Examenul citologic și semnificația sa în oncologie. Analiza citologică: de ce și cum se efectuează Metoda citologică este utilizată pentru a determina

Ocupă locul trei la numărul de boli jumătate feminină umanității, sarcina principală este detectarea precoce a patologiei și chiar mai bine - condițiile prealabile pentru boală. Examenul citologic este metoda care este capabilă să facă față unei astfel de sarcini.

Ce este un studiu citologic

Studiul, care ține cont de starea celulelor, se numește citologic. Această procedură are multe avantaje față de alte metode datorită conținutului de informații al rezultatelor și absenței traumatismelor la țesuturi și organe la preluarea materialului pentru analiză.

Diferența dintre examinarea histologică și cea citologică este descrisă în acest videoclip:

Cui i se atribuie

• Studiul este inclus în examinarea preventivă a jumătății feminine, începând de la 18 ani.
• Poate exista și programarea la medic în legătură cu necesitatea diagnosticului în cazul suspiciunii de patologie.

Examinarea fetelor minore are loc cu acordul părinților.

De ce ai nevoie de un examen citologic de urină, sânge, spută etc. la femei si barbati.

De ce să treci prin asta

Un examen citologic poate determina prezența celulelor canceroase într-un moment în care organismul nu prezintă niciun simptom care să indice un proces patologic incipient. Și după cum știți, în stadiile incipiente sunt complet vindecabile.

În plus, procedura oferă informații:

• despre un posibil proces inflamator în uter,
• despre prezența unei infecții
• despre modificările hormonale.

Citiți mai jos despre metodele de cercetare în diagnosticul citologic.

Tipuri de proceduri

Metoda de examinare citologică prevede un studiu de laborator al materialului luat sub formă de frotiu de pe suprafețele organelor din regiunea uterului.

Studiul celulelor poate avea loc folosind următoarele metode:

• Metoda de centrifugare implică, dacă este necesar, pentru a obține rezultatul, separarea membranei celulare de structura generală.
• Metoda microscopiei Există lumină și electronică.
• Cercetare de-a lungul vieții face posibilă observarea proceselor care au loc în celulă.
• Metoda atomului etichetat- procesele biochimice care au loc în celulă sunt monitorizate prin introducerea unui izotop radioactiv în celulă.

Citiți mai jos despre ce arată examenul citologic.

Indicații pentru deținere

Un examen citologic este prescris în astfel de circumstanțe:

• pacientul este infertil
• se suspectează eroziunea colului uterin,
• pacienta se pregătește să conceapă un copil,
• o femeie ia medicamente hormonale pentru o lungă perioadă de timp,
• scurgeri din vagin,
• există o suspiciune de infecție a organelor genitale, manifestările sunt vizibile:
  • negi,
  • veruci;
• pacienta are menstruație neregulată,
• examinarea are loc în ajunul instalării spiralei.

Cum are loc examinarea citologică a colului uterin, videoclipul de mai jos va arăta:

Contraindicații pentru ținere

Studiul poate arăta informații inexacte dacă este efectuat:

• în cursul procesului inflamator în uter, un număr crescut de leucocite poate afecta acuratețea determinării prezenței celulelor atipice;
• nici sângerarea menstruală nu este un moment favorabil pentru analiză.

Este sigur să luați material pentru examinarea citologică, citiți mai jos.

Siguranța metodei

Se examinează materialul biologic prelevat prin metode care nu lezează organele și nu le încalcă integritatea. Prin urmare, procedura este complet sigură.

Pregătirea pentru analiză

Pentru ca manipularea să aibă succes, iar materialul luat să fie potrivit pentru cercetare, trebuie îndeplinite anumite condiții:

• Special, nu este necesară nicio pregătire specială.
• Înainte de a lua un frotiu, este necesar ca o femeie să evite contactul sexual timp de cel puțin 24 de ore.
• Dacă pacientul este tratat pentru o infecție acută, atunci va fi corect să luați materialul pentru cercetare la 60 de zile după terminarea tratamentului.
• Dacă există vreo îndoială cu privire la rezultatul obținut, se recomandă repetarea repetată a studiului materialului biologic.
• Este important ca primirea biomaterialului să fie corect corelată în timp cu ciclu menstrual pacientii de sex feminin. Nu trebuie luat mai tarziu de cinci zile inainte de inceperea preconizata a ciclului, iar in timpul menstruatiei se recomanda efectuarea unei analize incepand din a cincea zi a ciclului. Această regulă trebuie respectată dacă scopul studiului este de a determina stări precanceroase sau de a diagnostica cancerul.
• Când se efectuează un test pentru a determina efectul tratamentului hormonal, se recomandă să luați materialul la două săptămâni după sfârșitul cursului.
• Dacă pacienta este examinată pentru a înțelege cauza problemelor cu ciclul menstrual, atunci un frotiu pentru analiză este prescris la fiecare trei zile.
• În cazul clarificării problemei proceselor inflamatorii în zona uterului, un frotiu poate fi efectuat în orice zi, cu excepția perioadei ciclului menstrual.
• Pentru a obține rezultate nedistorsionate ale studiului, este necesar să nu efectuați nicio procedură cu trei zile înainte de acesta:
  • dus de dus,
  • utilizarea lumânărilor, cremelor;
  • participarea la alte studii ale zonei uterine, de exemplu, diagnosticul cu ultrasunete;
  • beți mai puține lichide, astfel încât să urinați cu aproximativ trei ore înainte de a face un frotiu.

Caracteristici ale

• Procedura este nedureroasă deoarece nu există implantare în țesutul uterin. Sentimentele în timpul prelevării materialului sunt oarecum neplăcute, dar acesta este un moment foarte scurt de timp.
• Pacienta este amplasată pe scaunul ginecologic, specialistul preia cu o perie scurgerea pe suprafața uterului, din canalul cervical, la discreția medicului, din canalul de urinare.

Cel mai mare consecință posibilă proceduri - probleme sângeroase timp de câteva zile după luarea unui frotiu. Acesta nu este un factor periculos și apare din cauza faptului că peria a atins vasul.

Descifrarea rezultatelor și normelor unui examen citologic al unui frotiu etc. descris mai jos.

Descifrarea rezultatelor

Experții evaluează starea celulelor care căptușesc suprafața. Se știe că vaginul și colul uterin au diferite tipuri de celule de căptușeală majore:

• pe colul uterin, stratul superior este reprezentat de celule cilindrice,
• Vaginul are un epiteliu stratificat la suprafață.

La analiza datelor, sunt luați în considerare mulți factori, orice modificări ale raportului celulelor și, de asemenea, structura lor internă.

Interpretarea standard a rezultatelor poate avea concluzia unei examinări citologice sub forma uneia sau mai multor opțiuni din cinci:

• Celulele sunt neschimbate.
• Modificările constatate în timpul examenului citologic indică prezența unui proces inflamator.
• Există un indiciu de displazie (unele celule cu nuclei măriți).
• Starea precanceroasă (unele celule au abateri de la normă în starea cromozomilor și citoplasmei).
• în material biologic.

Costul mediu al procedurii

Costul procedurii depinde de politica de preț a clinicii în care a aplicat pacientul, de setul de lucrări care trebuie efectuate și de alte caracteristici. În medie, o examinare citologică va costa 780 de ruble.

Tehnica de preluare a materialului pentru examinarea citologică este prezentată în acest videoclip:

În cursul unui studiu citologic, structura celulelor este studiată pentru a detecta tumori maligne, benigne și leziuni de natură non-tumorală. Scopul principal al studiului este de a confirma sau infirma faptul de malignitate a celulelor luate pentru analiză.

Metodele de cercetare citologică se bazează pe studiul la microscop a structurii celulelor, a compoziției celulare a fluidelor și țesuturilor.

Există astfel de metode de studii citologice:

• microscopie ușoară;
• microscopie electronică;
• metoda de centrifugare. Se utilizează atunci când este necesară separarea membranelor celulare de structura generală;
• metoda atomului etichetat. Ele sunt folosite pentru studiul proceselor biochimice din celule: pentru aceasta, se introduce în ele un izotop radioactiv marcat;
• studiu pe viață. Această metodă de cercetare face posibilă studierea proceselor dinamice care au loc în celulă.

Concluzia studiului citologic se bazează pe caracteristicile modificărilor citoplasmei, nucleului celular, raportul nuclear-citoplasmatic, formarea de complexe și structuri celulare.

O analiză citologică este utilizată în timpul unei examinări preventive, pentru a clarifica diagnosticul, în timpul intervenției chirurgicale, pentru detectarea în timp util a recăderilor și controlul asupra cursului tratamentului.

Examenul citologic al frotiurilor

Ca materiale pentru analiză se utilizează:

• lichide: urină, secreție de prostată, spută, tampoane pentru endoscopie diverse organe, scurgeri din mameloane, amprente și zgârieturi de pe suprafețele ulcerative și erodate, răni și fistule, lichid din cavitățile seroase și articulare;
• punctate: materiale biologice obținute în timpul puncției diagnostice efectuate cu un ac subțire;
• frotiuri din cavitate și col uterin.

Cele mai multe dintre aceste studii citologice ale frotiurilor sunt efectuate dacă este necesar, pentru a stabili și a clarifica diagnosticul. Dar se recomandă examinarea citologică a unui frotiu din colul uterin (test Papanicolau): o dată pe an - pentru femeile peste 19 ani, conducând viata sexuala; de două ori pe an - femeile care iau contraceptive hormonale au avut herpes genital; mai mult de două ori pe an - femei care suferă de infertilitate, sângerare uterină, obezi, care își schimbă adesea partenerii sexuali, iau estrogeni, care au negi pe organele genitale, a fost detectat herpesul genital.

Examenul citologic al colului uterin

Pentru o examinare citologică a colului uterin, se prelevează un frotiu din părțile exterioare și interioare ale colului uterin și din bolțile vaginului folosind o spatulă specială din lemn. Apoi se transferă pe sticlă și se fixează.

O examinare citologică a colului uterin este efectuată pentru a detecta modificări ale celulelor canceroase și, în concluzie, medicul indică una dintre cele cinci etape ale stării celulelor:

• stadiul 1. Nu se găsesc celule cu abateri;
• stadiul 2. Există modificări minore în structura celulelor cauzate de inflamarea organelor genitale interne. Această stare a celulelor nu provoacă teamă, dar femeii i se recomandă să se supună examinării și tratamentului suplimentar;
• stadiul 3. S-au găsit un număr mic de celule cu abateri structurale. În acest caz, se recomandă efectuarea unui frotiu din nou sau efectuarea unui examen histologic al țesutului alterat;
• stadiul 4. Se găsesc celule individuale cu modificări maligne. Diagnosticul final nu se pune, se prescrie o examinare suplimentară;
• stadiul 5. Un număr mare de celule canceroase au fost găsite în frotiu.

Fiabilitatea unui astfel de studiu citologic este mare, dar poate oferi doar informații despre zona din care au fost prelevate celulele pentru analiză. Pentru a evalua starea trompelor uterine, a ovarelor, a uterului, ar trebui să fii supus unei examinări cuprinzătoare.

Citologia clinică este o metodă recunoscută cu drepturi depline de analiză morfologică bazată pe studiul și evaluarea materialului celular obținut în diferite moduri dintr-un focus patologic.

În lucrările practice și de cercetare, simplitatea, viteza și repetarea ușoară sunt atractive. Acesta din urmă permite utilizarea analizei citologice pentru a studia dinamica modificărilor morfologice în cursul bolii și a procesului de tratament. În plus, examenul citologic nu necesită costuri mari de material, reactivii și echipamentele sunt ieftine. Toate cele de mai sus permit ca metoda să fie utilizată pe scară largă atât pentru verificarea morfologică în cadrul policlinicii, cât și pentru și pentru efectuarea de examinări preventive în masă, selectarea grupurilor de risc cu monitorizarea sistematică ulterioară a persoanelor cu risc.

În țara noastră, citologia clinică este o secțiune a diagnosticului de laborator, iar acest lucru se explică prin faptul că, în mod tradițional, studiul compoziției celulare este inclus în complexul clinic teste de laborator- sange, maduva osoasa, exsudate, scurgeri diverse corpuri.

Cu toate acestea, spre deosebire de metodele clasice de laborator, care sunt de obicei cantitative, citologia clinică este descriptivă. Aceasta din urmă apropie citologia de o altă metodă morfologică – histologia.

În acest sens, trebuie remarcat faptul că în Statele Unite în trecut Timp de 50 de ani, citologia clinică a devenit o ramură a diagnosticului anatomopatologic și a intrat în uz în 96% din laboratoarele de anatomopatologie.

Se știe că tabloul citologic reflectă structura histologică și în multe privințe criteriile histologice sunt potrivite pentru evaluarea preparatelor citologice. Trebuie amintit că atunci când se descriu rezultatele unui studiu citologic, se folosesc termeni diagnostici mai degrabă decât cantitativi.

Astfel, metodologic, examenul citologic diferă semnificativ de toate celelalte metode de laborator.

Un stimulent puternic pentru dezvoltarea citologiei clinice a fost dezvoltarea și îmbunătățirea instalațiilor, instrumentelor și instrumentelor pentru examinarea diagnostică.

Necesitatea verificării morfologice a contribuit la o creștere rapidă și semnificativă a numărului de biopsii, inclusiv, și în mod predominant, biopsii prin puncție.

Și dacă citologia clinică timpurie a fost preponderent citologie exfoliativă: un studiu lichide- exsudate, apa de spalare; secretii- sputa, urina; frotiuri de la colul uterin, de la suprafata tumorii, apoi predomina in prezent citologia punctiei. Practic, materialul pentru cercetare se obține prin puncție formațiuni tumorale ac fin, puncții sub controlul ultrasunetelor, raze X, tomografie computerizată. O proporție semnificativă a studiilor în citologia clinică modernă sunt studiile frotiurilor și pieselor obținute în timpul trepanbiopsiei, frotiuri-amprente din material chirurgical și de biopsie, mișcări de perie și răzuire în timpul studiilor endoscopice.

În ultimii ani, citologia diagnostică este ramura cu cea mai rapidă dezvoltare a patomorfologiei. Principala direcție de diagnosticare a citologiei clinice este oncocitologia. În cele din urmă, analiza citologică este efectuată în primul rând pentru a obține un răspuns la întrebarea privind prezența unui neoplasm malign. În procesul de diagnostic diferențial se determină natura procesului patologic și se stabilesc leziuni inflamatorii, reactive, proliferative sau precanceroase, precum și tumori benigne.

Alegerea metodei de preluare a materialului este determinată de natura leziunii, de localizare și de posibilitatea de a efectua studii instrumentale. Este de dorit să se utilizeze într-un complex de toate metodele disponibile de preluare a materialului. În special, în cazul leziunilor vezicii urinare, urina nativă poate fi folosită pentru examenul citologic (eficiența diagnosticului citologic este de 40-45%), spălarea cu alcool (eficiența diagnosticului citologic este de 60-65%), tampoane-amprente din tumoră. piese prelevate în timpul cistoscopiei (eficiența citologică a aproximativ 90% din diagnostice. Cu o examinare cuprinzătoare, eficiența diagnosticului citologic este de aproximativ 100%

Rolul studiilor morfologice în diagnosticul tumorilor este în continuă creștere. Doar o caracteristică morfologică detaliată a unui neoplasm poate satisface pe deplin clinicienii și poate face posibilă alegerea mai rezonabilă a unei metode de tratament (chirurgical, radiații, chimioterapie și combinațiile acestora), deoarece tumorile structură diferită, originea și gradul celulelor atipice răspund diferit la terapie.

După cum se știe, diagnosticul morfologic al bolilor este cel mai fiabil și multe metode vechi și noi de diagnosticare de laborator, care sunt de mare importanță, în special în agregat, nu pot exclude metodele morfologice de cercetare din practica clinică. În același timp, studiile morfologice din clinică capătă o semnificație deosebită dacă sunt analizate în comparație cu toate datele clinice în întregime.

Pentru a maximiza interesele clinicii, interesele unui anumit persoană bolnavă, diagnosticul morfologic trebuie să fie extrem de precis și să reflecte în mod obiectiv trăsăturile formei oncomorfologice întâlnite.

În prezent, problema eficacității diagnosticului citologic este rezolvată fără echivoc, iar valoarea acestei metode în practică este fără îndoială. Analiza citologică face posibilă evaluarea naturii și severității proliferării epiteliale, evidențiind un grup de displazii și, pe această bază, formează grupuri de „risc ridicat”. Examinarea citologică permite monitorizarea directă a naturii modificărilor celulare ale epiteliului la indivizii din grupul „risc ridicat”, ceea ce este practic imposibil folosind alte metode morfologice.

Avantaje incomparabile față de alte metode au un studiu citologic în depistarea cancerului în stadiile inițiale. Dezvoltarea tehnicilor endoscopice, metodelor de cercetare cu ultrasunete au contribuit într-o mare măsură la introducerea pe scară largă a analizei citologice în diagnosticul neoplasmelor din aproape toate țesuturile corpului, inclusiv organele interne care anterior erau inaccesibile analizei morfologice non-operatorii.

La recunoașterea așa-numitelor „cancere timpurii”, metoda citologică are adesea avantaje față de alte metode de cercetare. Dovada în acest sens este diagnosticul citologic al cazurilor de cancer de stomac, plămâni, Vezicăși alte organe în absența manifestărilor clinice, radiologice și endoscopice, chiar înainte de apariția semnelor detectate prin aceste metode.

Întreaga experiență a existenței și îmbunătățirii continue a citologiei clinice arată că examenul citologic permite nu numai să se constate prezența unui neoplasm malign cu o fiabilitate suficient de mare, ci și în majoritatea cazurilor să se determine histogeneza (originea, afilierea tisulară) și gradul. de diferențiere tumorală. Acesta din urmă este foarte important pentru clinică, deoarece se știe că sensibilitatea la diferite efecte chimice și radiațiilor este în mare măsură determinată de gradul de diferențiere a neoplasmului. În plus, nivelul de diferențiere a tumorii poate fi folosit ca un indicator de prognostic destul de semnificativ.

Astfel de nivel inalt diagnosticul permite utilizarea clasificărilor morfologice internaționale acceptate în lucrare, ceea ce este extrem de important, în plus, contribuie la dezvoltarea clasificărilor citologice adecvate. În acest sens, trebuie menționat că dezvoltarea clasificărilor citologice moderne în conformitate cu cele general acceptate este una dintre sarcinile științifice și practice urgente ale citologiei clinice.

În prezent, succesul în asigurarea sănătății populației depinde în mare măsură de efectuarea unor examinări preventive în masă și, în primul rând, de grupurile cu risc crescut de apariție a diferitelor boli, în special de neoplasme maligne.

Efectuarea unor examinări preventive în masă eficiente, după cum arată experiența noastră și experiența multor țări, este imposibilă fără utilizarea metodei citologice, care a primit recunoaștere deplină și utilizare pe scară largă în ultimii ani. La nivelul actual, examenul citologic este una dintre metodele de diagnostic eficiente în orice stadiu al progresiei tumorale și în acest sens face posibilă: arătarea naturii și severității proliferării celulare; pentru a diagnostica tumorile maligne în orice localizare în orice stadiu al procesului.

Diagnosticul precoce și în timp util al tumorilor din punct de vedere organizațional constă în două etape:

1. Screeningul în masă al populației (screeningul întregii populații sau doar al grupurilor cu risc crescut) pentru depistarea tumorilor sau a semnelor care nu permit excluderea unei tumori.

2. Clarificarea diagnosticului în grupuri relativ mici selectate în timpul screening-ului.

În ambele etape ale diagnosticului clinic, citologia joacă un rol important, iar utilizarea acestei metode se caracterizează printr-o serie de caracteristici.

În prima etapă, sunt impuse cerințe speciale examinării citologice ca test de screening și, mai presus de toate, sensibilitate ridicată (adică o frecvență mare de detectare a celulelor tumorale la pacienții cu neoplasme maligne și un număr redus de așa-numitele „fals negative”. „rezultate) într-o singură examinare a materialului.

S-a dovedit deja că examinarea citologică a frotiurilor din colul uterin este un test de screening extrem de eficient pentru cancerul de această localizare, deoarece crește detectarea tumorilor de aproximativ 10 ori, comparativ cu detectarea vizuală; în același timp, frecvența relativă a depistarii cancerului în stadiile incipiente și preclinice ale procesului crește semnificativ.

În a doua etapă a timpurii diagnosticul tumorii, alături de nevoia de sensibilitate ridicată, se impune metodei citologice și cerința de specificitate ridicată. Pentru examenul citologic din prima etapă, specificitatea ridicată este mai puțin importantă, deoarece rezultatele screening-ului sunt întotdeauna verificate în a doua etapă a diagnosticului.

Studii efectuate prin metoda citologică

1. Examen citologic al materialului de puncție.

Examinarea citologică a puncțiilor obținute cu un ac fin (biopsie cu ac fin) din tumori, formațiuni tumorale de sigilii de orice localizare: cap, gât, sân, glanda tiroida, ganglioni limfatici, oase, țesuturi moi ale extremităților, piele, plămâni, mediastin, organe abdominale și spațiu retroperitoneal,

2. Examenul citologic al materialului exfoliativ.

Examinarea citologică a secretelor, excrețiilor, scurgerilor și răzuirilor de pe suprafața eroziunilor, ulcerelor, rănilor, fistulelor, sputei, spălărilor, exsudatelor, transudatelor.

3. Examenul citologic al materialului endoscopic.

Studiul materialului obținut în timpul bronhoscopiei, cateterismului bronșic, esofago-, gastro-, duodeno-, laborator-, rectoromano-, colono-, cistoscopie și alte tipuri de examen endoscopic în orice localizare a procesului patologic.

4. Examenul citologic al biopsiei și al materialului chirurgical

Examinarea citologică a frotiurilor - amprente, răzuire din bucăți de biopsie și material chirurgical.

Studiul citochimic al materialului - inclusiv glicogen, lipide, ADN, ARN, enzime etc.

Determinarea cromatinei sexuale în celulele tumorale.

Examinarea citologică a materialului obţinut în cadrul examinărilor preventive ale populaţiei.

Studii ale epiteliului vaginal și urocitogramelor pentru a determina saturația cu estrogeni a organismului cu calculul formulei de maturare, CPI, EI etc.

Organizarea muncii laboratorului citologic (CL)

Responsabilitățile funcționale ale personalului CL.

Şeful CL

Organizează și asigură activitatea departamentului, întocmește un plan de lucru pentru departament cu repartizarea responsabilităților între angajați.

Organizează și controlează livrarea materialului citologic și a rezultatelor testelor către laborator din instituțiile medicale anexate (medicul șef al instituției care trimite materialul este responsabil pentru livrarea materialului citologic), dacă există livrare centralizată - medicul șef al instituției care trimite materialul. instituția de bază.

Organizează și controlează vizitele personalului medical la instituțiile medicale anexate pentru examinări citologice urgente, puncție, consultații de cazuri complexe, conferințe clinice și de biopsie, precum și examinarea laboratoarelor citologice.

Selectează cazuri pentru a fi analizate la conferințe clinice și de biopsie, împreună cu adjunctul. medic-șef de activitate medicală, întocmește ordinea de zi, participă la organizarea conferințelor clinice și de biopsie (consiliază vorbitori, realizează un studiu preliminar al preparatelor citologice, lamelor etc.).

Efectuează o analiză anuală a activității CL și o prezintă conducerii unității medicale.

Supraveghează munca de compilare a unei colecții de micropreparate pentru completarea constantă, creând o bibliotecă foto a muzeului.

Consiliază medicii secțiilor clinice pe probleme de citologie clinică.

Organizează pregătirea avansată a medicilor și asistenților de laborator. În acest scop, organizează și desfășoară conferințe periodice și tematice, inclusiv cele privind studiul materialului citologic; dezvoltarea de noi metode citologice și citochimice; analizează cazuri complexe de diagnostic citologic.

Asigură pregătirea activității departamentului la admiterea pentru examinarea citologică a materialului infecțios.

Raspunde de depunerea la timp a cererilor pentru materialele necesare, reactivi, unelte, echipamente, controleaza consumul si utilizarea acestora.

Raspunde de respectarea de catre angajatii departamentului a regulilor de siguranta, siguranta la incendiu, depozitarea substantelor toxice.

Citolog

efectuează un studiu citologic al materialului preventiv, diagnostic, hormonal, citogenetic; dacă este necesar, efectuează o examinare citologică urgentă, participă la munca comună cu un endoscopist, un chirurg și alți specialiști în obținerea de material, dacă este necesar, efectuează independent biopsii prin puncție;

lasă micropreparate pentru arhivare, fotografiere, demonstrație la o conferință de biopsie clinică;

instruiește asistentul de laborator despre metodele de prelucrare a materialului citologic, metodele de colorare, numărul de preparate citologice;

controlează calitatea și calendarul muncii asistenților de laborator, le oferă asistență metodologică;

în cazuri neclare, discută despre medicamente cu alți medici ai secției și se consultă cu șeful. CL;

efectuează o examinare microscopică a materialului citologic, descrie tabloul microscopic și stabilește un diagnostic citologic. La stabilirea diagnosticului de tumoră malignă, displazie epitelială severă, procese care necesită terapie hormonală și intervenție chirurgicală, radioterapie sau terapie citostatică, rezultatul studiului este semnat de șeful. CL;

raportează șeful TsL despre toate deficiențele în munca de producție;

desfășoară activități organizatorice și metodologice;

Asistent senior

organizează, asigură și controlează activitatea personalului mediu și junior de laborator;

menține programele, calculează salariile, scrie chimie. reactivi, material de pansament etc.;

pregătește soluții chimice de bază. reactivi, efectuează evidența și depozitarea substanțelor chimice. reactivi;

organizează studiul personalului mediu și junior din laborator;

ajuta capul departament în întocmirea rapoartelor și aplicațiilor pentru chimie. reactivi si echipamente;

monitorizează starea sanitară și epidemiologică a laboratorului.

Asistent de laborator (paramedic-asistent de laborator)

efectuează studii microscopice ale materialului profilactic și hormonal;

întocmește documentația pentru înregistrarea materialului citologic;

procesează materialul citologic folosind tehnici suplimentare;

efectuează producția urgentă de preparate citologice;

întocmește eliberarea micropreparatelor din arhivă;

are grijă de instrumente și echipamente;

pregătește chimic. reactivi;

participă la lucrări organizatorice și metodologice pentru îmbunătățirea calității materialului;

rapoarte lunare despre munca depusa.

Livrare, inregistrare si etichetare materiale

Materialul pentru examinarea citologică trebuie să fie livrat la laborator cât mai curând posibil după primire. (urină fluidă, conținut de chisturi, exsudate de apă, spută). Tampoanele uscate la aer pot fi depozitate.

Flacoanele cu materialul și ochelarii tampon trebuie să fie etichetate (este indicat numele pacientului).

În direcția care însoțește materialul ar trebui să fie:

prenumele, numele și patronimul, sexul și vârsta pacientului;

cum și de unde a fost obținut materialul;

sub ce formă este trimis (lichid, pete de sticlă), cantitate;

un scurt istoric cu indicarea obligatorie a prezenței și naturii efectelor nocive, tratament anterior (în special hormonal, radiații, chimioterapie);

date din alte metode de cercetare (radiografie, endoscopie etc.), dacă se suspectează o boală sistemică (hemoblastoză) - un test de sânge;

descrierea statutului local;

diagnostic clinic.

Metode de obținere și natura materialului pentru examen citologic

Materialul pentru examinarea citologică poate fi obținut în diferite moduri. In primul rand este:

A) Citologie exfoliativă unde se analizează următoarele:

secreția diferitelor organe (glanda mamară, bronhii etc.). Pentru a pregăti preparatul, se aplică o picătură de descărcare pe sticlă și se prepară un frotiu. De asemenea, puteți face amprente de la locul de extracție (mamelon glanda mamara, evacuarea fistulei). Secreția bronșică este de obicei colectată sub formă de spută într-un vas, pregătirea preparatelor este descrisă în detaliu în secțiunea privind studiile respiratorii,

fluidele si continutul chisturilor se obtin prin puncția cavităților (abdominale, pleurale etc.) și a chisturilor. Dacă nu există suficient material, atunci acesta este aplicat pe sticlă și distribuit sub formă de frotiu subțire. Cantități semnificative de lichid sunt pre-centrifugate și apoi frotiuri sunt preparate din sediment. Materialul de apă de spălare este procesat în același mod,

amprentele de pe mucoase și piele, dacă sunt disponibile, pot fi făcute direct pe sticlă. În alte cazuri, frotiurile se prepară din răzuire cu spatulă, din tampoane.

Pentru studiul materialului exfoliativ în ginecologie, există metode dovedite, a căror descriere este în secțiunea corespunzătoare.

b) Citologia puncției- unul dintre cele mai frecvente tipuri de cercetare în citologie clinică.

Formațiunile tumorale sunt perforate, de regulă, cu un ac subțire. Biopsia prin aspirație necesită o anumită abilitate. În plus, pentru a obține un material cu drepturi depline, trebuie îndeplinite o serie de condiții. În special, acul de puncție și seringa trebuie să fie uscate. Anestezia preliminară (introducerea novocainei) nu trebuie efectuată. Pentru puncția formațiunilor bogat vascularizate (glanda tiroidă, tumori vasculare, os etc.), este necesar să se folosească un ac cu o mandrină, aceasta din urmă este îndepărtată după ce acul este introdus în locul din care ar trebui să fie materialul. să fie obținut. În același mod, urmând regulile descrise mai sus și folosind dispozitive speciale, puncțiile se efectuează sub controlul radiografiei, ecografiei sau tomografiei computerizate.

c) Utilizare pentru examen citologic lovituri-amprente din biopsie și material chirurgical crește semnificativ eficiența diagnosticului citologic. În plus, o concluzie morfologică poate fi obținută mult mai devreme decât o concluzie histologică.De remarcat valoarea excepțională a unor astfel de studii paralele (citologice și histologice) în posibilitatea unor comparații citohistologice, care la rândul lor îmbogățește semnificativ atât una cât și cealaltă metodă. Pentru a pregăti medicamentul, este necesar să se răspândească răzuirea din biopsie sau material chirurgical cu un frotiu subțire pe sticlă. Amprentele de la o tăietură de biopsie sau o bucată de țesut îndepărtată chirurgical sunt aplicate prin atingerea suprafeței tăiate de sticlă. Dacă amprentele sunt realizate dintr-un țesut bogat în sânge (ficat, splină etc.), este necesar să îndepărtați sângele de pe suprafața tăiată pe hârtie de filtru și abia apoi să faceți amprente pe sticlă.

d) Cu dezvoltarea tehnica endoscopica examenul citologic obligatoriu a devenit mai accesibil. Dispozitivele endoscopice moderne au dispozitive speciale pentru preluarea materialului pentru examinarea morfologică. Când se poate obține în special endoscopia;

mișcări de perie,

apa de spalat,

tampoane,

frotiuri - amprente de biopsii smulse.

Alegerea metodei de preluare a materialului este determinată de natura leziunii, de localizare și de posibilitatea de a efectua studii instrumentale. Este de dorit să se utilizeze într-un complex de toate metodele disponibile de preluare a materialului. În special, în cazul leziunilor vezicii urinare, urina nativă poate fi utilizată pentru examinarea citologică (eficiența diagnosticului citologic este de 40-50%), spălarea cu alcool (eficiența diagnosticului citologic este de 60-65%), frotiurile-amprente din tumoră. piese prelevate în timpul cistoscopiei (eficiența citologică a aproximativ 90% din diagnostice. Cu o examinare cuprinzătoare, eficiența diagnosticului citologic este de aproximativ 100%

Examenul citologic este o componentă obligatorie a diferitelor metode de examinare clinică și este necesar să se preleze frotiuri din colul uterin și din canalul cervical în timpul unui examen ginecologic, dacă se suspectează o patologie a corpului uterin, se aspiră frotiuri.

Endoscopie:

a) bronhoscopie - frotiuri cu pensula, punctate transbronșice, frotiuri din materialul biopsiilor smulse, spălări,

b) gastroscopie - mișcări de pensulă, amprente din biopsii smulse,

c) colonoscopie, rectoscopie - frotiuri de pe un tampon de vată, mișcări de perie, amprente din biopsii,

d) cistoscopie - urină nativă, spălare cu alcool, amprente, din bucăți de biopsie.

e) laringoscopia - frotiuri din zonele afectate și amprente din bucăți,

f) piele și mucoase - frotiuri de răzuire din zonele afectate, cu o tumoare - puncție cu un ac subțire.

Țesuturi moi, glanda mamară, ganglioni limfatici, glanda tiroidă - puncție cu un ac subțire.

Puncție ghidată cu ultrasunete (glanda tiroidă, tumori ale gâtului, ficat, splină, rinichi, uter, ovare, prostata, tumori retroperitoneale).

Examenul citologic trebuie neapărat supus la punctate ale cavităților seroase, chisturi, secreții din răzuirea glandei mamare etc.

Lamele pentru preparate trebuie să fie curate, fără grăsimi și uscate.

Prepararea sticlei

1. Ochelarii se spală bine cu o perie în apă caldă cu săpun (sau cu detergent) apă.

2. Clătiți bine cu apă caldă curentă.

3. Se fierbe apoi 1-2 ore în apă cu adaos de sifon (2-3%) sau detergent.

4. După clătire bine într-un mediu curat apa fierbinte si se spala in apa curenta (1-2 ore).

Metoda citologică se bazează pe examinarea și evaluarea microscopică a materialului celular obținut în diverse moduri dintr-un focar patologic.

Metoda citologică este o ramură a oncomorfologiei. În niciun caz nu trebuie să fie opus histologic.

Avantajele și avantajele metodei citologice:

1. inofensivă absolută;
2. viteza (în condițiile echipamentului locului de muncă al citologului din cadrul unității operatorie, se poate efectua un examen citologic urgent în 10 minute). Tehnica modernă Diff-Quic permite colorarea frotiurilor în 15 s, dar după examinarea microscopică de urgență, preparatele trebuie colorate conform Pappenheim, abia atunci sunt potrivite pentru depozitarea arhivistică, adică au valoare documentară;
3. simplitatea relativă și accesibilitatea metodei (examinarea citologică nu necesită costuri materiale foarte mari, reactivi, instrumente și echipamente scumpe);
4. posibilitatea utilizării mai multor studii citologice, care este deosebit de importantă atât pentru evaluarea dinamicii modificărilor morfologice în cursul bolii, cât și pentru determinarea efect terapeutic tratament continuu;
5. o cantitate mică de material adecvat pentru examinarea microscopică.

Scopul studiului luat în considerare este de a stabili diagnosticul corect, de a economisi timp, de a evita intervenție chirurgicală la efectuarea unei biopsii și neliniștea pacientului, fără a întârzia începerea tratamentului.

Examenul citologic diagnostic este similar cu examenul histologic al materialului de biopsie:

1. scop comun (recunoașterea intravitală proces patologic);
2. obiect de studiu (componenta celulară și necelulară a procesului patologic);
3. principiile culorii.

În același timp, la pregătirea unui frotiu, relațiile spațiale ale elementelor structurale ale țesutului sunt inevitabil încălcate, ceea ce limitează semnificativ capacitățile de diagnostic ale metodei citologice și face ca metoda histologică să fie mai informativă în determinarea nosologiei tumorii și absolută. în stabilirea caracterului invaziv al acesteia.

Un examen citologic este de preferat în cazurile în care o biopsie a unei bucăți de țesut și un examen histologic sunt imposibile sau extrem de nedorite (dacă se suspectează melanom), dacă este necesar să se obțină un rezultat rapid prin microscopie a materialului disponibil într-o policlinică și , în final, în masă examinări preventive populatie.

Metoda citologică face posibilă evaluarea naturii și severității proliferării epiteliale, identificarea unui grup de displazie, ceea ce face posibilă formarea mai rezonabilă a grupurilor cu un risc crescut de cancer de diferite localizări. Monitorizarea dinamică a acestei categorii de persoane și implementarea controlului morfologic al acestora este practic imposibilă folosind alte metode de cercetare (în special invazive).

Utilizarea examenului citologic oferă diagnosticul tumori maligne orice localizare și în orice etapă a procesului. Acest lucru este în mare măsură facilitat de dezvoltarea tehnologiei endoscopice, care face posibilă obținerea intenționată a materialului pentru cercetare de la organe interne anterior inaccesibile pentru analiza morfologică fără intervenție chirurgicală.

La recunoașterea cancerului în stadiile foarte incipiente, metoda citologică are uneori avantaje față de alte teste de diagnostic. Există cazuri binecunoscute de diagnostic citologic de cancere „tăcute” clinic, radiografic și endoscopic de stomac, plămân, vezică etc.

Deci, cu metode adecvate de prelevare a probelor de material, metoda citologică permite:

1. instalare caracter adevărat proces;
2. evaluează prevalența procesului malign;
3. se constată germinarea tumorii primare în organele și țesuturile învecinate;
4. indicați sursa metastazelor în prezența unui material adecvat (diferențiați metastazele osoase de tumorile osoase primare, metastazele la plămâni - de primare cancer de plamani).

Interpretarea preparatelor citologice este un proces complex.

Ca urmare a multor ani de discuții despre specificul celulelor maligne, s-a acceptat că nu există semne patognomonice inerente numai unei celule tumorale maligne, iar un morfolog, în special un citomorfolog, ar trebui să folosească în munca sa o combinație de semne. de atipie celulară, evaluând critic prezența și severitatea acestora. Fiecare dintre semne nu are o valoare independentă.

Semne frecvente de malignitate celulară:

1. aranjarea incorectă a celulelor într-un grup, așezându-le unele peste altele;
2. lipsa limitelor clare de celule;
3. combinație într-un complex sau grup de celule tinere și modificate degenerativ elemente celulare. Din cauza aprovizionării cu sânge a tumorii, apare necroză și în citogramă apar celule cu semne de distrofie. În același timp, tumora se caracterizează prin reproducerea necontrolată și foarte intensivă a elementelor tumorale. Combinația proceselor distrofic-necrotice și proliferative-hiperplazice determină apariția unor astfel de formațiuni;
4. o creștere sau scădere a dimensiunii celulelor (de exemplu, prezența formelor cu celule mici și mari de cancer pulmonar, sarcoame cu celule gigantice și celule mici);
5. modificarea formei celulelor (poikilocitoză);
6. polimorfismul celular;
7. fenomenul de anaplazie chimică - bazofilie a citoplasmei;
8. modificări ale citoplasmei: prezența incluziunilor în ea, apariția semnelor de keratinizare, vacuolizare de severitate diferită;
9. polimorfismul nucleelor;
10. creșterea dimensiunii nucleului;
11. încălcarea raportului nuclear-citoplasmatic;
12. distribuția neuniformă a cromatinei;
13. structura grosieră a cromatinei;
14. hipercromie nucleară;
15. o combinație de nuclei hipo-, normo- și hipercromici într-un grup de celule;
16. prezența nucleelor ​​„goale”, structuri nucleare goale, nuclee „goale” polimorfe;
17. o creștere a dimensiunii și a numărului de nucleoli;
18. polimorfismul nucleolului;
19. o creștere a numărului de mitoze;
20. prezența mitozelor patologice, un număr semnificativ dintre ele.

Clinicianul și morfologul trebuie să lucreze împreună pentru a pune un diagnostic corect. Dacă citologul în fiecare caz individual trebuie să aibă date clinice, atunci clinicianul, la rândul său, trebuie să învețe limba morfologului, abordarea sa și cerințele pentru materialul care vizează studiul.

La trimiterea materialului pentru examinare citologică, clinicianul trebuie să completeze corect și minuțios formularul de însoțire, să indice vârsta, sexul, numărul cardului de ambulatoriu sau istoricul medical. Informațiile despre obiectul de studiu sunt foarte importante pentru citolog: localizarea focarului patologic (sau a mai multor focare). În cazul prelevarii de material din mai multe locuri din aceeași formațiune sau formațiuni diferite, clinicianul este obligat să marcheze frotiurile și să furnizeze informații relevante în formularul de trimitere. Concluzia citologului ar trebui să reflecte, de asemenea, marcarea frotiurilor.

Rezultatele unui studiu citologic depind în mare măsură de cât de vizat este luat materialul, care este cantitatea și siguranța acestuia. Materialul citologic este transferat pe lame de sticlă special preparate și prelucrate (curate, fără grăsimi, uscate) și distribuite într-un strat subțire. Pentru o plasare uniformă a întregului material obținut, numărul de lame nu trebuie limitat. Principalul lucru este să faceți frotiurile cât mai subțiri posibil și să slăbiți cu grijă cheagurile conținute și zonele dense cu un ac sau transfer și să le distribuiți pe mai multe lame de sticlă. Frotiurile groase și frotiurile cu un conținut ridicat de sânge sunt foarte slab fixate, ceea ce afectează negativ calitatea colorării materialului celular și limitează sever posibilitățile de interpretare microscopică a acestuia.

Dacă este necesară revizuirea preparatelor citologice în scop consultativ, clinicianul pe formularul de trimitere precizează pe scurt scopul revizuirii, datele de examinare clinică a pacientului și indică numerele tuturor studiilor citologice și histologice efectuate pe acest pacient. Pentru a evita interpretarea eronată a modificărilor celulare, citologul are nevoie de informații cuprinzătoare despre toate tipurile de tratament efectuat (chirurgical, chimio-, hormonal, kinetoterapie și medicamente) cu indicarea obligatorie a dozei și a datei de finalizare a tratamentului. În absența unor astfel de date, celulele identificate în citogramă cu modificări caracteristice patomorfozei terapeutice sau proceselor proliferative și reparatorii-regenerative pot fi considerate incorect de către citolog ca elemente tumorale.

Formularea unei concluzii citologice este un proces complex și minuțios. Înainte de a trece la studiul microscopic al preparatelor citologice ale fiecărui pacient, citologul clinic trebuie să se familiarizeze cu datele sale clinice, să-și imagineze mental structura normală a organului sau țesutului din care a fost prelevat materialul, să cunoască limitele de variabilitate ale acestui țesut sub diverse afecțiuni fiziologice, tumori benigne și maligne. Concluzia citologului se bazează pe rezultatele studiului compoziției celulare a citogramei, ținând cont de datele examenului clinic.

În citologia clinică se disting 3 secțiuni: exfoliativă, puncție, endoscopică.

Citologia exfoliativă se bazează pe „desquamarea” fiziologică a celulelor din membrana mucoasă (folium – frunză, ex – cădere). Un exemplu de citologie exfoliativă este examinare microscopica spută, urină, suc de prostată, spălări ale diferitelor organe, frotiuri din colul uterin, secreții din mamelonul glandei mamare, amprente de pe suprafețe erodate, răni, fistule; fluide din cavitățile articulare și seroase, lichidul cefalorahidian etc.

În ultimele două decenii, metoda citologiei puncției s-a răspândit, are și o istorie lungă, dar nu în aceeași măsură cu citologia exfoliativă.

Un exemplu de citologie de puncție este materialul ganglionilor limfatici, măduvei osoase, neoplasmelor osoase, tiroidei și glandelor mamare. Puncția oricărui organ necesită antrenament special si experienta. Mare importanță pentru un studiu de succes are alegerea locului de puncție, cantitatea și calitatea materialului celular obținut. În prezent, puncțiile țintite ale formațiunilor sunt adesea efectuate sub controlul ultrasunetelor, tomografiei computerizate.

Obținerea de material pentru examinarea citologică cu ajutorul puncției este traumatizantă într-o anumită măsură. În ceea ce privește biopsiile prin puncție și aspirație, până de curând au existat sugestii cu privire la posibila diseminare a tumorii în timpul acestor proceduri. În prezent este general acceptat că riscul minim existent este compensat de un beneficiu uriaș pentru pacienți datorită posibilității reale de diagnostic morfologic precis al bolii (mai ales în stadiul preoperator și în cazul unui proces malign foarte frecvent, pentru programare). metode conservatoare tratament - radiații, chimioterapice, chimioradiere).

A treia ramură a citologiei clinice, citologia endoscopică, are o istorie relativ recentă. Eficacitatea metodei citomorfologice în stabilirea naturii procesului depinde în mare măsură de capacitatea endoscopistului de a lua material pentru examinarea citologică și histologică. Este necesar să se respecte regula conform căreia endoscopistul ia prima biopsie din partea cea mai alterată a membranei mucoase. Dacă a făcut o greșeală în alegerea locului de biopsie, este posibil ca biopsiile ulterioare să nu fie efectuate cu acuratețe din cauza sângerării emergente a membranei mucoase. Periajul (citologia perie) este considerat a fi de preferat pentru cancerul esofagian și tip plat cancer de stomac precoce.

Prepararea frotiurilor-amprente din materialul endoscopic de biopsie are, de asemenea, propriile sale caracteristici. Preparatele citologice se prepară prin mai multe atingeri ușoare pe lama de sticlă a secțiunilor de țesut îndepărtate cu grijă din penseta maxilarului cu un ac și „rularea” piesei pe lama de sticlă. Este necesar să vă asigurați că acul și lamelele sunt uscate, forcepsul nu are urme de formol, deoarece pătrunderea apei și a formolului înrăutățește brusc calitatea culorii frotiului și, prin urmare, interpretarea acesteia.

Natura patologiei identificate de endoscopist determină cantitatea de material care trebuie luată pentru examinarea morfologică. Cu o imagine vizuală a unui ulcer de stomac, este suficient să pregătiți 3-5 frotiuri, iar dacă se suspectează un ulcer malign, materialul este prelevat din membrana mucoasă a tuturor marginilor ulcerului și distribuit pe 10-12 lame de sticlă. Cea mai bună culoare a frotiurilor din mucoasa gastrică este hematoxilina-eozina, pentru a identifica zonele de metaplazie intestinală - mucicarmină sau albastru alcian.

LA tablou clinic ulcerul gastric disting stadiile de exacerbare, vindecare și remisiune. În timpul exacerbării procesului ulcerativ, elementele de inflamație predomină în citogramă, iar modificările distrofice și fagocitoza sunt pronunțate în epiteliul mucoasei gastrice. În timpul perioadei de vindecare a ulcerului, schimbările în epiteliul ordinului regenerativ vin pe primul loc. Pe măsură ce procesul inflamator scade și fundul ulcerului este curățat de mase necrotice, începe regenerarea mucoasei gastrice. Din punct de vedere practic, este important să se țină cont de severitatea creșterilor regenerative ale epiteliului nediferențiat pentru a exclude posibilitatea unui diagnostic eronat de cancer în timpul examinării microscopice atât a materialului citologic, cât și histologic, în special în cazurile de dezvoltare a cancerului. displazie epitelială de gradul III. Potrivit literaturii de specialitate, atunci când se studiază gastrobiopsiile, procentul unui diagnostic fals pozitiv de cancer variază de la 1,5 la 10,0, iar la examinarea frotiurilor de amprentă, este puțin mai mic - 1,0-6,0. Studiul materialului endoscopic prin metode citologice și histologice este utilizat pe scară largă pentru diagnosticul diferențial al bolilor de stomac, detectarea proceselor hiperplazice, metaplazice și displazice, precum și pentru a determina gradul de contaminare a mucoasei gastrice cu Helicobacter pylori. Clarificarea formei de gastrită este apanajul metodei histologice, care o deosebește favorabil de toate celelalte componente ale unei examinări gastrologice cuprinzătoare a persoanelor cu simptome gastrice.

Cancerul gastric precoce este recunoscut citologic în 92-96,5% din cazuri. La pacienții cu o formă avansată de cancer gastric, conținutul informațional al metodei citologice variază foarte mult: valoarea sa maximă (95,0%) a fost notă cu cancerul exofitic, cea minimă (71,0%) - cu cancerul stenotic. În cazurile de malignitate a ulcerului cronic și a cancerului ulcerativ, studiul materialului citologic permite mult mai des identificarea naturii maligne a procesului (în 82,0% din cazuri față de 45,0, 59,0 și 68% când se utilizează raze X, endoscopice și metode histologice, respectiv).

Este foarte recomandabil să se folosească metoda citologică atunci când se examinează pacienții cu suspiciune de cancer pulmonar. În instituțiile medicale specializate, examinarea pacienților cu modificări radiologice locale trebuie să includă bronhoscopie cu prelevarea obligatorie de material pentru studii citologice și histologice, care asigură diagnosticul de cancer în 82,0-85,0% din cazuri. Mai simplă, dar mai puțin eficientă este examinarea microscopică a sputei separate spontan (sensibilitatea metodei - 20-40,0%). Metoda de obținere a sputei induse s-a dovedit mai bună, adică. colectate după o inhalare de zece minute cu o soluție de enzimă (sensibilitate la metodă - 60-80,0%). Pentru a verifica natura formațiunilor pulmonare periferice, este indicată o puncție transtoracică. Studiul frotiurilor de material de puncție face posibilă recunoașterea citologică a cancerului și determinarea formei histologice a acestuia (în 89,0% și, respectiv, 93% din cazuri).

Semnele citologice ale diferitelor forme de cancer pulmonar sunt bine studiate și prezentate în Clasificarea citologică a tumorilor (OMS, 1982). Dacă în frotiuri există material celular adecvat, medicul citolog poate identifica toate tipurile de cancer pulmonar. Dificultăți de natură obiectivă și subiectivă pot apărea cu un număr mic și o conservare slabă a celulelor tumorale, cu o structură mozaică a tumorii, diagnostic diferențial al cancerului epidermoid și adenogen slab diferențiat, recunoașterea adenocarcinomului bronhoalveolar și a unui subtip intermediar al plămânului cu celule mici. cancer.

Studiul materialului citologic obținut prin puncția neoplasmelor glandei mamare se reduce adesea la clarificarea problemei prezenței sau absenței cancerului, deși capacitățile de diagnosticare ale metodei citologice sunt mult mai largi. Analiza citogramelor permite la 80-87,0% dintre pacientele cu cancer de sân să stabilească caracterul malign al procesului, să se determine gradul de diferențiere a celulelor tumorale, în unele cazuri să se identifice forme speciale de cancer (medular, apocrin, mucos, Paget). În procesele benigne ale glandei mamare, compoziția celulară a punctului face posibilă identificarea modificărilor hiperplazice ale epiteliului, evaluarea severității acestora și, uneori, efectuarea diagnosticelor nosologice (chist, papilom, fibroadenom, tumoră în formă de frunză).

Screeningul citologic pentru cancerul de col uterin este recunoscut și utilizat pe scară largă în întreaga lume. Sarcina citologului este de a diagnostica procese inflamatorii, infecții virale, modificări displazice ale epiteliului colului uterin și cancer de col uterin precoce. În acest scop, angajații laboratoarelor citologice asigură o examinare microscopică calificată a frotiurilor prelevate inițial, precum și materialul obținut în timpul examinării aprofundate și monitorizării dinamice a femeilor cu patologie identificată a organelor genitale. Experiența mondială în utilizarea metodei citologice și-a dovedit capacitatea reală de a recunoaște cele mai inițiale forme de cancer de col uterin (cr. in situ și stadiul I).

Odată cu creșterea incidenței cancerului în corpul uterului, înregistrată în multe țări ale lumii, precum și în Belarus, a devenit necesară utilizarea metodei citologice pentru diagnosticarea precancerului și a cancerului de această localizare. Hiperplazia endometrială atipică este o afecțiune precanceroasă a endometrului. Citograma hiperplaziei celulare atipice a endometrului este deosebită: în frotiuri se găsesc grupuri și straturi mici de celule endometriale cu nuclee lărgite, moderat polimorfe, destul de ușoare, cu cromatină fin dispersată omogenă și citoplasmă neconturată. Pentru a recunoaște această variantă a hiperplaziei endometriale atipice, un citolog trebuie să combine un studiu țintit și amănunțit al compoziției celulare a citogramei cu capacitatea de a identifica semne mai puțin pronunțate ale atipiei celulelor endometriale.

Diagnosticul onconosologic al tumorilor maligne cu celule mici este extrem de important, apărând în principal la copii și incluzând limfomul non-Hodgkin, neuroblastomul, rabdomiosarcomul, sarcomul Ewing. Diagnosticul citologic preoperator precis al acestora contribuie la tratamentul fundamentat histogenetic, care afectează pozitiv prognosticul bolii. Toate tipurile de sarcoame cu celule mici se caracterizează printr-o compoziție celulară relativ omogenă de celule blastice nediferențiate rotunjite, acumulări focale, împrăștiate, libere, rânduri și lanțuri, ceea ce permite citologului să diagnosticheze natura malignă a procesului. Recunoașterea histogenezei unui neoplasm este posibilă atunci când sunt detectate elemente tumorale mai diferențiate printre celulele nediferențiate, care au semne determinate din punct de vedere optic de diferențiere neurale, mioblastice sau limfoide. Asigurați-vă că țineți cont de datele examinării clinice a pacientului. Trebuie amintit că în limfoamele non-Hodgkin, compoziția celulară este omogenă, celulele tumorale împrăștiate se află în același plan al preparatului și au activitate mitotică ridicată. Frotiurile conțin corpi limfoglandulari și macrofage active funcțional.

Tabloul citologic al rabdomiosarcomului este caracterizat printr-un fundal mixoid al medicamentului și un polimorfism pronunțat al elementelor tumorale cu prezența celulelor cu două și multinucleare.

Citogramele tumorilor neuroblastom se caracterizează printr-o compoziție celulară de neuroblaste mici nediferențiate și diferențiate situate izolat și în grupuri strânse cu formarea de pseudorozete, prezența focală a unui neuropil și celule ganglionare unice.

Celularitatea ridicată a frotiurilor, o combinație de celule mici „întunecate” și mai diferențiate, situate ca un muf în jurul vaselor și/sau sub formă de rozete, lanțuri, precum și o reacție PAS puternic pozitivă în celulele tumorale fac posibilă pentru a diagnostica citologic sarcomul Ewing.

În ultimii ani, interesul oncomorfologilor pentru metodele de cercetare cantitativă și imunomorfologică a crescut semnificativ. Utilizarea echipamentelor moderne (analizoare de imagine de inalta clasa), tehnicile informatice și programele matematice specializate fac posibilă trecerea de la metode de diagnostic subiective și numai calitative la metode obiective și cantitative de analiză citomorfologică. Utilizarea metodelor de imunomorfologie, împreună cu metodele standard de examinare citologică și histologică, poate îmbunătăți semnificativ calitatea diagnosticului de clarificare, ceea ce este important pentru rezolvarea problemelor de diagnostic nosologic al tumorilor și evaluarea prognosticului bolii. Telepatologia va ocupa un loc demn în citologia clinică a viitorului apropiat, cu ajutorul căreia se deschid perspective de diagnosticare precisă și consultarea calificată a preparatelor la distanță.

Nivelul celular al organizării vieții

§ 16. Istoria studiului celulei. Metode de cercetare citologică.

Istoria studiului celulei.

Lumea celulelor a rămas complet necunoscută până la mijlocul secolului al XVII-lea, când oamenii au învățat să șlefuiască lentilele și să le folosească pentru a extinde posibilitățile de vedere.

Unul dintre primii creatori ai microscopului a fost Robert Hooke fizician, meteorolog, biolog, inginer, arhitect. LA 1665 a publicat un album de desene numit „macrografie”, care prezenta observațiile sale la microscop.

Unul dintre contemporanii talentați ai lui Hooke a fost un olandez Anthony van Leeuwenhoek, care a creat 200 de microscoape cu design special propriu. Leeuwenhoek a realizat o creștere a numărului de obiecte de 270 de ori și a făcut descoperiri remarcabile.

Robert Brown în 1833 a descoperit nucleul din celulă. După 1825 Jan Purkinje au dezvoltat metode eficiente de preparare și colorare a preparatelor pentru echipamente microscopice.

Teoria celulară a fost propusă pentru plante în 1837 botanist german Matthias Schleiden,și extins la lumea animală de către prietenul său, fiziolog Theodor Schwann. Ceva mai târziu a fost completat Rudolf Virchow, in care 1885 a formulat propoziţia „Fiecare celulă provine dintr-o celulă”.

La mijlocul secolului al XIX-lea. teoria celulei a devenit universal recunoscut și baza pentru știința celulei - citologie. Până la sfârșitul secolului al XIX-lea. au fost descoperite multe componente celulare. Oamenii de știință le-au descris și le-au dat nume.

Dar în 1945 citologii au cercetat mai întâi celulele cu ajutorul microscop electronicși am văzut multe structuri necunoscute anterior. Deci, un rol decisiv în dezvoltarea citologiei revine noilor descoperiri din alte științe, în special în fizică.

Metode de cercetare citologică.

Metoda principală este metoda microscopiei luminoase. Implică utilizarea unui microscop cu lumină, dar numai preparatele citologice special preparate pot fi examinate la microscop cu lumină.

Pentru pregătirea preparatelor, citologii folosesc lame de sticlă și obiecte special pregătite care pot fi vizualizate.

Cel mai adesea, aceste structuri sunt incolore, așa că trebuie să fie colorate cu coloranți speciali, de fiecare dată diferiți, în funcție de structurile pe care doriți să le vedeți.

Există două metode: metoda de preparare a preparatelor sub presiune - obiectul studiat este pur și simplu zdrobit într-un singur strat între lama de sticlă și sticla de acoperire, iar metoda de preparare a secțiunilor subțiri, constând dintr-un singur strat de celule.

Folosit pentru a studia celulele vii metoda de microscopie cu contrast de fază. Se bazează pe faptul că secțiunile individuale ale unei celule transparente diferă unele de altele în densitate și refracție a luminii.

Când studiază celulele vii, ele folosesc și metoda microscopiei cu fluorescență. Semnificația sa constă în faptul că o serie de substanțe au capacitatea de a străluci atunci când absorb energia luminoasă. De exemplu, dacă examinăm celulele vegetale într-un microscop fluorescent, atunci boabele roșii vor fi vizibile pe un corp albastru închis, strălucesc puternic - acestea sunt cloroplaste.

Există o metodă care utilizează izotopi marcați - metoda autoradiografiei- înregistrarea substanţelor etichetate cu izotopi. Folosind această metodă, puteți vedea ce părți ale celulei primesc substanțe marcate cu izotopi radioactivi.

Metoda microscopiei electronice citologul a descoperit acele structuri celulare care sunt mai mici decât lungimea de undă a luminii. Datorită acestei metode, a devenit posibil să se ia în considerare virușii și organitele pe care are loc sinteza proteinelor (ribozomi).

De asemenea, citologii pot obține și studia diverse componente celulare folosind fracţionarea celulelor. Celula este mai întâi distrusă, iar apoi structurile celulare sunt izolate folosind un dispozitiv special - o centrifugă.

Metoda culturii celulare este o metodă de păstrare și cultivare pe termen lung în medii nutritive speciale a celulelor, țesuturilor, organelor mici sau părților acestora izolate de corpul uman, animal sau vegetal. Un avantaj important al acestei metode este posibilitatea de a observa activitatea vitală a celulelor cu ajutorul unui microscop.

Valoarea metodelor citologice în diagnosticul și tratamentul bolilor umane.

1) Metode citologice folosit în medicină pentru cercetare stare fiziologică a corpului uman pe baza studiului structurii celulelor. Sunt folosite pentru a detecta bolile de sânge, pentru a recunoaște tumorile maligne și benigne, multe boli ale sistemului respirator, digestiv, urinar, nervos și tratamentul acestora.

2) celulă stem este o celulă imatură capabilă de auto-reînnoire și dezvoltare în celule specializate ale corpului. În corpul adult, celulele stem se găsesc în principal în măduvă osoasăși în cantități foarte mici în toate organele și țesuturile. Ele pot fi folosite pentru a trata multe boli.

§ 17. Structura celulelor procariotelor şi eucariotelor.

Unitatea structurii celulelor.

Conținutul oricărei celule este separat de mediul extern printr-o structură specială - membrana plasmatica (plasmalema). Această izolare vă permite să creați un mediu cu totul special în interiorul celulei, spre deosebire de ceea ce o înconjoară. Prin urmare, acele procese pot avea loc în celulă care nu apar nicăieri altundeva, se numesc procesele vieții.

Mediu intern celula vie delimitata de membrana plasmatica se numeste citoplasma. Include hialoplasma(substanță transparentă de bază) și organele celulare, precum și diverse structuri nepermanente - incluziuni. Organelele care se află în orice celulă includ și ribozom, unde are loc sinteza proteinei.

Structura celulelor eucariote.

eucariote sunt organisme ale căror celule au un nucleu. Miez- este organul celulei eucariote, în care se stochează informația ereditară înregistrată în cromozomi și din care se copiază informația ereditară. Cromozom este o moleculă de ADN integrată cu proteine. Miezul contine nucleol- un loc unde se formează alte organite importante implicate în sinteza proteinelor - ribozomi. Dar ribozomii se formează doar în nucleu și funcționează (adică sintetizează proteine) în citoplasmă. Unele dintre ele sunt libere în citoplasmă, iar altele sunt atașate de membrane, formează o rețea, care se numește endoplasmatic.

Ribozomi- organele nemembranare.

Reticulul endoplasmatic este o rețea de tubuli delimitate de membrane. Există două tipuri: netede și granulare. Ribozomii sunt localizați pe membranele reticulului endoplasmatic granular, prin urmare, în el are loc sinteza și transportul proteinelor. Și reticulul endoplasmatic neted este locul sintezei și transportului carbohidraților și lipidelor. Nu are ribozomi.

Pentru sinteza proteinelor, carbohidraților și grăsimilor este nevoie de energie, care este produsă în celula eucariotă de „stațiile energetice” ale celulei - mitocondriile.

Mitocondriile- organele cu două membrane în care are loc procesul de respirație celulară. Compușii organici sunt oxidați pe membranele mitocondriale și energia chimică se acumulează sub formă de molecule energetice speciale. (ATP).

Există, de asemenea, un loc în celulă unde se pot acumula compuși organici și de unde pot fi transportați - acesta este aparate Golgi, sistem de pungi cu membrană plate. Este implicat în transportul proteinelor, lipidelor, carbohidraților. Organelele digestiei intracelulare se formează și în aparatul Golgi - lizozomi.

Lizozomi- organitele monomembranare, caracteristice celulelor animale, contin enzime care pot descompune proteinele, glucidele, acizii nucleici, lipidele.

O celulă poate conține organele care nu au o structură de membrană, cum ar fi ribozomi și un citoschelet.

citoscheletul- acesta este sistemul musculo-scheletic al celulei, include microfilamente, cili, flageli, un centru celular care produce microtubuli si centrioli.

Există organite care sunt caracteristice doar pentru celulele vegetale, - plastide. Există: cloroplaste, cromoplaste și leucoplaste. Procesul de fotosinteză are loc în cloroplaste.

De asemenea, în celulele vegetale vacuole- produse reziduale ale celulei, care sunt rezervoare de apă și compuși dizolvați în ea. Organismele eucariote includ plante, animale și ciuperci.

Structura celulelor procariote.

procariote sunt organisme unicelulare care nu au nucleu.

Celulele procariote au dimensiuni mici, rețin materialul genetic sub forma unei molecule circulare de ADN (nucleoid). Organismele procariote includ bacterii și cianobacterii, care odinioară erau numite alge albastru-verzi.

Dacă procesul de respirație aerobă are loc la procariote, atunci se folosesc proeminențe speciale ale membranei plasmatice pentru aceasta - mezosomi. Dacă bacteriile sunt fotosintetice, atunci procesul de fotosinteză are loc pe membranele fotosintetice - tilacoizi.

Sinteza proteinelor la procariote are loc în ribozomi. Există puține organele în celulele procariote.

Ipotezele originii organelelor de celule eucariote.

Celulele procariote au apărut pe Pământ mai devreme decât cele eucariote.

1) ipoteza simbiotică explică mecanismul apariției unor organite ale unei celule eucariote – mitocondriile și plastidele fotosintetice.

2) Ipoteza invaginării- sustine ca originea celulei eucariote provine din faptul ca forma ancestrala era o procariota aeroba. Organelele din el au apărut ca urmare a invaginării și exfolierii unor părți ale membranei, urmată de specializarea funcțională în nucleu, mitocondrii, cloroplaste ale altor organite.

§ 18. Membrane celulare. transportul substanțelor prin membrane. Aparatul de suprafață al celulei, funcțiile sale.

Membrane celulare.

membrane biologice- acestea sunt structuri subțiri adiacente de dimensiuni moleculare situate pe suprafața celulelor și părților subcelulare, precum și a tubilor și veziculelor care pătrund în protoplasmă. Funcția membranelor biologice este de a regla transportul ionilor, zaharurilor, aminoacizilor și a altor produse metabolice.

În inima oricărei membrane se află un strat dublu de fosfolipide.

Cu toate acestea, stratul bilipid nu este încă o membrană gata făcută, ci doar baza sa. Proteine ​​numite proteine ​​membranare. Proteinele membranei sunt cele care determină multe dintre proprietățile membranelor. Incluse în membrane și carbohidrați, formează complexe cu proteine ​​sau lipide. Membrana constă dintr-un strat bilipid în care moleculele de proteine ​​plutesc (sau sunt fixate), formând în ea un fel de mozaic.

Structura membranei corespunde funcțiilor sale: transport, barieră și receptor.

1) Funcția de barieră. Membrana este o barieră care împiedică intrarea diferitelor substanțe chimiceși alți agenți.

2) Funcțiile receptorului. Suprafața membranei are un set mare de receptori care permit reacții specifice cu diverși agenți.

3) Funcția de transport. Transportul ionilor și substanțelor are loc prin membrană.

Prin acoperirea celulei și separând-o de mediu, membranele biologice asigură integritatea celulelor și organelelor. Menține o distribuție neuniformă a ionilor de potasiu, sodiu, clorură și alți ioni între protoplasmă și mediu.

Cea mai importantă membrană din celulă este plasmalema- membrana de suprafata. Îndeplinește funcții de barieră, transport, receptor, semnalizare.

transportul substanțelor prin membrane.

Există două procese active: exocitoza si endocitoza.

Substanțele sunt îndepărtate din celulă prin exocitoza- fuziunea veziculelor intracelulare cu membrana plasmatică. Substanțele pot intra în celulă prin endocitoza.În procesul de endocitoză, membrana plasmatică formează concavități și crește, care apoi, exfoliindu-se, se transformă în vezicule sau vacuole.

Există două tipuri de endocitoză:

- pinocitoza- absorbția lichidului și a substanțelor dizolvate cu ajutorul unor bule mici;

- Fagocitoză- absorbția particulelor mari, cum ar fi microorganismele sau resturile celulare.

În cazul fagocitozei se formează bule mari, care se numesc vacuole.

Moleculele trec prin membrane datorită următoarelor procese: difuzie simplă, difuzie facilitată, transport activ.

difuzie simplă- acesta este un exemplu de transport pasiv, trece dintr-o zonă cu o concentrație mai mare de molecule într-o zonă cu o concentrație mai mică. Prin difuzie simplă, substanțele liposolubile nepolare (hidrofobe) și moleculele mici neîncărcate (de exemplu, apa) pătrund în celulă. Cu toate acestea, majoritatea substanțelor sunt transportate prin membrană cu ajutorul proteinelor de transport scufundate în ea. Există două forme de contestație: difuzie facilitată și transport activ.

Difuzare facilitată datorită unui gradient de concentrație, iar moleculele se deplasează de-a lungul acestui gradient. Cu toate acestea, molecula este încărcată, astfel încât transportul ei este afectat atât de gradientul de concentrație, cât și de potențialul membranei.

transport activ este transportul substanțelor dizolvate împotriva unui gradient de concentrație folosind energia ATP. Energia este necesară deoarece materia trebuie să se miște, contrar tendinței sale naturale de a se mișca prin difuzie, în sens invers. Un exemplu este pompa de sodiu-potasiu. Conform legilor difuziei, ionii de Na se mișcă în mod constant în interiorul celulei, iar ionii K + se mișcă în mod constant în afara celulei. Încălcarea concentrației necesare a acestor ioni duce la moartea celulelor.

Aparatul de suprafață al celulei.

O varietate de celule procariote și eucariote constă din părți: aparat de suprafață, citoplasmă, aparat nuclear.

Aparatură de suprafață Celula îndeplinește trei funcții care sunt universale pentru toate tipurile de celule: barieră, transport, receptor. De asemenea, poate îndeplini o serie de funcții specifice (de exemplu, funcția de turgescență mecanică a peretelui celular din celulele vegetale). Aparatul de suprafață al celulelor este format din sisteme: membrana plasmatică, complexul epimembranar și aparatul musculo-scheletic submembranar (adică pidmembrane).

membrană plasmatică, sau plasmalema, este sistemul principal, universal, al aparatului de suprafață pentru toate celulele. Sub acesta se află un sistem submembranar care este implicat în transportul și recepția transmembranară și face parte din citoplasmă.

Structura supramembrana aparatele de suprafață realizează interacțiunea celulelor cu mediul extern sau cu alte celule. Celulele animale au un complex epimembranar sau glicocalix, joacă un rol important în funcția de receptor a celulelor. Glicocalixul este format din carbohidrați, este relativ subțire și elastic.

Structurile supramembranare derivate includ perete celular. Trebuie să fie celulele plantelor, ciupercilor și bacteriilor. Peretele celular al plantelor conține celuloză, ciuperci - chitină, bacterii - mureină. Este destul de rigid, nu se micșorează. Prin perete celular trece apa, sarurile, moleculele multor substante organice. Fenomenul de plasmoliză și deplasmoliză în celulele vegetale.

Plasmoliza- aceasta este separarea citoplasmei de membrană atunci când celula este scufundată în hipertonă, adică. concentrat extern, soluție. Dacă celulele animale sunt scufundate într-o soluție hipertonă, acestea se micșorează. Uneori celulele plasmolizate rămân în viață. Dacă astfel de celule sunt scufundate în apă, în care concentrația de săruri este mai mică decât în ​​celulă, are loc deplasmoliza.

Deplasmoliza- aceasta este revenirea citoplasmei celulelor vegetale din starea de plasmoliza la starea inițială.