Markeri și metode pentru determinarea apoptozei. Markeri ai apoptozei și proliferării celulare

Principalele mijloace de transport includ terestru (rutier, feroviar), aerian (avioane, elicoptere), apă (râu, mare), transport sanitar și adaptat.

Exista urmatoarele modalitati de transport: pe brate, pe umeri, pe spate, de catre una sau doua persoane folosind curele de targa si mijloace improvizate, pe targa sanitara.

Cel mai puțin traumatizant este purtarea și transportul pe targă.

Targi sanitare, dispozitivul acestora și regulile de transport a celor afectați și bolnavi. Targii sanitare au dimensiuni standard: lungime 221,5 cm, latime 55 cm, inaltime 16 cm, greutate pana la 10 kg (Fig. 35). Targa este depozitată și transportată în stare pliată.

Targa este desfășurată simultan de 2 persoane. Centurile sunt întinse, barele sunt împinse în afară de mânere și pânza este trasă. Apoi apăsă barele cu genunchii până când apare un clic și verifică dacă dispozitivele de blocare sunt bine închise. La cap se pune o pernă sau un material moale la îndemână.

La plierea targii, ambii hamali deschid simultan zăvorele încuietorilor, trag barele spre ei înșiși, pliază targa pe jumătate și le răstoarnă cu susul în jos, în timp ce panoul se lasă pe partea opusă picioarelor. Apoi barele sunt în cele din urmă deplasate, targa este pusă pe picioare, pânza este pliată în 3 falduri și întărită cu curele.

Pentru a transporta răniți grav și bolnavi în instituțiile medicale, targa este instalată pe o targă, care este un cadru de fier cu roți. Aceasta este așa-numita targă de spital (Fig. 36). În acest scop, se pot folosi scaune cu rotile speciale (scaune cu rotile).

Pentru a facilita transportul pe targă, se folosesc curele de targă. Cureaua este o centură de pânză de 360 ​​cm lungime, 6,5 cm lățime cu cataramă metalică la capăt (Fig. 37). La o distanță de 1 m de cataramă, este cusută o căptușeală de pânză, care vă permite să treceți prin ea capătul liber al curelei și să o fixați în cataramă, apoi cureaua va arăta ca o cifră opt.

Când transportați pacienții pe targă, cureaua este pliată într-o cifră opt, pusă astfel încât buclele să fie situate pe părțile laterale ale portarului, iar crucea curelei să fie pe spate la nivelul omoplaților (Fig. . 38). Dacă crucea curelei este prea înaltă, atunci va strânge gâtul, iar dacă este joasă, va aluneca de pe umeri. Cureaua trebuie ajustată în funcție de înălțimea și fizicul dumneavoastră. Cureaua, pliată în formă de opt, nu ar trebui să se lade atunci când este pusă pe degetele mari ale mâinilor desfăcute (Fig. 39). Iarna, lungimea curelei pliate în acest fel ar trebui să fie ușor mărită.

Servitoarele sanitare trebuie să cunoască metodele practice de utilizare a targăi, să cunoască perfect comenzile date la construirea, defilarea și lucrul cu targa.

La comanda „Link, ridică-te!” legătura este construită într-o linie, în timp ce comandantul stă pe flancul drept, iar restul - în stânga lui în ordine numerică. Targa rulată ține al 3-lea număr din dreapta vertical cu capul în sus. La comanda "Targă pentru a merge!" Al 3-lea număr trece de capătul piciorului targii către al 2-lea număr care merge în față, iar capătul de cap la al 4-lea număr care merge în spate. Cel mai convenabil este să țineți targa astfel încât barele lor să fie situate una deasupra celeilalte, iar picioarele să fie îndreptate spre exterior și nu în jos. În această poziție, linkul este trimis la locul de muncă. La comanda "Link, stop!" legătura se oprește.

Reguli pentru așezarea bolnavilor și răniților pe targi și transportul lor. După ce a acordat asistență, comandantul de zbor dă comanda „Targă!”. La această comandă, asistentele desfășoară targa, le pun pe pământ (pe podea) lângă capătul capului lovit din partea plăgii spre cap. La comanda "Pe locuri!" Primul număr stă în spatele targii, restul - lângă victimă, din partea opusă plăgii: al 2-lea număr - la picioare, al 3-lea - la tors, al 4-lea - la cap. La comanda „Ia-l!” asistentele coboară pe un genunchi cel mai aproape de capul rănitului, al 2-lea număr își aduce mâinile sub tibie și coapse, al 3-lea - sub fese și spate, al 4-lea - sub omoplați și cap. La comanda „Trage în sus!” asistentele ridică în același timp răniții, iar comandantul de zbor împinge targa sub el. La comanda „Coborâți!” soldații sanitari așează cu grijă răniții pe o targă. În același timp, comandantul ajută numărul care sprijină persoana rănită la locul rănii.

Bolnav și rănit în timpul transportului, este necesar să se creeze cele mai blânde condiții, pentru a oferi cele mai convenabile și pozitia corecta. Manipularea și transportul incorecte pot agrava starea, pot provoca traume suplimentare, pot duce la creșterea sângerării, deplasarea fragmentelor osoase rupte.

În caz de leziuni ale extremităților inferioare, leziuni ale oaselor craniului, cei afectați sunt așezați pe o targă pe spate.

In cazul fracturilor coloanei vertebrale, persoana afectata este asezata pe targa in pozitie culcat.

Dacă rănitul cu o fractură a coloanei vertebrale este așezat pe spate, atunci pe targă trebuie așezat un scut de lemn, o foaie de placaj, o placă largă pentru a preveni pericolul de îndoire a coloanei vertebrale.

În cazul rănilor la nivelul abdomenului, precum și în cazul fracturilor oaselor pelvine, afectați sunt așezați pe targă și transportați în decubit dorsal cu picioarele îndoite la articulațiile genunchiului și șoldului. Un rol de haine este plasat sub genunchi, șoldurile sunt oarecum despărțite.

Victime cu rană penetrantă cufăr trebuie transportat pe o targă cu capul ridicat, evitând comprimarea toracelui.

După ce rănitul este așezat pe o targă, comandantul de zbor dă comanda „Du-te la locurile tale!”. La această comandă, numărul 1 și 3 rămân pe loc. Al 2-lea număr devine la capătul piciorului targii, cu spatele la victimă, al 4-lea număr - la capătul capului, cu fața spre el. La comanda "Pe curele!" Al 2-lea și al 4-lea număr se aplecă, îndoind genunchii, pun buclele curelelor targii pe mânerele targii, cât mai aproape de pânză, și iau mânerele. La comanda „Trage în sus!” Al 2-lea și al 4-lea numere se îndreaptă și ridică targa, iar al 3-lea și al 1-lea număr îi ajută, ridicând în același timp targa de mijlocul barelor din dreapta și din stânga. Ridicați și coborâți targa cu mare atenție. Când transportați, nu lăsați targa să se balanseze, să împingă, viraje ascuțite. La comanda „Înainte!” pentru a reduce balansul targii, legătura este decalată. La comanda „Stop!”, „Pune!” asistentele se opresc, se apleaca si pun targa pe pamant, scotand buclele curelelor de pe manerele targii.

În timpul transportului pe targă și al transportului, trebuie să se respecte starea bolnavului, pentru aplicarea corectă a bandajelor și atelelor. În timpul transportului pe termen lung, persoana afectată trebuie să-și schimbe poziția, să îndrepte tăblia patului, căptușit haine, să-și potolească setea (cu excepția celor răniți în stomac) și să le protejeze de vremea rea.

Pe teren plat, victima pe o targă este transportată mai întâi cu picioarele. Dacă este inconștient, atunci pentru a asigura observarea lui, el este purtat cu capul înainte. La ascensiuni si coborari abrupte este necesara mentinerea unei pozitii orizontale a targii.

Reguli pentru transferul pacienților de pe targă pe pat, de pe pat pe targă, pe o masă de toaletă sau de operație. Pentru a muta pacientul de pe targă pe pat, este necesar să se așeze corect targa. Sunt amplasate în așa fel încât schimbătorii să poarte pacientul în cel mai scurt mod posibil. Acest lucru ia în considerare dimensiunea camerei, disponibilitatea spațiului liber lângă pat. În funcție de aceasta, targa se așează în raport cu patul după cum urmează (Fig. 40):

la capatul capului patului, perpendicular pe acesta, cu capatul piciorului targii pe pat;

paralel cu patul, la o distanță de 2-3 m de acesta, cu capătul de cap al targii până la capătul piciorului patului;

la capătul piciorului patului, perpendicular pe acesta, cu capătul de cap al targii pe pat.

La mutarea pacientului de pe pat pe targă, acestea sunt așezate în același mod. Deplasarea în toate cazurile este efectuată de trei persoane, precum și așezarea pe o targă. Atunci când urcați pacienții pe scări, targa este întoarsă cu capătul capului înainte, iar când se transportă în jos, cu capătul piciorului înainte. În secția de spital, victimele sunt transportate și transportate mai întâi pe targi și scaune cu rotile, apoi transferate pe masa de toaletă sau, respectiv, masa de operație.

Reguli pentru încărcarea victimelor în transport. La încărcarea pacienților pe toate tipurile de transport, targa este instalată mai întâi pe nivelul superior, apoi pe cel inferior. Descărcarea se face în ordine inversă. Când se încarcă o targă cu un pacient, aceasta este hrănită cu capul înainte, targa este încărcată mai întâi, iar bolnavii și răniții care merg pe jos sunt încărcați pe al doilea. Răniți grav cu fracturi ale oaselor craniului, coloanei vertebrale, rănile din stomac ar trebui să fie plasate numai pe nivelul inferior, unde în timpul transportului se agită mai puțin.

Înainte de încărcare, șoferul și însoțitorul pregătesc ambulanța sau transportul rutier adaptat: deschideți ușile de încărcare sau rabatați hayonul înapoi, deschideți toate încuietorile pentru mânerele targii, îndreptați curelele, scoateți targa schimbătoare de pe corp.

În timpul încărcării, legătura trupelor sanitare aduce targa cu capătul de cap la ușa de încărcare (scândura pliată). La comanda „În laturi!” Al 4-lea și al 1-lea numere devin cu partea dreapta targă, iar al 2-lea și al 3-lea - pe stânga. La comanda „Trage în sus!” legătura ridică targa la înălțimea dorită și le fixează capul cu picioarele în corp. La comanda „Mutați!” targa este mutată în corp. Sunt acceptate de șofer sau de persoana însoțitoare. Dacă structura caroseriei mașinii nu permite împingerea targii, comandantul de zbor dă comanda „Accept!”. Targa este luată de șofer sau al 4-lea număr de zbor, care a intrat în corp (Fig. 41).

Pentru a reduce tremuratul, transportul rutier convențional este adaptat pentru transport: așternutul este făcut din paie, fân de cel puțin 10 cm grosime, se folosește balast (nisip, pământ). Pentru a proteja răniții și bolnavii de vreme rea și frig, caroseria mașinii este echipată cu copertine și încălzitoare. Asistentul sanitar care însoțește victimele în timpul transportului acestora cu mașini trebuie să se asigure că șoferul conduce mașina lin, fără smucituri, încetinind pe porțiuni proaste ale drumului, în viraje strânse. Pe parcurs, este necesar să se observe starea de sănătate a transportaților, să-i asiste în schimbarea poziției, să se corecteze tăblia, bandaje, să le potolească setea (cu excepția celor răniți în stomac).

Încărcarea victimelor în ambulanțe și vagoane de marfă necesită mai multă muncă. Este produs din platforme sau rampe feroviare. La încărcarea de la sol, este necesară echiparea unor scări speciale (pasare), poduri. Înainte de încărcarea în tren, răniții și bolnavii sunt grupați în funcție de gravitatea stării lor și de succesiunea încărcării. În fișa medicală primară, numărul, tipul vagonului, nivelul și locul sunt marcate cu un creion colorat.

Este necesar să plasați transportul într-o anumită secvență: mai întâi ocupă locuri îndepărtate de intrare, începând de la nivelul superior.

Când este transportată în vagoane sanitare integral metalice, targa poate fi introdusă în geamurile mașinilor, deoarece aceasta asigură încărcarea urgentă. În mașină, brancardie sunt preluate de către gardieni sanitari, care asigură cazarea răniților și bolnavilor în interiorul mașinii.

Încărcarea pe o aeronavă ambulanță sau elicopter se efectuează conform acelorași reguli ca și în cazul ambulanțelor. Caracteristicile descarcării răniților din aeronave și elicoptere este furnizarea de scări mecanizate special adaptate fiecărui tip de aeronavă sau elicopter. Transportul cu apa pentru incarcarea si descarcarea celor afectati este asigurat prin scari din lemn – pasarele.

Purtarea răniților și bolnavilor pe mâini, pe curele și mijloace improvizate. În lipsa unei targă, cel puțin improvizată, răniții sunt purtati în brațe de unul sau trei hamali.

Când este purtat în brațe de un portar, acesta cade într-un genunchi pe partea rănitului, îl ia cu o mână sub spate, iar cu cealaltă sub șolduri, cel afectat îl îmbrățișează pe purtător de gât și se apasă de el. . Apoi portarul se ridică și îl poartă în brațe pe cel lovit în fața lui. Această metodă de transport este aplicabilă membrelor și coastelor afectate fără fracturi.

Puteți purta victima pe spate cu ajutorul mâinilor, în timp ce purtătorul pune victima într-un loc ridicat, stă cu spatele la el, între picioare și cade pe un genunchi. Omul nefericit îl apucă pe purtător de umeri, iar purtătorul îl ia sub șolduri cu ambele mâini și se ridică.

Pentru distanțe relativ mari, cel mai convenabil este să purtați persoana afectată pe umăr. Se așează pe umărul drept al capului portarului pe spate. Portarul cu mâna dreaptă apucă picioarele persoanei afectate și în același timp îl ține de antebrațul sau de mâna dreaptă. Această metodă nu poate fi utilizată dacă victima are fracturi ale oaselor membrelor, toracelui, coloanei vertebrale și răni abdominale.

Distinge între purtarea pe mâini a doi hamali „încuiate”, „unul în spatele celuilalt” și în poziția culcat. Când poartă „pe lacăt”, hamalii stau unul lângă altul și își unesc mâinile astfel încât să se formeze un scaun („lacăt”). Este făcut din două, trei și patru mâini. Dacă este necesar să sprijiniți cei loviti, atunci „blocația” este făcută din două sau trei mâini. „Încuiat” cu patru mâini, persoana afectată însuși se ține de gâtul portarilor (Fig. 42, b).

Orez. 42. Transportarea afectatelor de doi hamali „încuiate”

Când poartă „unul după altul”, unul dintre purtători se apropie de rănit din lateralul capului și îl apucă de sub axile cu brațele îndoite la coate, celălalt stă între picioarele rănitului cu spatele la el, apucă picioarele rănitului sub genunchi; Primul portar nu trebuie să-și împlinească mâinile pe pieptul persoanei afectate, pentru a nu-i îngreuna respirația. Ambii hamali se ridică în același timp și poartă victima.

Cand transporta persoana afectata in pozitie culcata, hamalii se apropie de el din partea sanatoasa si se lasa intr-un genunchi. Cel care stă la cap pune o mână sub spate, iar cealaltă sub talie, al 2-lea portar pune mâinile sub șoldurile și tibia rănitului, care își înfășoară brațele în jurul gâtului primului portar.

Când sunt transportați de trei hamali, toată lumea devine pe partea sănătoasă a victimei și cade într-un genunchi. Primul portar își aduce mâinile sub cap și omoplați, al 2-lea - sub spatele și sacru, al 3-lea - sub șolduri și tibie. Când mutați și transportați afectați și bolnavi din pat în pat sau pe un scaun cu rotile targă, de pe un scaun cu rotile pe targă la o masă de operație sau de toaletă, nu este necesar să îngenuncheați.

Când transportați afectați și bolnavi fără targă, folosiți curele îndoite într-un inel sau în formă de opt. Pentru a regla cureaua, pliată într-un inel, se pune pe degetele mari ale mâinilor depărtate. În acest caz, un braț ar trebui să fie îndoit articulația cotuluiîn unghi drept; cureaua nu trebuie să se încline (Fig. 43). În lipsa curelelor de targă, acestea pot fi făcute din curele de talie: un inel - de la doi, o cifră opt - de la cinci.

Un portar poate transporta persoana afectată în două moduri. Prima metodă de purtare a curelei pliate într-un inel se caracterizează prin faptul că portarul are ambele mâini libere, permițându-i să se țină de balustrade atunci când urcă sau coboară scările. Cureaua de targa, pliata; sub formă de inel, acestea sunt aduse sub persoana afectată, astfel încât o jumătate a curelei să fie sub fese, iar cealaltă pe spate, buclele formate în acest caz ar trebui să fie amplasate pe ambele părți ale persoanei afectate întinse. pe pământ. Portarul se întinde în fața lovitului, îi pune lațuri pe umeri, le leagă cu curele de cal libere pe piept și îl pune pe lovit pe spate, apoi se pune în patru picioare, apoi pe un genunchi și la înălțimea sa. Victima stă pe o curea, lipită de portar. Dacă victima are o rană în piept, această metodă nu este potrivită, deoarece cureaua pune multă presiune pe spate. A doua metodă de purtare a curelei pliate într-o cifră opt se efectuează după cum urmează: crucea curelei este adusă sub fesele persoanei afectate, așezată pe o parte sănătoasă, apăsând spatele împotriva acestuia (purtatorul este în poziție culcat), pune pe umeri capetele libere (bucle) ale curelei și ia victima, care trebuie să se țină de umerii portarului, pe spate. Din poziția culcat, portarul se ridică, ca în prima metodă. In plus, buclele curelei targii, pliate in cifra de opt, pot fi puse pe picioarele persoanei afectate in asa fel incat crucea acesteia sa cada pe pieptul portarului. Cu o astfel de purtare, pieptul persoanei afectate rămâne liber, purtătorul trebuie să sprijine mâinile celui afectat. Ambele tipuri de purtare pe o curea pliată în formă de opt nu sunt aplicabile pentru cei afectați de o fractură a șoldurilor, bazinului și coloanei vertebrale. Al doilea tip nu poate fi folosit pentru leziuni grave ambele membre superioare.

Atunci când transportați cu ajutorul unei figuri de opt în modul „cot lângă altul”, doi hamali stau unul lângă altul, pun o curea împăturită în figura de opt astfel încât crucea curelei curelei să fie între ei la nivel articulațiile șoldului, iar buclele au fost aruncate de la un portar peste dreapta, iar de la celălalt - peste umărul stâng. Apoi purtătorii coboară unul pe dreapta, celălalt pe genunchiul stâng, ridică persoana transportată și-l pun pe genunchii închiși, aduc cureaua sub fese persoanei afectate și în același timp se ridică în picioare. Cu această metodă de purtare, mâinile purtătorilor și ale persoanei afectate rămân libere.

Atunci când transportați răniți de doi hamali pe distanță scurtă, se folosesc diverse mijloace improvizate pentru a forma un scaun: prosoape, bețe, centuri de talie, scaune etc. Puteți transporta răniții cu un stâlp, cearșafuri și curele (frânghii), pături. . Afectații și bolnavii trebuie să aibă o poziție calmă și confortabilă, în special partea afectată a corpului.

De reținut că targa poate fi realizată și din materiale improvizate: din doi stâlpi legați cu distanțiere din lemn și împletite cu curele (frânghie, curele), dintr-o față de pernă de saltea și doi stâlpi, din două genți și doi stâlpi etc. ( Fig. 44).

Trebuie avut în vedere faptul că în transportul, încărcarea, transportul și descărcarea răniților și bolnavilor vor fi implicați un număr mare de persoane neinstruite, a căror activitate va fi supravegheată de către sanitarii.

Întrebări. 1. Cum se desface și se prăbușește targa ambulanței? 2. Cum să puneți răniții și bolnavii pe targă? 3. Cum se transfera pacientii de pe targa pe pat si invers? 4. Cum să cărați răniții și bolnavii pe pământ și pe scări? 5. Cum se transfera de la pat la targa si targa si invers, la mesele de operatie si toaleta? 6. Cum se scufundă răniții și bolnavii în transportul rutier și feroviar sanitar și adaptat? 7. Cum să cărați răniții și bolnavii în brațele unuia și a doi hamali? 8. În ce moduri pot fi transferați răniții și bolnavii la unul și doi portari cu ajutorul benzilor de targă și folosind mijloace improvizate?

Efectuăm transport sanitar profesional al pacienților imobilizați și al persoanelor cu dizabilități pe targă, la preț redus.

166. Purtarea răniților de către o singură persoană efectuat cu o curea de targa sau pe maini.

167. Purtarea răniților pe o curea de targă efectuată în două moduri.

Prima cale. Rănitul este întins pe o parte sănătoasă. O curea de targa, pliata sub forma unui inel, este adusa sub ranit astfel incat o jumatate sa ii fie sub fese, iar cealalta, infilata sub axile, sa fie pe spate. Capătul liber al curelei ar trebui să fie pe pământ. Τᴀᴋᴎᴍ ᴏϬᴩᴀᴈᴏᴍ, se formează bucle pe părțile laterale ale răniților.

Asistentul stă întins în fața rănitului, cu spatele la el, își bagă mâinile în buclele curelei purtate pe rănit, le trage peste umeri. Leagă buclele cu capetele libere ale curelei și îl pune pe rănit pe spate. Apoi se ridică treptat, se pune în patru picioare, într-un genunchi și, în cele din urmă, la înălțimea maximă. Rănitul stă pe o curea, apăsat de ea de ordonator.

Această metodă este deosebit de convenabilă prin faptul că ambele mâini ale persoanei care asistă rămân libere, iar persoana rănită poate să nu se țină de el, deoarece cureaua îl ține destul de sigur. Dezavantajele acestei metode includ presiunea, ĸᴏᴛᴏᴩᴏᴇ exercită o curea pe spatele rănitului. Din acest motiv, pentru leziunile toracice, se folosește nu prima, ci cea de-a doua metodă de purtare a curelei.

A doua cale. Cel care asistă pune pe picioarele rănitului o curea îndoită în formă de opt, îl așează pe partea sănătoasă și, apăsându-și spatele de el, își pune cureaua astfel încât crucea acesteia să-i cadă pe piept. Apoi se ridică, ca în prima metodă.

La un astfel de transfer, pieptul rănitului rămâne liber, dar persoana care asistă trebuie să-și susțină mâinile, iar rănitul trebuie să se țină. pe umerii ajutorului sau centura de talie.

Ambele metode nu sunt aplicabile pentru fracturile de șold, pelvis, coloană. A doua metodă, de altfel, nu poate fi utilizată în cazul unei leziuni grave la ambele membre superioare.

Dacă nu există curea de targă, este ușor de făcut: un inel - din doi, opt - din trei curele de talie.

Orez. 9.18. O curea pliată într-un inel este purtată pe rănit pentru purtare

Orez . 9.19. Răspunsul ia rănitul pe spate

Orez . 9.20. Răspunsul se ridică împreună cu răniții

Orez . 9.21. Salvatorul transportă o persoană rănită

Orez . 9.22. Purtarea răniților pe un șnur , cifra opt îndoită

168. Purtarea rănitului de către o persoană în brațe (fără curele) făcut și în două moduri.

Prima cale. Cel care asistă îl așează pe rănit într-un loc înalt, îi întoarce spatele, stă între picioare și se lasă într-un genunchi. Rănitul apucă persoana care asistă de umeri sau se ține de centură; cel care asistă ia rănitul cu ambele mâini sub șolduri și se ridică.

Orez . 9.23, Purtarea răniților pe mâini

A doua cale.Îngenuncheat pe un genunchi pe partea rănitului, cel care asistă îl ia cu o mână sub spate, cu cealaltă sub fese, iar rănitul se ține de umeri. Apoi îngrijitorul se ridică.

Este mai greu să purtați rănitul pe mâini decât pe curea. Din acest motiv, această metodă este utilizată numai atunci când este transportată pe o distanță foarte scurtă. Îngrijitorul, purtând rănitul, se odihnește la fiecare 150-200 de pași timp de 2-3 minute. Pentru odihnă, alege un loc înălțat (piatră, butuc), așează rănitul și se așează singur, observând starea rănitului. Când este extrem de important, îi acordă primul ajutor (corectează un bandaj rătăcit, îl pansează, îi dă de băut). Dacă rănitul, purtat cu o curea, trebuie lăsat jos, cel care asistă cade mai întâi în genunchi, apoi în patru picioare, apoi se întinde și, întorcându-se cu grijă, îl pune pe partea dreaptă sau stângă (în funcție de natura leziunii).

169. Purtarea răniților împreună executat cu o curea de targa sau pe maini (fara curea).

170. Purtarea răniților cu o curea de targă. După ce au făcut o figură opt din cureaua targă, cei care asistă și-o pun pe ei înșiși, astfel încât crucea curelei să fie între ei la nivelul articulațiilor șoldului, iar bucla să treacă prin umărul drept al unuia și cel stâng. umărul celuilalt. Rănitul este așezat la răscrucea curelei astfel: cei care asistă stau față în față de ambele părți ale rănitului, unul cade pe dreapta, celălalt pe genunchii stângi; apoi ridică și așează rănitul pe genunchi închiși, îi aduc cureaua sub fese și se ridică.

Orez . 9.24. Pregătirea pentru a transporta un picior înaripat pe o curea în formă de opt

Orez. 9.25. Purtând rănitul cu o curea,

cifra opt îndoită

Orez . 9.26. Purtarea răniților pe o haină de ploaie cu un stâlp scurt

În tranșee și pasaje de comunicație, două persoane pot transporta răniții pe o curea targă pliată în figura opt, după metoda prezentată mai sus, sau pe pelerină.

171. Purtarea răniților pe mâini (fără curele) făcut și în două moduri.

Primul cale. Ajutoarele își unesc mâinile astfel încât să se formeze un scaun (ʼʼlockʼʼ). Scaunul se poate realiza prin unirea a trei mâini (două mâini ale unei persoane și o mână a alteia); mâna liberă, așezată pe umărul primei persoane, servește la sprijinirea rănitului, așezat pe ʼʼʼʼʼ.

Dacă rănitul este capabil să-și înfășoare mâinile în jurul umerilor celor care asistă, el poate fi transferat făcând un scaun de patru mâini unite.

Orez . 9.27. Purtarea răniților în două mâini (ʼʼlockʼʼ din trei mâini)

Orez . 9.28. Purtarea rănitului în două mâini (ʼlacărareʼ din patru mâini)

Răniții sunt așezați pe scaun, ca în cazul purtării pe curea. Ca scaun, puteți folosi și o centură de talie, rulată într-un inel.

A doua cale. Unul dintre cei care asistă se apropie de rănit din spate și îl apucă de sub axile cu brațele îndoite la coate; celălalt stă între picioarele rănitului cu spatele la el și își înfășoară brațele în jurul tibiei. Primul nu trebuie să-și împlinească mâinile pe pieptul rănitului, pentru a nu-i îngreuna respirația.

Această metodă este convenabilă pentru transportul răniților de-a lungul liniilor de comunicație, tranșee. Nu poate fi utilizat pentru fracturi ale membrelor.

Orez. 9.29. Purtând rănitul în două mâini

A treia cale. Cei care acordă asistență, apropiindu-se de rănit, stau amândoi pe o parte (sănătoasă) a acestuia și coboară într-un genunchi; asistarea, situată la capul rănitului, îi strecoară o mână sub spate, cealaltă sub talie;

rănitul își înfășoară mâinile pe umerii persoanei care asistă. Un altul, situat la picioarele rănitului, își aduce mâna sub fese, iar cealaltă sub tibie. Amândoi, ridicându-se în picioare, ridică răniții.

Această metodă este utilizată pentru transportul pe distanțe scurte.

Purtarea răniților pe targi.Aşezarea răniţilor pe targă

172. Tehnicile indicate în descrierea celei de-a treia metode sunt folosite și la așezarea pe targă, dar, în același timp, cei care acordă asistență pot cădea în ambii genunchi. Dacă trei persoane sunt prezente atunci când se culcă, una dintre ele susține capul și spatele rănitului, al doilea - pelvisul, al treilea - picioarele.

În cazurile în care rănitul trebuie așezat cât mai repede pe targă, cei care acordă asistență, fără să îngenuncheze, ridică rănitul de la sol, ținându-se de haine.

Orez. 9.30. Purtarea răniților pe o distanță scurtă. Încărcarea pe o targă

Orez. 9.31. Încărcarea răniților pe targă (ridicarea de la sol cu ​​haine)

Orez. 9.32. Targă dintr-un cort de pelerina de ploaie cu un stâlp și curele

Purtarea răniților în tranșee pe targă

173 . Este incomod să cărați răniții în tranșee și comunicații pe targi obișnuite, deoarece se blochează la viraje. Este mai bine să folosiți brancardiere improvizate făcute folosind un stâlp de haină de ploaie, o curea de targă medicală.

Stâlpul targă (bară rotundă) trebuie să fie puternic, 160-200 cm lungime, 5-6 cm lățime în partea de mijloc.

Purtați răniții astfel:

se pune o pelerină pe o curea pliată într-un inel;

rănitul este așezat pe o haină de ploaie, colțurile lui sunt legate în noduri peste cap și picioare;

se aduce un stâlp sub nodurile capului și piciorului pelerinei și se fixează cu o curea de targă;

cei care asistă în același timp ridică targa și o poartă și ies mereu din pas ʼʼ.

În pasajele profilului complet, targa este purtată pe umeri, în tranșee puțin adânci și pasaje ale mesajului - pe mâini.

Orez. 9.33. Transportarea răniților din pasajul adânc al mesajului pe o targă de pe un stâlp

haine de ploaie și chingi

Orez. 9.34. Schimbarea poziției celor care asistă la transportul răniților la viraje la dreapta și la stânga

174. Pe o scurtă distanță, răniții sunt purtati pe pături, pelerini de ploaie; în acest caz lucrează trei militari.

Orez. 9.35. Purtarea răniților pe o haină de ploaie (pătură)

Orez. 9.36. Targa din doi stalpi si curele

Orez. 9.37. Targa din doi stâlpi și o geantă (față de pernă pentru saltea)

9.38. Targa din doi stalpi si doua pungi

175 . Pentru lucrul în condiții normale (nu în șanțuri), este convenabilă o targă formată din doi stâlpi legați prin distanțiere din lemn și împletite cu curele, sârmă sau frânghie.

O targa se poate face rapid din unul sau doi saci si doi stalpi.

În cazul fracturilor coloanei vertebrale, este extrem de important să înlocuiți panoul targă cu o placă largă. Au pus pe ea o haină de ploaie sau fân.

Reguli pentru transportul răniților pe targă

176. Cei care ajută la transportul răniților pe targi lucrează în echipă.

Orez . 9.39. Transferarea picioarelor cicatrice în munți. A urca

Comenzile sunt date de cel care vine din spate. La comanda ʼʼ Targa ʼʼ, cei care asistă desfășoară targa și le pun pe pământ lângă răniți din partea rănii cu capul până la capul răniților. Ei înșiși stau lângă rănitul din partea opusă, scot de la el o geantă, echipament (tot ceea ce restricționează respirația sau interferează cu încărcarea); la cap se pune o geantă.

La comandă apuca-lîn același timp și ridicați cu grijă rănitul, fără să se ridice din genunchi, mutați-l înainte și la comandă inferior aşezat cu grijă pe o targă. În acest caz, părții rănite a corpului primesc o poziție ridicată și se asigură că locul rănii nu este supus presiunii.

După ce rănitul este pus pe targă, se dă comanda in locuri. Unul, oferind asistență, stă la capătul capului targii, cu fața la rănit, celălalt - la capătul piciorului, cu spatele la el. La comandă ʼʼPe cureleʼʼ cei care asistă se aplecă, îndoaie genunchii, pun buclele curelelor de pe mânerele targii și se apucă de mânere; la comandă a ridicaîndreptați-vă și ridicați targa. Ridicați și coborâți targa cu rănitul în același timp și cu grijă.

Orez. 9.40. Purtând răniții în munți. Coborâre

La comandă redirecţiona cel din faţă face un pas înainte piciorul drept, și stând în spate - cu piciorul stâng și ambele continuă să iasă din pas.

La comandă Stop se opresc. La comandă a stabilit aplecați-vă și puneți targa pe pământ. Dacă este necesară întoarcerea targăi pe loc fără a o coborî la sol, se dă o comandă ʼʼStânga, dreapta, în jurʼʼ. Cel din față merge la stânga (dreapta), în jur, iar al doilea se întoarce pe loc în aceeași direcție.

177 . Răniții sunt transportați mai întâi pe o targă. La urcarea în deal, targa este întoarsă cu capul în față. Răniții, care au pierdut mult sânge, și răniți la picioare, la ridicare, trebuie cărați mai întâi picioarele. La ascensiuni si coborari abrupte este necesara mentinerea unei pozitii orizontale a targii;

pentru a face acest lucru, atunci când vă deplasați în sus, ridicați capătul din spate al targii, iar când vă deplasați în jos, capătul din față.

178. Rănitul din maxilar este așezat cu fața în jos pentru a preveni curgerea sângelui Căile aeriene, ceea ce poate duce la sufocare, și își pune brațul îndoit la cot sau o geantă sub frunte.

179. Rănitul din stomac este așezat pe o targă pe spate, picioarele îi sunt îndoite la genunchi, o rolă de haine i se pune sub genunchi.

180. Rănitul în piept este transportat pe o targă în poziție semișezând, punându-i o geantă sub spate.

181. O persoană rănită cu o leziune a coloanei vertebrale este transferată pe o targă cu un pat rigid, care nu se lasă (pentru care pe targă sunt atașate foi de placaj gros și o placă largă).

182. În timpul deplasării, cel care merge în față îl avertizează pe cel care merge în spate despre toate denivelările din drum.Dacă există vreun obstacol pe drum (gard, gard, gard de sârmă, șanț, comunicație, șanț), cei care asigură asistență pune targa pe pământ, stai pe ambele părți ale acestora, ia partea de mijloc a gratiilor, ridică și pune mânerele targii pe obstacol (dacă este gard, gard) sau lasă targa pe pământ atârnând peste marginea obstacolului (dacă este un șanț, șanț). În același timp, unul ține capătul din spate al targii, iar celălalt, după ce a trecut peste obstacol, ia targa asupra sa. Stând la capătul din spate al targii ridică și avansează cu atenție targa, apoi se încrucișează.

183. Când efectuează o persoană rănită, cei care asistă ar trebui să ia cu ei armele și echipamentul acestuia. Când transferați o persoană rănită în timpul iernii, acesta ar trebui să fie bine acoperit și prevăzut cu o pernă de încălzire. Pentru a nu muta rănitul de pe targă, acesta este transferat la centru medicalîmpreună cu ei și, în schimb, primesc și alții din fondul de schimb.

184. Viteza medie de mișcare la transportul răniților pe targă pe un teren plat este de 2-2,5 km pe oră. După fiecare jumătate de kilometru, cei care oferă asistență se odihnesc timp de 3-5 minute. După odihnă, își schimbă locul.

Pe terenul trecut cu vederea de inamic, răniții trebuie transportați pe ascuns, respectând regulile de camuflaj.

Modalități de a transporta răniții - conceptul și tipurile. Clasificarea și caracteristicile categoriei „Metode de purtare a răniților” 2017, 2018.

apoptoza- aceasta este o formă programată, mediată genetic de moarte celulară, în care semnalele externe sau interne dau un impuls celulei să formeze sau să activeze enzime, ducând-o la autodistrugere. Din punct de vedere morfologic, apoptoza se caracterizează prin contracția celulei, condensarea și fragmentarea nucleului, distrugerea citoscheletului și proeminența buloasă a membranei celulare. O caracteristică a apoptozei este că o celulă muribundă își păstrează integritatea membranei până la finalizarea procesului și numai atunci distrugerea membranei sale este un semnal pentru fagocitele din apropiere să absoarbă fragmentele rămase și să finalizeze procesul de degradare a celulei. Celulele apoptotice care nu suferă fagocitoză imediată se transformă în fragmente mici, legate de membrană, numite „corpi apoptotici”. O caracteristică importantă a apoptozei este că îndepărtarea celulelor muribunde are loc fără dezvoltarea inflamației.

Apoptoza joacă un rol important în procesele fiziologice: organogeneză, Dezvoltarea embrionară, reglarea compoziției și numărului de populații de celule din țesuturile unui organism adult, diferite tipuri de modificări hormonale în organism. Rolul apoptozei este de asemenea important în diferite procese patologice. Este cel mai pe deplin studiat în creșterea tumorii.

Procesul de apoptoză poate fi împărțit în două faze:

formarea si conducerea semnalelor apoptotice - faza de luare a deciziei;

demontarea structurilor celulare – faza efectora.

Implementarea mecanismelor de apoptoză este asociată cu activarea enzimelor celulare endogene - cisteină proteaze (caspaze). Caspazele se găsesc în celulele în stare inactivă (procaspaze). Activarea are loc prin clivajul lor proteolitic și dimerizarea ulterioară cu formarea de subunități active. Țintele pentru caspaze sunt proteinele responsabile pentru diferite funcții vitale ale celulei. În prezent, au fost descrise 14 tipuri de caspaze, care pot fi împărțite în 3 grupuri în funcție de caracteristicile lor funcționale:

activatori de citokine (caspaze 1, 4, 5, 13)

caspaze - inductori de activare a caspazelor efectoare (caspaze 2, 8, 9, 10)

caspaze efectoare - performanți ai apoptozei (3, 6, 7)

Unul dintre receptorii celulari membranari responsabili de mecanismele de apoptoză este o proteină numită receptor Fas (CD95/APO1). Ligandul pentru receptorul Fas este o proteină - ligand Fas (Fas-L), care aparține familiei factorilor necrotici tumorali și poate fi prezentat atât sub formă de proteină membranară, cât și sub formă solubilă. Legarea receptorului Fas de ligand Fas duce la activarea mecanismelor de apoptoză cu activarea inductorilor de caspază. La activarea ulterioară a caspazelor efectoare, începe un lanț de reacții proteolitice, al căror scop este „demontarea” apoptotică a celulei: fragmentarea ADN-ului, scindarea directă a proteinelor structurale ale celulei și dereglarea sintezei proteinelor. Astfel, participarea caspazelor efectoare în apoptoză duce la ruperea celulei apoptotice cu celulele înconjurătoare, reorganizarea citoscheletului, posibilități reduse de reparare și replicare a ADN-ului, ruperea membranei nucleare și distrugerea ADN-ului, eliberarea de semnale care marchează celula pentru apoptoză. și disecția celulei în corpuri apoptotice. Nu întâmplător caspazele efectoare sunt numite „caspaze de călău”.

Metodele de studiu a apoptozei sunt destul de diverse. Inițial, cea mai comună metodă pentru determinarea apoptozei a fost electroforeza fracției de ADN extras, ceea ce face posibilă dezvăluirea caracterului discret al ADN-ului cu greutate moleculară mică în mol. masa (ca urmare a degradării internucleozomale a ADN-ului). În studiile morfologice, pentru a detecta rupturile de ADN, se folosește metoda TUNEL, care se bazează pe formarea de inserții de oligonucleotide marcate în regiunile rupurilor de ADN, a căror formare este catalizată de enzima TdT.

În prezent, metodele bazate pe citometria în flux sunt din ce în ce mai folosite pentru a înregistra apoptoza limfocitelor. Acest grup include o metodă bazată pe detectarea pierderii unei părți a ADN-ului de către celule (celule hipodiploide) folosind un colorant fluorescent - iodură de propidiu, care este descris mai jos. Alte metode bazate pe citometria în flux sunt, de asemenea, utilizate pentru a determina apoptoza. Apoptoza limfocitelor poate fi detectată deja într-un stadiu incipient utilizând anexina V marcată cu fluorocrom, care se leagă de fosfatidilserina care apare pe membrana celulelor aflate în apoptoză. O idee aproximativă a „tendinței” limfocitelor de a dezvolta apoptoză poate fi obținută prin determinarea exprimării pe suprafața lor a receptorului Fas (CD95) și în mitocondrii a protoncogenului bcl-2.

Semnificația clinică a evaluării apoptozei în timpul examinării clinice și imunologice a pacienților este fără îndoială, deoarece o serie de boli sunt asociate cu încălcarea acesteia. Slăbirea apoptozei se datorează formării boală autoimună(datorită unei încălcări a procesului de sacrificare a clonelor autospecifice ale limfocitelor). Prin urmare, înregistrarea slăbirii apoptozei poate servi ca sursă de informații despre mecanismele patogenetice ale unor boli autoimune precum lupusul eritematos sistemic, artrita reumatoida, precum și sindromul limfoproliferativ autoimun, a cărui bază este o mutație a genelor care determină receptorii pentru semnalele apoptotice. Încălcarea apoptozei este un mecanism important pentru dezvoltarea proceselor maligne. În celulele tumorale, este adesea detectată o mutație a genei p53, care codifică o proteină care percepe un semnal despre prezența unor rupturi nereparate în ADN și mutații cromozomiale, ducând la dezvoltarea apoptozei. Ca urmare, celulele defecte genetic nu sunt aruncate și devin o sursă de formare a tumorii.

În o serie de alte boli, dimpotrivă, se observă o creștere a apoptozei. Aceasta are loc când procese infecțioase(cauza apoptozei în masă a celulelor T este adesea superantigenele microbiene), sepsis, diferite boli virale, inclusiv SIDA. Apoptoza este intensificată într-o serie de boli ale sângelui și imunodeficiențe primare, atunci când cauza ei este producerea insuficientă de factori de supraviețuire celulară, al căror rol este jucat de citokine. Astfel, într-una dintre formele de imunodeficiență combinată severă asociată cu o mutație a genei IL-7 sau a lanțului y comun al receptorilor de citokine, moartea precursorilor limfoizi din cauza deficienței de IL-7 este.

Cu toate acestea, cea mai semnificativă în general este evaluarea „apoptozei de activare” la care sunt supuse limfocitele atunci când sunt stimulate de mitogeni. Faptul este că apoptoza, împreună cu proliferarea, este o formă de răspuns a limfocitelor la stimulii de activare. În stadiile incipiente ale diferențierii predomină răspunsul apoptotic, iar rezultatul acestuia este formarea toleranței la antigenul inductor. Limfocitele mature răspund la stimulare predominant prin proliferare (care servește stadiul inițialși o condiție prealabilă pentru dezvoltarea unui răspuns imun), dar rămâne o anumită probabilitate de intrare a acestora în apoptoza de activare. Deoarece apoptoza în acest caz acționează ca un proces alternativ la proliferare, raportul lor poate servi ca măsură a eficacității răspunsului celular la semnalele de activare. Cu cât contribuția apoptozei este mai mare la răspunsul limfocitelor la un mitogen, cu atât este mai puțin eficientă specificul antigenului. apărare imună. Astfel, determinarea apoptozei la activarea limfocitelor de către mitogeni este cea mai informativă sub condiția unei evaluări paralele a răspunsului proliferativ al celulelor la același stimul.

În timpul apoptozei, celula suferă un lanț complex de reacții la nivel molecular conducând la modificări ale proceselor metabolice și ale caracteristicilor fenotipice ale celulelor. Aceste modificări pot fi determinate prin metode biochimice, microscopice sau citometrice și sunt utilizate ca markeri ai apoptozei.

Unul dintre markerii timpurii ai apoptozei este apariția pe membrana citoplasmatică a celulei receptori pentru anexine. În celulele apoptotice, fosfolipidul fosfatildiserina (PS) este reorientată și localizată pe suprafața membranei celulare. Localizarea PS pe suprafața membranei se observă pornind de la
stadiu timpuriu apoptoza pentru degradarea completă a celulei. Recombinant
ny proteina anexină V (35-36 kDa), care are o afinitate mare
la PS în prezența ionilor de Ca +2. Contactarea FS la suprafață
anexina V conjugată cu fluorocrom servește ca
marker de apoptoză. De obicei, anexina V este utilizată în combinație cu
iodură de propidiu (PI), care permite recunoașterea simultană a
celule intacte (negative atât pentru anexina V, cât și pentru PI), celule
sunt în apoptoză "timpurie" (pozitiv pentru anexina V,
negativ pentru PI) și celule în apoptoză târzie sau
în necroză (pozitiv atât pentru anexina V cât și pentru PI).

CD95 Fas, sau APO-1, este o glicoproteină transmembranară de 45 kDa care este un membru al familiei de receptori a factorului de necroză tumorală (TNF-α). Antigenul CD95 este exprimat în cantități semnificative pe timocite, limfocitele din sângele periferic CD4+, CD8+, într-o măsură mai mică pe limfocitele B și celulele NK. Acest antigen este exprimat și pe granulocite și monocite, dar expresia lui nu se găsește pe trombocite și eritrocite. Receptorul CD95 este observat și pe celulele țesuturilor normale și tumorilor. Legarea CD95 la un ligand Fas (Fas-L, CD95L) induce apoptoza în celulele care îl exprimă. Anticorpii monoclonali la CD95 permit utilizarea metodei citometriei în flux sau microscopiei cu fluorescență pentru a identifica o populație de celule pregătite pentru apoptoză.

CD95L (Fas-L)– numit Fas-ligand, este o proteină membranară (40kD). Există, de asemenea, o formă solubilă de CD95L (sFas-L), care este o proteină (26 kD) din familia receptorilor (TNF-α). Acest antigen este exprimat de limfocitele E citotoxice și celulele NK și se găsește, de asemenea, pe multe celule tumorale. Legarea Fas-L la receptorul CD95 induce procesul de apoptoză în celulele țintă. Anticorpii monoclonali la CD95L permit utilizarea metodei citometriei în flux sau microscopiei cu fluorescență pentru a identifica o populație de celule pregătite pentru apoptoză.

Bcl-2– proteină (26 kDa), a cărei supraexpresie blochează apoptoza. Bcl-2 este o proteină intracelulară localizată pe mitocondrii; prin urmare, pentru a o determina cu ajutorul anticorpilor monoclonali, este necesară permeabilizarea preliminară a membranei celulare.

Sfârșitul lucrării -

Acest subiect aparține:

Metode de evaluare a stării imune a unui manual pentru studenții facultăților de medicină, pediatrie și medico-profilactic

Statul Kursk universitate medicala agenția federală de sănătate și dezvoltare sociala.. Departamentul de Imunologie Clinică și Alergologie..

Dacă aveți nevoie de material suplimentar pe această temă, sau nu ați găsit ceea ce căutați, vă recomandăm să utilizați căutarea în baza noastră de date de lucrări:

Ce vom face cu materialul primit:

Dacă acest material s-a dovedit a fi util pentru dvs., îl puteți salva pe pagina dvs. de pe rețelele sociale:

Toate subiectele din această secțiune:

Starea imunității și metodele de evaluare a acestuia
Statutul imunitar (IS) - un set de parametri de laborator care caracterizează activitatea cantitativă și funcțională a celulelor sistem imunitar. Indicatorii IP diferă în mare măsură

Obiecte și metode de cercetare imunologică
Obiecte de studiu Metode de studiu Caracteristicile fenotipice ale celulelor imunocompetente Citofluorometrie în flux Imm

Limfocite
Ca parte a celulelor sistemului imunitar, imunocitele adevărate sunt toate variante de limfocite. Alte tipuri de globule albe (neutrofile, eozinofile, bazofile, monocite), macrofage, trombocite, mastocite

celule MFS
Monocitele din sângele periferic și macrofagele tisulare sunt derivate din celule stem pluripotente. Odată ajunse în sânge, monocitele se stabilesc în țesuturi în decurs de 2-3 zile, unde se transformă în țesut.

Sistem antimicrobian dependent de oxigen
Mecanisme dependente de oxigen de acțiune bactericidă glucoză + NADP+ → Pentoză fosfat + NADPH Citocrom b245 NADP + O2 ͛

celulele mediatoare
Granulocitele sunt leucocite polimorfonucleare care circulă în sânge și provin, ca și celulele monocite-macrofage, dintr-o celulă stem mieloidă din măduva osoasă. Există trei tipuri de cereale

Metode de imunofenotipizare a limfocitelor
La studierea limfocitelor se evaluează numărul acestora în sângele periferic și activitatea funcțională. Determinarea numărului de celule se realizează ținând cont de antigenele de diferențiere pe și

Izolarea fracției mononucleare
Metoda de izolare a celulelor mononucleare se bazează pe flotabilitatea diferită a diferitelor elemente de formă sânge. Utilizarea unui anumit gradient de densitate face posibilă separarea celulelor mononucleare (limfocite, monocite,

Citometrie în flux
Citometria în flux se bazează pe măsurarea proprietăților optice ale celulelor. Celulele sunt introduse individual într-un flux laminar într-o celulă cu flux de cuarț unde traversează o lumină focalizată

Metoda imunofluorescenței indirecte
Imunofluorescența indirectă este o metodă bazată pe utilizarea anticorpilor monoclonali marcați cu fluorocrom, cu evaluarea rezultatelor ținând cont de luminescența specifică a celulelor în timpul microscopiei fluorescente.

Metoda imunocitochimică
Metodele imunocitochimice se bazează pe utilizarea de enzime precum peroxidaza și fosfataza alcalină. În prezent, metoda cea mai des folosită este PA (peroxidază-antiperoxidază), st

Metode de studiere a activității funcționale a limfocitelor
Activitatea funcțională a limfocitelor este evaluată prin următoarele efecte: capacitatea de a recunoaște antigenele, activarea, proliferarea și diferențierea celulelor. Capacitatea limfocitelor de a

Reacția de transformare blast a limfocitelor
Contactul unui limfocit cu un antigen străin sau un mitogen nespecific este însoțit de reacția de activare și transformare blastică (RBTL), adică proliferarea celulară cu trecerea limfocitelor mici într-un blast

Cultură mixtă de limfocite
Co-cultivarea limfocitelor cu molecule MHC-II de haplotip diferit determină transformarea și proliferarea blastică a acestora. Celulele care răspund sunt limfocitele T și sunt stimulate de străini

Proteinele plasmatice
Peste două sute de proteine ​​sunt prezente în plasma umană, dintre care majoritatea au fost izolate și descrise structural și funcțional. Proteinele plasmatice sunt predominant glicoproteine. Cu electrofo

Globuline
α1-antitripsina este α1-globulina, care reprezintă mai mult de 80% din activitatea antiproteazei serice, este componenta principală a benzii α. În sifon de zer

Globuline
Haptoglobină - timp de înjumătățire 2-4 zile. Conținutul de haptoglobină în ser este normal 0,3 - 2,0 g/l. Principalul lui valoare functionala- leagă hemoglobina liberă în ser

Metode de electroforeză a proteinelor
Electroforeza este utilizată pe scară largă pentru determinarea semicantitativă a proteinelor serice și pentru detectarea paraproteinelor. Electroforeza se face cu ser, nu plasma, deci

Imunoglobuline
Imunoglobulinele (Ig) sunt proteine ​​specifice care sunt produse de sistemul imunitar ca urmare a unei reacții la antigeni străini și se acumulează în serul sanguin și alte fluide biologice.

Imunoglobuline umane
Proprietate IgM IgG IgA IgD IgE Forma moleculară Pentamer

Metode de determinare a imunoglobulinelor
Pentru determinarea cantitativă a conținutului de Ig din diferite clase în serul sanguin și altele fluide biologice au fost utilizate pe scară largă diverse opțiuni stabilirea unei reacții de precipitare într-un gel

Paraproteine
Paraproteinele sunt imunoglobuline sau fragmentele lor produse de celulele plasmatice derivate dintr-o linie celulară specifică de limfocite B (monoclon). Paraproteinele adesea nu

Crioglobuline
Crioglobulinele sunt proteine ​​plasmatice patologice (10-80 mg/ml) care au proprietatea de a se transforma într-o stare de gelatină la temperaturi sub 37 ° C. Majoritatea crioglobulinelor sunt complexe policlonale

Metode de determinare a complexelor imune
Legarea Ig la un antigen este proces fiziologic, conducând la formarea complexelor imune (IC), care vizează eliminarea antigenului din organism. Cu toate acestea, în anumite condiții

Determinarea autoanticorpilor în diagnosticul bolilor sistemice ale țesutului conjunctiv
Conform conceptelor moderne, autoimunitatea se referă la astfel de condiții în care în organism apar anticorpi sau limfocite sensibilizate împotriva antigenelor normale ale propriilor țesuturi.

Markeri serologici majori ai bolilor autoimune
Antigen Denumire originală Structura moleculară Funcție Valoare diagnostică

Determinarea ANA în reacția de imunofluorescență indirectă
Într-un test tipic, serul pacientului este incubat cu substraturi antigenice (ficat animal sau țesut renal, cultură de celule Hep-2) pentru a efectua legarea specifică a

Imunofluorescență indirectă
Model de iluminare Specificitatea antigenică Semnificație clinică ADNdc periferic sau marginal, l

Determinarea ANA și ENA prin ELISA în fază solidă
Sistemul de testare ANA ELISA (UBI MAGIWELL) - pentru analiza de screening pentru anticorpi antinucleari asigură determinarea semicantitativă a unei game largi de anticorpi la complexul adsorbit în godeuri

boală autoimună
Tipul patologiei Rezultatele cercetărilor imunologice. Tipul de anticorpi și frecvența apariției lor (%)

Sistemul citokinelor
Citokinele sunt o clasă de mediatori peptidici solubili ai sistemului imunitar necesari pentru dezvoltarea, funcționarea și interacțiunea acestuia cu alte sisteme ale corpului. Ei definesc

Interleukine
IL-1 este un mediator imunoregulator eliberat în timpul reacții inflamatorii, leziuni tisulare si infectii (citokine proinflamatorii). IL-1 stimulează proliferarea și diferențierea

interferoni
Interferonul (IFN) a fost descoperit ca o proteină cu activitate antivirală. Efectul antiviral al IFN se datorează capacității sale de a preveni replicarea intracelulară a virusului în stadiu

Factori de necroză tumorală
Factorul de necroză tumorală (TNF) este principalul mediator produs de organism ca răspuns la bacteriile Gram-negative. Substanța activă a bacteriilor Gram-negative este componenta LPS a peretelui celular.

factori de stimulare a coloniilor
Un număr de citokine formate în timpul dezvoltării răspunsului imun au un efect stimulativ asupra diferențierii precursorilor măduvei osoase. Aceste citokine sunt numite stimulatoare de colonii

factori de crestere
Factorul de creștere transformator (TGFβ) este o familie de peptide înrudite cu efecte multiple asupra proceselor generale de reglare a creșterii și morfogeneză. TGFβ - citoc principal

Metode de determinare a citokinelor
Determinarea conținutului de citokine din diverse fluide biologice are mare importanțăîn evaluarea activității funcționale a celulelor imunocompetente și în reglarea răspunsului imun. În rânduri separate

Sistemul de complement
Sistemul complement este un complex de proteine ​​din serul sanguin capabil de auto-organizare și mediere a imunității umorale și a reacțiilor de fagocitoză. În prezent se știe că

Metode de determinare a activității complementului
Activitatea totală (titrul) complementului este determinată în reacția de hemoliză folosind eritrocite berbec. Complementul conținut în serul de testare provoacă hemoliză la berbecii sensibilizați.

Titrul de complement în 50% HE
Hemoliza, % K Hemoliza, % K Hemoliza, % K Hemoliza, % K

Determinarea componentelor complementului
Pentru a determina componentele complementului, se utilizează ELISA și metoda turbidimetrică, a cărei implementare este descrisă în instrucțiunile atașate la sistemele de testare de diagnosticare. LA practica clinica pe

Componentele complementului
Componenta complementului Manifestări clinice Deficit de C1 De obicei nu provoacă tulburări semnificative clinic, deoarece mănâncă

Metode de studiere a activității fagocitare a granulocitelor
Cea mai importantă caracteristică a funcției granulocitelor este evaluarea activității lor fagocitare. Scăderea acestuia poate fi rezultatul atât a unei deficiențe a factorilor opsonanți serici (anticorpi, complement

Testul NST
Testul cu nitrozin tetrazolium (test NCT) este utilizat pentru a detecta așa-numitele granulocite și monocite activate. Activarea fagocitelor se bazează pe o creștere bruscă a reacțiilor oxidative

Metodologia de cercetare
Reactivi și materiale necesare: KN 42 ORO 44 0, Na 42 ORO 44 0, NaCI, glucoză, nitrozin tetrazolium, heparină, alcool metilic, 1% soluție de apă verde de metilen (dacă

Determinarea mieloperoxidazei
Mieloperoxidaza oxidează o serie de substraturi (benzidină, ortofenilepiamină) în prezența peroxidului de hidrogen, care este însoțită de o reacție de culoare. Mieloperoxidaza - o enzimă care se găsește în granulele de fagi

Chemiluminiscență
Strălucire spontană care apare atunci când reacții chimice datorită energiei substanţelor care reacţionează, se numeşte chemiluminiscenţă (CL). Este inerentă tuturor țesuturilor și celulelor unui organism viu, atâta timp cât acestea

Determinarea conținutului de IgE
Dintre metodele imunologice de evaluare a parametrilor nespecifici ai stării imune în majoritatea bolilor atopice, determinarea cantității de IgE totale este de cea mai mare importanță. in orice caz

Testul de degranulare a bazofilelor
La pacienții alergici, o parte semnificativă a IgE se leagă de diferite leucocite prin receptorii lor Fc. Prezența celulelor purtătoare de anticorpi indică sensibilizarea acestora la alergenul corespunzător. B

Test de stimulare cu antigen al celulelor bazofile - CAST
În cazul mediate de IgE reactii alergice mecanismul de declanșare începe cu legarea alergenului de molecule specifice de IgE de pe suprafața bazofilelor sau a mastocitelor. E

Reacția de inhibare a migrației leucocitelor
Reacția este setată pentru a identifica limfocitele sensibilizate la presupusul alergen. Limfocitele sensibilizate, atunci când interacționează cu un anumit alergen, eliberează mediatori (FPML

Sarcina 1
Un pacient de 23 de ani se plânge de furuncule recurente localizate pe față și picioare. Semnele frecvente raceli(de până la 7-8 ori pe an), erupții herpetice pe buze.

Sarcina #2
Pacientul N., în vârstă de 22 de ani, a apelat la un imunolog cu plângeri de infecții virale respiratorii acute recurente (de până la 7 ori pe an), adesea însoțite de o exacerbare a bronșitei cronice obstructive. Antibacterian condus

Sarcina #3
Pacientul T., în vârstă de 27 de ani, a consultat în mod repetat un medic despre infecții virale respiratorii acute recurente, traheobronșită, slăbiciune și stare de rău. Din anamneză s-a stabilit că în cursul anului a avut ARVI de șase ori, de două ori

Sarcina #4
Pacienta K, 45 de ani. Diagnostic: lupus eritematos sistemic. Un studiu imunologic a relevat: Leucocite - 5,5 x 109/l Limfocite -37%, abs. 2,03 x 109

Sarcina numărul 5
Un copil de 5 ani face parte din grupul copiilor bolnavi frecvent și pe termen lung, recidive ale ARVI o dată pe lună, focare de infecție cronică ( sinuzita cronica, adenoidita), ganglioni limfatici cervicali măriți

La examenul imunologic
Teste de nivel 1 Numărul total de globule albe. Leucoformula limfocite T Limfocite B

Analize generale de sânge
Normă unități SI Hemoglobină M F 130,0-160,0 120,0-140,0 g/l

Principalii markeri CD ai celulelor sistemului imunitar
Marker CD Populație celulară % celule CD2 T și NK

Subpopulația de limfocite la copii
limfocite 4-5 zile - 3 luni 4-8 luni 1-2 ani 2-5 ani peste 5 ani Soare

Nivelul imunoglobulinelor din serul sanguin al adulților
IgM IgG IgA IgE 1,3-1,7 g/l 12-14 g/l 2,1-2,9 g/l

Panoul alergologic MAST (test cu mai multe alergosorbente) pentru detectarea imunoglobulinelor specifice alergenilor din diferite grupe
Panou alimentar Ig E Panou prelungit rusesc Ig E Panou alimentar Ig G Panou universal rusesc Ig E

Glosar de termeni
Aviditatea este puterea de legare a unui antigen la un anticorp, care este determinată de afinitatea și valența anticorpilor. Aglutinare - agregare la

Lista abrevierilor și convențiilor
AG - antigen AFC - celula producatoare de anticorpi APC - celula prezentatoare de antigen AT - anticorp VLS - eferent vas limfatic SVK este un virus infectat

Influență cardinală asupra cursului serialului procese patologiceîn organism poate avea atât accelerare, cât și decelerare a apoptozei. Substanțele implicate în reglarea apoptozei sunt de obicei proteine, iar sinteza lor este controlată de genele corespunzătoare. Aceleași gene care reglează nivelul de apoptoză pot fi găsite la ființele vii în diferite stadii ale scării evolutive. Genele care stimulează apoptoza includ genele p53, Bax și bcl-xS. Pe de altă parte, au fost descrise gene care sintetizează proteine ​​care inhibă apoptoza (Bcl-2, Ced-9, BHRF1, MCL-1). Proteinele pro- și anti-apoptotice sunt capabile să se combine între ele, formând homo- și heterodimeri. De exemplu, atunci când un inhibitor de apoptoză al proteinei Bcl-2 este combinat cu proteina activatoare de apoptoză Bax, rezultatul (inhibarea sau activarea apoptozei) va fi determinat de ce proteină va predomina în această combinație.

Cele mai frapante și informative proteine ​​care reflectă procesele sintetice în desfășurare în celule și țesuturi sunt proteinele din familia Bcl-2, care ocupă un loc central în studiul reglării procesului de apoptoză. Este recomandabil să se ia în considerare mecanismul de reglare a acestui proces din punct de vedere al relațiilor structurale și funcționale dintre proteinele acestei familii, care le permit să fie combinate într-o singură familie - proteinele Bcl-2. Proteinele acestei familii Bcl-2 sunt în echilibru dinamic constant, formând homo- și heterodimeri, care afectează în cele din urmă dezvoltarea apoptozei celulare. Prin urmare, se crede că raportul dintre formele active ale acestor proteine ​​determină echilibrul dintre viața și moartea celulei.

Până acum, se știe că proteinele din familia Bcl-2 sunt fie inductori ai apoptozei (Bad, Bax, J3ik, Bid, Bak) fie inhibitori (Bcl-2, Bcl-X). Proteina din familia Bcl-2 aparține clasei G - proteine. Proteina de 26 kJ codificată de gena Bcl-2 conține un domeniu transmembranar și este localizată în membrana mitocondrială, reticulul endoplasmatic perinuclear, membrana nucleară și cromozomii mitotici.

Bcl-2 este un factor de supraviețuire celulară, protejându-l de moartea programată și prezintă o proprietate oncogenă, deoarece previne apoptoza. Gena Bcl-2 funcționează ca un regulator negativ al apoptozei. S-a stabilit că o scădere a concentrației de Bcl-2 duce la moartea celulelor apoptotice, în timp ce supraexpresia sa protejează celulele de moarte.

Secvența de evenimente care duc o celulă la apoptoză ca urmare a interacțiunii proteinelor din familia TNF cu receptori specifici este cea mai bine studiată. Un reprezentant proeminent al acestui grup de proteine ​​este sistemul Apo-1/Fas/FasL. Trebuie remarcat faptul că pentru acest sistem nu este cunoscută nicio altă funcție decât inducerea apoptozei celulare.

Apo-1/Fas/CD-95 este un receptor înrudit structural cu familia de receptori TNF. Interacțiunea Apo-1/Fas (receptor) cu FasL (ligand) sau cu anticorpi monoclonali duce la apoptoza celulară. Apo-1/Fas este exprimat constitutiv pe suprafața multor tipuri de celule: pe timocite, linii celulare limfoblastoide, limfocite T și B activate, precum și pe fibroblaste, hepatocite, keratinocite și celule mieloide. Apo-1/Fas uman constă din 325 de resturi de aminoacizi și este o proteină membranară de tip I. Acestea. structura sa poate fi împărțită în domenii extracelulare, transmembranare și citoplasmatice. Omologia secvenței de aminoacizi printre receptorii familiei TNF este mare. Aproximativ 80 de resturi de aminoacizi formează domeniul morții (DD), care este implicat în interacțiunea proteină-proteină cu proteinele citoplasmatice, generând semnalul morții. Gena Apo-1/Fas la om este situată pe brațul lung al cromozomului 10 și este formată din 9 exoni.

FasL este o citokină și aparține familiei de citokine TNF. FasL este exprimat pe limfocitele T activate și pe celulele ucigașe naturale, precum și pe celulele Sertoli și celulele parenchimatoase ale camerei anterioare a ochiului, ceea ce permite acestor celule să omoare orice celulă care exprimă Fas, inclusiv limfocitul T activat. Acest mecanism determină apariția locurilor protejate de sistemul imunitar. FasL există în două forme: insolubil sau legat de membrană și solubil, care este scindat din celulă de metaloproteinază. Forma solubilă a sFasL uman rămâne activă. Ca și alți liganzi ai receptorilor din familia TNF, sFasL este un homotrimer care se leagă la 3 molecule Apo-1/Fas.

Când ligandul se leagă de receptor, are loc oligomerizarea proteinelor citoplasmatice, cum ar fi DD (domeniul morții), legat de receptor, o proteină adaptoare - FADD (domeniul de moarte asociat Fas), care conține DED - domeniul efector al morții și procaspaza- 8. Ca rezultat al acestui proces, proteaza specifică apoptozei, caspaza-8, este activată și se dezvoltă procesele caracteristice apoptozei. Mutațiile în gena fas sau în gena FasL duc la dezvoltarea bolilor autoimune.

Apo-1/Fas este o proteină care conține 1 regiune transmembranară, care, prin legarea la FasL, induce apoptoza în celulele țintă. Există, de asemenea, o formă solubilă, fără transmembranare, de Apo-1 (sApo-1/Fas) care este prezentă în ser și alte fluide corporale. Conform literaturii de specialitate, această formă secretorie (sApo-1/Fas) poate proteja celulele de apoptoza indusă de Apo-1/ligand și este formată prin scindarea unui rest de aminoacid din domeniul transmembranar.

În ultimii ani, identificarea apoptozei se realizează adesea prin determinarea activității caspazelor, atât inițiatoare cât și efectoare. În majoritatea lucrărilor efectuate cu studiul activității caspazei, se ia în considerare caspaza-3, deoarece asupra acestuia converg diferite căi de moarte apoptotică, iar activarea ei indică prezența apoptozei. Cu toate acestea, dacă determinarea activității caspazei-8 este introdusă în studiu, atunci pe lângă identificarea morții celulare programate ca atare, este, de asemenea, posibilă determinarea căii de declanșare a acesteia, deoarece Activarea caspazei-8 indică mecanismul receptorului (extern) de inițiere a procesului. Acesta este avantajul major al acestei metode.

Până în prezent, au fost dezvoltate peste 60 de metode diferite pentru detectarea și studiul celulelor apoptotice in vitro. Literatura descrie mai multe abordări metodologice pentru detectarea in vivo a celulelor apoptotice in vivo. Aceste metode se bazează pe evaluarea calitativă sau cantitativă a evenimentelor cauzate de modificări ale membranei exterioare a celulelor, fragmentarea selectivă a ADN-ului nuclear, modificările structurii componentelor intracelulare sau redistribuirea acestora, precum și scăderea pH-ului citoplasmei. . În plus, există forme atipice apoptoza, în care nu există modificări apoptotice marker.

Din motive evidente, este imposibil să se studieze mecanismele apoptozei GCS în POAG la oameni in vivo. Ca indicator indirect în studiul rolului apoptozei în patogenia POAG, au fost evaluați markerii apoptotici din limfocitele din sângele periferic, care caracterizează gradul de pregătire a acestora din urmă pentru apoptoză. Pentru determinarea celulelor apoptotice se folosesc următoarele: scanare laser și citometrie în flux, tomografie computerizată cu emisie de foton unic, magnetică imagistica prin rezonanță(RMN), spectroscopie de rezonanță magnetică, tomografie cu emisie de pozitroni. De asemenea, pentru a identifica moartea celulelor apoptotice, microscopia luminoasă și fluorescentă folosind metode convenționale de fixare și colorare, metode microscopice electronice, detectarea degradării ADN-ului oligonucleozomal in situ, detectarea imunohistochimică a proteinelor - markeri implicați în moartea celulară programată sau ADN fragmentat, determinarea activitate caspaza.

Studiul apoptozei pe preparate colorate prin metode standard este utilizat pe scară largă datorită simplității relative a acestor metode. Rezultatele obținute prin numărarea celulelor modificate apoptotic sunt exprimate ca așa-numitul indice apoptotic. Criteriile pentru moartea celulară programată pot fi marginea cromatinei și picnoza, modificări ale contururilor nucleului, modificări ale contururilor și fragmentarea celulelor și apariția nucleelor ​​libere.

Microscopia fluorescentă este adesea folosită ca metodă subiectivă pentru a detecta moartea celulară programată. Sunt examinate atât celulele colorate vital în suspensie, cât și preparatele fixe. Când se lucrează cu celule vii, etichetarea anexinei V este utilizată pe scară largă, ceea ce face posibilă detectarea in afara fosfatidilserina care apare în procesul de apoptoză a membranei plasmatice.

Atunci când se analizează celulele la microscopie fluorescentă, se iau în considerare următoarele caracteristici: dimensiunea nucleului (scădere), natura distribuției cromatinei (condensarea în aglomerări neregulate, compactare), corpurile cromatinei (păstrarea izolării membranei), natura luminiscenței ADN-ului. ADN-ul apoptotic apare ca un galben-verde strălucitor condensat. În celulele viabile, portocaliul de acridină provoacă fluorescență verde difuză.

Cu ajutorul studiilor imunohistochimice se determină prezența proteinelor care formează o cascadă de procese biochimice care duc la apoptoză. Adesea, acest grup de metode include TUNEL și ELISA.

Mulți cercetători atribuie un rol principal apoptozei în modificările structurale ale capului nervului optic (OND) cauzate de pierderea GCS. Rolul apoptozei în dezvoltarea bolilor degenerative este fără îndoială. Există material experimental convingător care indică participarea procesului apoptotic la mecanismul GON în POAG. Cu toate acestea, în general, cercetări clinice factori apoptotici la pacienţii cu diferite etape glaucomul este foarte limitat, ceea ce face dificilă studierea rolului lor în patogeneza GON.

Markova A.A. unuKashkina E.I. unu Rubtsov V.S. 1 Lyakisheva R.V. unu

1 Saratov State Medical University numită după V.I. IN SI. Razumovsky, Saratov

Expresia apoptozei și a markerilor de proliferare a fost analizată la 61 de pacienți cu colită ulceroasă în funcție de durata, severitatea bolii, localizare. proces inflamatorîn intestinul gros. Grupul de comparație a fost format din 15 persoane practic sănătoase. Examinarea pacienților a fost efectuată folosind metode clinice, de laborator, endoscopice, morfologice. În probele de biopsie ale mucoasei colonului, a fost determinată expresia markerilor imunohistochimici Ki-67, P53, BAX și CEA. Studiul a relevat o scădere semnificativă statistic a activității proliferative a mucoasei colonului la pacienții cu colită ulceroasă în comparație cu un grup de indivizi sănătoși, precum și o scădere a proceselor de proliferare și o creștere a expresiei markerilor de apoptoză ca durată și severitate. a manifestărilor clinice ale bolii cresc.

colita ulcerativa nespecifica

markeri ai apoptozei și proliferării

1. Aruin L.I., Kapuller L.L., Isakov V.A. Diagnosticul morfologic al bolilor stomacului și intestinelor. - M.: Triada-X, 1998. - 496 p.

2. Gastroenterologie și hepatologie: diagnostic și tratament: un ghid pentru medici / ed. A.V. Kalinina, A.F. Loginova, A.I. Khazanov. - Ed. a II-a, revizuită. si suplimentare – M.: MEDpress-inform, 2011. – 864 p.: ill.

3. Brown D. Gatter K. Anticorp monoclonal Ki-67: utilizarea sa în histopatologie // Histopatologie. - 1990. - Nr. 17. -

4. Bruno S., Darynkiewich Z. Expresia dependentă de ciclul celular și stabilitatea proteinei nucleare detectate de anticorpul Ki-67 în celulele HL-60, Cell. Profil. - 1992. - Nr. 25. -

5. O comparație a markerilor de proliferare (BrdUrd, Ki-67, PCNA) determinați la fiecare poziție a celulei în criptele mucoasei colonului uman normal / M. Bromley, D. Rew, A. Becciolini

et al. // EURO. J. Histochem. - 1996. - Vol. 40. – P. 89–100.

6. Holt P.R., Moss S.F., Kapetanakis A.M. Este Ki-67 un marker proliferativ mai bun în colon decât antigenul nuclear al celulelor proliferative? cancer. Epidimiol // Biomarkeri. Prev. - 1997. -

Nr. 6. - P. 131-135.

7. McCormick D., Chong C., Hobbs C. et al. Detectarea antigenului Ki-67 în secțiune fixă ​​și încorporată în ceară cu anticorpul monoclonal MIB-1 // Histopatologie. - 1993. -

Nr. 22. - P. 355-360.

8. Reed J. C. Bcl-2 și reglarea morții celulare programate // J. Cell. Biol. - 1994. - Vol. 124. – P. 1–6.

Colita ulcerativă nespecifică (CU) este una dintre cele mai multe boală gravă tractului gastrointestinal, ducând la dizabilități și decesul pacienților.

În ultimele decenii, s-a înregistrat o creștere a incidenței CU în diferite țări ale lumii, care se datorează în mare măsură îmbunătățirii diagnosticului acestui proces patologic.

În prezent, în diagnosticul CU, se utilizează o abordare integrată folosind metode de cercetare cu raze X, endoscopice și histologice. Una dintre metodele promițătoare de evaluare a stării mucoasei colonului este imunohistochimia cu determinarea markerilor de proliferare și apoptoză.

Dintre metodele de studii imunohistochimice, markerii de apoptoză bcl și p53 au găsit cea mai largă aplicație. Se știe că proteinele din familia bcl sunt fie inductori ai apoptozei (Bad, Bax, Bak, etc.) fie inhibitori ai apoptozei (Bcl-2, Bcl-XL, BOO, etc.). Trebuie remarcat faptul că proteina p53 este detectată în multe celule transformate. Funcțiile sale vizează prevenirea transferului informațiilor genetice deteriorate de la o generație de celule la alta, inclusiv prin inițierea apoptozei. Conținut ridicat p53 duce la o creștere a concentrației de Bax în celulă și la o scădere a concentrației de bcl-2, care contribuie la moartea celulei prin apoptoză.

Mai mulți antigeni sunt utilizați ca markeri de proliferare. Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) este implicat nu numai în proliferarea celulară, ci și în repararea ADN-ului după deteriorare, ceea ce face ca acest antigen să fie specific ciclului celular, deoarece repararea ADN-ului poate fi efectuată în faza de repaus. Un alt antigen asociat semnificativ cu faze ciclul celulei, este Ki-67. Expresia acestei proteine ​​are loc în timpul fazei presintetice, crește în timpul ciclului celular și scade brusc în timpul fazei mitotice. Această proteină, spre deosebire de PCNA, nu este implicată în repararea ADN-ului. Exprimarea Ki-67 face posibilă identificarea celulelor care se află în toate fazele ciclului celular, cu excepția fazei de repaus.

Scopul studiului a fost de a analiza expresia markerilor de apoptoză și proliferare la pacienții cu colită ulceroasă, în funcție de durata, severitatea bolii și de localizarea procesului inflamator.

Materiale și metode de cercetare

Grupul principal a fost format din 61 de pacienți cu CU cu vârsta cuprinsă între 19 și 66 de ani (27 femei și 34 bărbați), grupul de comparație a fost format din 15 persoane practic sănătoase. Examinarea pacienților a fost efectuată folosind metode clinice, de laborator, endoscopice, morfologice, precum și cu ajutorul studiilor imunohistochimice ale probelor de biopsie ale mucoasei colonului.

Pacienții cu CU au fost împărțiți în grupuri în funcție de severitatea manifestărilor clinice, de durata bolii și de localizarea procesului inflamator.

Activitatea proliferativă a celulelor a fost determinată de indicatorul proliferativ Ki-67 conform formulei:

Unde X este numărul de nuclee din câmpul vizual al microscopului. Numărarea a fost efectuată în cel puțin 10 câmpuri vizuale.

Apoptoza a fost judecată prin expresia proteinelor p53 și BAX în epiteliul superficial și glandular al intestinului gros. Pentru a evalua procesele regenerative în mucoasa colonului în UC, a fost determinată expresia antigenului embrionar al cancerului (CEA).

Rezultatele cercetării și discuții

Un studiu imunohistochimic a determinat dependența exprimării acestor markeri de durata CU, de severitatea manifestărilor sale clinice și de prevalența procesului inflamator în colon.

În timpul prelucrării statistice a datelor obținute după testarea pentru egalitatea varianțelor și normalitatea distribuției, s-a dovedit că eșantionul nu corespunde legii distribuției normale, prin urmare, au fost utilizate criterii neparametrice pentru a compara grupurile. S-au folosit quartilele mediană, superioară și inferioară pentru a descrie caracteristicile cantitative.

Astfel, la indivizii sănătoși, Ki-67 PI a fost de 54 (46; 67), ceea ce indică o activitate proliferativă ridicată a celulelor de colon (tabel).

Indicele de proliferare Ki-67 al celulelor epiteliale ale mucoasei colonului (%) la persoanele sănătoase și la pacienții cu colită ulceroasă, în funcție de durata, severitatea și localizarea acesteia

Note:

• R 0 - semnificația diferențelor cu grupul de control;
• R 1 - semnificația diferențelor cu durata bolii mai mică de 1 an;
• R 2 - fiabilitatea diferențelor cu o evoluție ușoară a bolii;
• R 3 - fiabilitatea diferențelor cu localizarea distală a bolii.

Expresia BAX la indivizii sănătoși a fost absentă în 80% din cazuri, iar expresia scăzută a markerului a fost observată în 20%. Expresia CEA a fost observată în 50% din cazuri și a fost, de asemenea, scăzută.

Toți pacienții, în funcție de durata bolii, au fost împărțiți în 3 grupe: primul cu CU cu o durată de până la 1 an, al doilea cu o durată de 1 până la 5 ani și al 3-lea - mai mult de 5 ani.

După cum rezultă din tabel, creșterea Ki-67 PI în grupul de pacienți cu o durată a bolii de 1 până la 5 ani, comparativ cu grupul 1 ( R≤ 0,02) poate fi explicată prin creșterea activității proliferative a celulelor, reflectând procesele reparatorii în mucoasa colonului. PI Ki-67 scăzut la lotul de pacienți cu colită ulceroasă care durează până la 1 an, în valoare de 31 (25; 36), poate indica o scădere pronunțată a proceselor proliferative în mucoasa intestinală la debutul bolii.

La studierea indicelui p53 în funcție de durata bolii, nu au fost relevate regularități în exprimarea acestei proteine, totuși, există o diferență în exprimarea acestui marker între un grup de indivizi sănătoși și un grup de pacienți cu o boală. durata de la 1 la 5 ani ( R≤ 0,05) și mai mult de 5 ani ( R ≤ 0,03).

Expresia BAX a fost determinată atât în ​​epiteliul superficial, cât și în cel glandular al colonului. S-a constatat că expresia acestui marker în epiteliul de suprafață și în epiteliul glandelor este aproape aceeași în fiecare caz individual. Expresia BAX la pacienții cu CU a fost detectată în 100% din cazuri, s-au găsit diferențe semnificative statistic în exprimarea markerului între grupul de comparație și pacienții cu CU ( R ≤ 0,01).

Când se compară intensitatea expresiei CEA, s-a observat o creștere semnificativă cu o creștere a duratei bolii. În lotul de comparație, expresia CEA s-a manifestat doar în cazuri izolate ( R ≤ 0,003).

În funcție de severitatea manifestărilor clinice ale CU, a fost detectată și o modificare a Ki-67 PI (vezi tabel). Ki-67 PI a scăzut la pacienții cu boală moderată ( R≤ 0,05) și formă severă ( R≤ 0,02) în comparație cu pacienții cu evoluție ușoară, a existat, de asemenea, o diferență între grupul de indivizi sănătoși și pacienții cu CU de orice severitate ( R ≤ 0,004).

Modificarea expresiei markerului p53 depindea de severitatea exacerbării (12,5% cu curs usor; 35,7% la grad mediu severitate și 50% pentru sever). S-au obținut diferențe semnificative statistic între grupurile de indivizi sănătoși și pacienți cu CU de forme moderate și severe ale bolii ( R ≤ 0,03).

BAX și CEA au fost exprimate în 100% din cazuri, cu toate acestea, nu a fost găsită nicio dependență a intensității expresiei acestor markeri de severitatea manifestărilor clinice ale CU. S-au stabilit diferențe în exprimarea markerilor între lotul de comparație și pacienții cu CU, indiferent de severitatea manifestărilor clinice (p≤0,01).

La analiza dependenței PI Ki-67 de localizarea procesului inflamator, a fost evidențiată o creștere semnificativă a expresiei markerului în grupul de pacienți cu CU în comparație cu oameni sanatosi (R≤ 0,002), totuși, într-o analiză comparativă în cadrul grupului principal, nu s-au obținut diferențe semnificative statistic între expresia markerului și localizarea diferită a procesului ( R ≥ 0,05).

Expresia p53 nu a fost detectată la toți pacienții. La pacienţii cu colită distală rezultat pozitiv a fost obținut doar în 20% din cazuri, cu partea stângă la 18% dintre pacienți. Cu leziuni intestinale totale, expresia p53 a fost detectată în 100% din cazuri ( R≤ 0,03 comparativ cu colita distală). Trebuie remarcat faptul că expresia a fost cea mai intensă în zonele cu semne de metaplazie epitelială.

Intensitatea exprimării BAX în grupul cu colită totală a fost semnificativ mai mare decât în ​​grupul cu colită distală ( R ≤ 0,03).

Expresia CEA nu a depins de localizarea procesului inflamator, cu toate acestea, a fost semnificativ mai mare la pacienții cu CU comparativ cu grupul de comparație ( R ≤ 0,03).

În colita ulcerativă nespecifică, activitatea proliferativă a celulelor epiteliale ale mucoasei colonului este semnificativ mai scăzută, iar ratele de apoptoză sunt mai mari decât în ​​absența modificărilor sale inflamatorii.

O creștere a duratei colitei ulcerative nespecifice este însoțită de o activitate proliferativă scăzută a epiteliului mucoasei colonului, care poate afecta repararea acestuia.

Odată cu creșterea severității manifestărilor clinice ale colitei ulcerative nespecifice, se observă nu numai o scădere a gradului de activitate proliferativă a celulelor epiteliale de colon, ci și o creștere a indicatorilor de activare a apoptozei.

Odată cu răspândirea procesului inflamator în părțile proximale ale colonului, a fost evidențiată o creștere a apoptozei.

Recenzători:

Shvarts Yu.G., doctor în științe medicale, profesor, șef. departament terapia facultatii SBEI HPE „Universitatea Medicală de Stat Saratov numită după V.I. Razumovsky” de la Ministerul Sănătății și Dezvoltării Sociale din Rusia, Saratov;

Fedorina T.A., doctor în științe medicale, profesor, șef. departamentul de generală și patologia clinică: anatomie patologică, fiziologie patologică SBEI HPE „Samara State Medical University” a Ministerului Sănătății și Dezvoltării Sociale din Rusia, Samara.

Lucrarea a fost primită de redactori în data de 09.12.2011.

Link bibliografic