir (Şekil 3.97). Bunlar arasında, Ekim octomer için gen indüksiyon sürecini sınırlamayan 2 bağlanma yeri vardır. Üç anahtar transkripsiyon faktöründen NF-kB, diğer transkripsiyon faktörlerinden bağımsız olarak bir bölgede promotör ile etkileşime girer. Diğer iki faktör, NF-AT ve AP-1, promotör ile hem birbirinden ayrı (1 bağlanma bölgesi ile) hem de bir kompleks (3 bağlanma bölgesi) içinde etkileşime girer. Tüm bölgelerin gen indüksiyonuna yol açan uygun transkripsiyon faktörleriyle doldurulması, T hücresi aktivasyonu sırasında sinyal iletiminin nihai sonucudur.
T yardımcılarının aktivasyonunda yer alan sinyal yolları yukarıda ayrıntılı olarak tartışılmıştır. Sitotoksik T hücrelerinin aktivasyonu benzer mekanizmalarla gerçekleştirilir.
3.5.2.2. T hücre aktivasyonunun belirtileri
CD4+ T hücrelerinin (herhangi bir T lenfositin yanı sıra) aktivasyonu, aralarında IL-2 sitokini ve reseptör a zincirini kodlayan IL2 ve IL2R genlerinin en büyük rolü oynadığı çok sayıda genin ekspresyonuna yol açar. ana efektör olayların uygulanmasında rol. IL2 geninin ifadesi, uyarıcı bir sinyal alındıktan yaklaşık 1 saat sonra meydana gelir. IL-2 proteininin uyarılmış T hücreleri tarafından in vitro salgılanması 3-4 saat sonra saptanır; 8-12 saat sonra zirveye ulaşır ve 24 saat sonra durur İn vivo, IL-2 salgılanması antijen uygulamasından 1-3 gün sonra başlar

Pirinç. 3.98. T hücresi aktivasyon moleküllerinin ifadesinin zamansal dinamikleri. grafikte
T hücrelerinin uyarılmasından sonra anahtar aktivasyon moleküllerinin ekspresyonunun zamanlaması gösterilmektedir.

(bağışıklama) ve 7-12 gün devam eder. IL-2 reseptörünün a-zincirinin ekspresyonu biraz daha sonra gerçekleşir ve daha uzun sürer - in vitro stimülasyondan 4 saat sonra tespit edilir; 2-3 gün sonra maksimuma ulaşır ve 5 gün sonra durur (Şekil 3.98).
IL2 geni ile eşzamanlı olarak, uyarıcının etkisinden sonra mümkün olan en kısa sürede (fizyolojik koşullar altında, peptid-MHC antijenik kompleksi), erken aktivasyon genleri olarak adlandırılan c-Myc ve N-Myc genleri eksprese edilir. Mitoz için hücrelerin hazırlanmasında rol oynarlar. 2-3 saat sonra, hücre içi depolardan kısmen mobilize edilmiş ve kısmen de novo eksprese edilmiş en erken aktivasyon antijeni olan T hücresinin yüzeyinde CD69 belirir. İfadesi bir günden biraz fazla sürer. CD69'dan kısa bir süre sonra, hücre yüzeyinde IL-2 reseptörünün daha önce bahsedilen a-zincirini temsil eden başka bir erken aktivasyon markörü olan CD25 belirir. Biraz önce, bir dizi sitokin geninin ekspresyonu ve karşılık gelen sitokinlerin (IFNy, IL-4, IL-5, IL-6) sınırlı miktarlarda sentezi saptanır.
Aşağıdaki aktivasyon belirtileri, stimülatörün etkisinden bir gün sonra, transferrin için reseptör molekülü (CD71) eksprese edildiğinde gözlenir. Bu faktör çoğalmada önemli bir rol oynar, çünkü uygulanması için demir iyonları gereklidir. Takip eden günlerde (3-6 gün), T hücre aktivasyonunun geç belirteçleri olarak sınıflandırılan MHC-II molekülleri ve daha sonra çok geç aktivasyon antijenleri olarak adlandırılan p1-integrinler - VLA (Çok geç aktivasyon antijenleri) eksprese edilir. ) ve kemokinler salgılanır. Hücre aktivasyonunun bu geç belirtileri, proliferatif süreçle birleştirilir.

T hücre reseptörü. T-hücreleri, iki tip membran glikoproteini kullanarak antijeni tanır - T-hücresi reseptörleri ve CD3. T hücresi reseptörü, 40-50 kD moleküler ağırlığa sahip a- ve p zincirleri (tüm T hücrelerinin yaklaşık %98'i) veya 5 zincir (hücrelerin yaklaşık %1.5-2'si) içeren bir heterodimerdir. T hücresi reseptörü, tanıma reaksiyonlarında yer alan Ig benzeri hücre yüzeyi moleküllerinin bir üst ailesinin parçasıdır. T hücre reseptöründen transmembran iletim mekanizmaları bilinmemektedir; muhtemelen bunlar, T-lenfosit reseptörleri ile kovalent olmayan bir şekilde ilişkili olan CD3'ten kaynaklanmaktadır.

T hücre aktivasyonu

T hücrelerini etkinleştirmek için makrofajlardan iki sinyale ihtiyaç vardır. İlk sinyal Ag'nin sunumu, ikincisi ise aktive edici bir faktörün (IL-1) salgılanmasıdır. İkincisi, bu hücreleri aktive eden (otokrin regülasyonu) T-lenfositler tarafından IL-2 sentezini uyarır. Aynı zamanda, T hücrelerinin zarlarında IL-2 (CD25) reseptörlerinin ifadesi artar.

T-lenfositlerin alt popülasyonları

Yüzey işaretçilerine göre, birkaç T-lenfositlerin alt popülasyonlarıçeşitli işlevleri yerine getirmek. İçin T hücre farklılaşması yüzey işaretleyici CD-Ag'yi tespit eden bir dizi monoklonal antikor kullanın [İngilizce'den. farklılaşma kümesi]. tüm olgun T hücreleri ekspres yüzey CD3-Ag; buna ek olarak, T-lenfositlerin alt popülasyonları da diğer CD-Ag'yi eksprese eder.

CD4 + lenfositler

Zar molekülleri CD4şartlı olarak düzenleyici (yardımcılar) ve efektör (T hzt) olarak bölünmüş farklı hücre popülasyonları taşır.

T yardımcıları[İngilizceden. yardımcı olmak için] spesifik olarak Ag'yi tanır ve hümoral immün yanıtın indüklenmesi sırasında makrofajlar ve B hücreleri ile etkileşime girer. CD4+/CD8+-hücrelerinin oranı, bağışıklık durumunu değerlendirmek için önemli bir parametredir; normal koşullar altında, CD4+/CD8+ oranı yaklaşık olarak ikiye eşittir ve uyarıcı faktörlerin bağışıklık tepkisi üzerindeki baskın etkiyi yansıtır. Bazı immün yetmezlik durumlarında, oran tersine çevrilir (I'den az, yani CD8 + hücreleri baskındır), bu da immünosupresif etkilerin baskın bir etkisini gösterir; birçok immün yetmezliğin patogenezinin temelini oluşturur (örneğin, AIDS).

Ag-tanıyan T-lenfositler Hedef hücrenin plazma membranı üzerindeki MHC molekülü ile kompleks halindeki viral veya tümör Ag'nin yabancı bir epitopunu "tanıyın". T HRT [gecikmiş tip aşırı duyarlılık reaksiyonlarının (DTH) T efektörleri] DTH reaksiyonlarına aracılık eder.