C vitamininin kantitatif belirlenmesi. Vitaminlerin kantitatif tayini Raevsky'ye göre A vitamininin kantitatif tayini

kantitatifİncelenen malzemedeki askorbik asit testi genellikle alkali ortamda mavi ve asidik ortamda pembe olan bir sodyum 2,6-diklorfenolindofenol çözeltisi kullanılarak gerçekleştirilir. Reaksiyonun kimyası aşağıdaki denklemle ifade edilebilir.

Yöntemin prensibi askorbik asidin indofenol reaktifini indirgeme yeteneğine dayanmaktadır. Test materyalinin bir ekstraktı 2,6-diklorofenolindofenol çözeltisi ile titre edildiğinde, askorbik asit dehidroaskorbik asite oksitlenir ve indofenol reaktifi indirgenir. Titrasyonun sonu renk değişimiyle belirlenebilir. 2,6-diklorofenolindofenolün oksitlenmiş formu nötr ve alkali ortamlarda mavi renk alırken, indirgenmiş formu asidik ortamlarda pembe renk alır.

Askorbik asit, test malzemesinden %1'lik bir çözelti ile ekstrakte edilir hidroklorik asit ve indofenol reaktifinin bir çözeltisi ile titre edin. Titrasyon için harcanan boya miktarına göre askorbik asit içeriği hesaplanır.

Biyolojik nesnelerdeki askorbik asit içeriğinin doğru şekilde belirlenmesinin, diğer kolayca oksitlenen maddeler (glutatyon, sistein vb.) tarafından engellendiği unutulmamalıdır.

7.7.1. C B VİTAMİNİ İÇERİĞİNİN BELİRLENMESİ

BİTKİ MALZEMESİ

İncelenen malzemeden bir numune alın, 5-20 g (beklenen askorbik asit içeriğine bağlı olarak), küçük parçalar halinde kesin (patates, havuç, yabani sarımsak, elma vb.), bir havanda bir tutamla iyice öğütün cam veya kuvars kumu, homojen bir sıvı bulamaç elde edilene kadar% 2'lik metafosforik veya hidroklorik asit kütle fraksiyonuna sahip 4-5 ml'lik çözelti porsiyonları halinde eklenir. Harçtan elde edilen karışım, öğütmede kullanılan asitin bir çözeltisi kullanılarak niceliksel olarak 100 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarılır ve ekstraktın toplam hacmi aynı asit çözeltisiyle işarete kadar ayarlanır. İçerikler iyice karıştırılır, 5-7 dakika bekletilir ve kağıt filtreden süzülür. Ortaya çıkan filtrat tamamen şeffaf olmalıdır.

Ekstraksiyon için kullanılan asitler (hidroklorik, metafosforik, oksalik), incelenen materyalden hem serbest hem de bağlı askorbik asidi çıkarır ve ayrıca ekstraktlardaki askorbik asidin stabilitesine katkıda bulunur.

100-150 ml kapasiteli iki konik şişe alın ve bunlardan birine elde edilen filtrattan 20 ml, diğerine ise test materyalini öğütmek için kullanılan 20 ml asit çözeltisini pipetleyin. Konilerin içeriği, soluk pembe renk 30 saniye boyunca devam edene kadar bir indofenol reaktifi ile titre edilir. Sonuçlar kaydedilir ve titrasyon aynı filtratın yeni porsiyonları ile tekrarlanır. 2-3 tespitten elde edilen ortalama değere dayanarak askorbik asit içeriği aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanır:

,

(a-b)- deney (a) ve kontrol (b) numunelerinin titrasyonu için kullanılan indofenol reaktifinin hacimleri arasındaki fark, ml;

u ekstraktın toplam hacmidir, ml;

u 1 – titrasyon için alınan filtratın hacmi, ml;

m - incelenen malzemenin kütlesi, g,

100 – 100g malzeme başına dönüşüm.

Bitki dokuları ayrıca bazı miktarlarda 2,6-diklorofenolindofenol'ü indirgeyen diğer indirgeyici maddeleri de içerir; bu nedenle, özellikle hassas bir analiz gerekliyse, bu dikkate alınmalıdır. Bunu yapmak için, incelenen ekstraktın diğer iki 10-20 ml'lik kısmına 0,1 veya 0,2 ml %10'luk bakır sülfat çözeltisi ekleyin ve bunu bir termostat veya fırında 110 °C sıcaklıkta 10 dakika ısıtın. Soğutun ve indofenol reaktifi ile titre edin. Bakır tuzlarının varlığında ve ısıtıldığında askorbik asit tamamen yok edilir. Ortaya çıkan düzeltme, deneysel numunelerin titrasyon verilerinden çıkarılır.

Birçok meyve ve meyveyi analiz ederken, bazı sebzeler, renkli ekstraktlar elde edilir, bu da askorbik asitin belirlenmesini zorlaştırır. Askorbik asidi belirlemek için, renkli ekstraktı geniş bir test tüpüne aktarın, 2-5 ml dikloroetan veya kloroform ekleyin ve dikloroetan veya kloroform tabakasında kaybolmayan pembe bir renk görünene kadar bir indofenol reaktifi çözeltisiyle çalkalayarak titre edin. 30 saniye boyunca.

Belirlerken, ekstraksiyon için kullanılan asitlerin (20 ml %1 hidroklorik asit ve 80 ml %2 metafosforik veya %1 oksalik asitten oluşan bir karışım) indirgeme kabiliyetinin dikkate alınması gerekir. Bunu yapmak için, asit karışımının 10 ml'lik iki kısmı, pembeye dönene kadar bir indofenol reaktifi ile titre edilir. Ortaya çıkan düzeltme (genellikle 0,08-0,10 ml boya çözeltisini geçmeyecek şekilde), deneysel çözeltilerin titrasyon verilerinden çıkarılır.

SODYUM 2,6-DİKLOROPENOLİNDOFENOL (ASKORBİK ASİT)

1 ml indofenol reaktifine (sodyum 2,6-diklorofenolindofenol çözeltisi) karşılık gelen askorbik asit kütlesi (mg cinsinden) aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanır:

burada M, 1 ml indofenol reaktifine karşılık gelen, mg cinsinden askorbik asit kütlesidir;

(u-u 1) - numunenin askorbik asit (u) ile titrasyonu için kullanılan indofenol reaktifinin hacimleri ile askorbik asit içermeyen numune (u 1), ml arasındaki fark;

2 – deney numunesinde bulunan mg cinsinden askorbik asit kütlesi (ana deney).

7.7.3. SÜTTE C VİTAMİNİ İÇERİĞİNİN BELİRLENMESİ

Sütteki askorbik asidi belirlemek için proteinler çökeltilir.

Bir şişeye 50 ml süt dökün ve 4 ml doymuş oksalik asit çözeltisi ekleyin, çalkalayın, 10 ml doymuş sodyum klorür çözeltisi ekleyin, çalkalayın ve oda sıcaklığında 5 dakika bekletin. Daha sonra şişenin içeriği katlanmış bir kağıt filtreden süzülür, 20 ml süzüntü pipetlenir ve 30 saniye boyunca soluk pembe bir renk kalana kadar bir indofenol reaktifi ile titre edilir. 20 ml daha süzüntü alın ve titrasyonu tekrarlayın. Ortalama sonuç hesaplama için kullanılır.

Aynı zamanda, bir şişede 50 ml su, 4 ml doymuş oksalik asit çözeltisi ve 10 ml doymuş sodyum klorür çözeltisinin karıştırıldığı bir kontrol tespiti gerçekleştirilir. Daha sonra ana deneydeki gibi ilerleyin.

,

Nerede (a-b)– deney ve kontrol numunelerinin titrasyonu için kullanılan indofenol reaktifinin hacimleri arasındaki fark, ml;

64 – protein ve yağ çökelticileri eklendikten sonra sütün toplam hacmi;

M – 1 ml indofenol reaktifine karşılık gelen askorbik asit kütlesi (bkz. paragraf 7.7.2.), mg;

u titrasyon için alınan süzüntünün hacmidir, ml;

u 1 - analiz için alınan sütün hacmi, ml.

REAKTİFLER. Arıtılmış su; taze süt; patates (limon, havuç, elma, lahana, yabani sarımsak vb.); % 2'lik metafosforik veya hidroklorik asit kütle fraksiyonuna sahip çözelti; doymuş oksalik asit çözeltisi; doymuş sodyum klorür çözeltisi; taze hazırlanmış standart askorbik asit çözeltisi (100 ml'lik bir hacimsel şişeye 100 mg tıbbi sınıf askorbik asit eklenir ve çözülerek hacim,% 2'lik metafosforik veya hidroklorik asit kütle fraksiyonuna sahip bir çözelti ile işarete ayarlanır; indofenol reaktifi (500 ml'lik balon jojeye 140-150 mg sodyum 2,6-diklorofenolindofenol ve 200-300 ml su eklenir, boya eriyene kadar kuvvetlice çalkalanır, hacmi su ile işarete kadar ayarlanır, karıştırılır ve bir filtreden süzülür) kağıt filtreyi kuru, koyu renkli bir cam şişeye koyun; çözeltiyi buzdolabında en fazla üç gün saklayın).

Deneyim 1.C vitamininin kantitatif belirlenmesi.

Yöntemin ilkesi. Yöntem, C vitamininin asidik ortamda kırmızı bir renge sahip olan ve indirgendiğinde rengi bozulan 2,6-diklorofenolindofenol'ü indirgeme yeteneğine dayanmaktadır; alkali ortamda renk mavidir. C vitamininin tahribattan korunması için test çözeltisi, asidik bir ortamda alkalin bir 2,6-diklorofenolindofenol çözeltisi ile pembe bir renk görünene kadar titre edilir.

Lahana, patates, çam iğneleri, kuşburnu vb. ürünlerdeki askorbik asit içeriğini hesaplamak için aşağıdaki formülü kullanın:

Nerede X- 100 g ürün başına miligram cinsinden askorbik asit içeriği; 0,088 – askorbik asit içeriği, mg; A– 0,001 N 2,6-diklorofenolindofenol çözeltisi ile titrasyon sonucu, ml; B - titrasyon için alınan ekstraktın hacmi, ml; İÇİNDE - analiz için alınan ürün miktarı, g; G– toplam ekstrakt miktarı, ml; 100 – 100 g ürün başına dönüşüm.

Sonuç: deneyin sonuçlarını ve hesaplanan verileri yazın.

Deney 1.1. Lahanada C vitamini içeriğinin belirlenmesi.

İşin sırası.

1 g lahanayı tartın, 2 ml% 10'luk hidroklorik asit çözeltisi (HCl - Hidroklorik asit, hidroklorik asit, hidroklorik asit) ile bir havanda öğütün, 8 ml su ekleyin ve süzün. Titrasyon için 2 ml filtratı ölçün, 10 damla %10 hidroklorik asit çözeltisi ekleyin ve buna dayanarak, pembe renk 30 saniye boyunca devam edene kadar 2,6-diklorofenolindofenol ile titre edin. yöntemin prensibi reaksiyonlar. Yukarıdaki formülü kullanarak 100 g lahanadaki askorbik asit içeriğini hesaplayın. 100 gr lahana 25-60 mg askorbik asit, 100 gr kuşburnu 500-1500 mg ve çam iğnesi 200-400 mg içerir.

Deney 1.2. Patateslerde C vitamini içeriğinin belirlenmesi.

İşin sırası.

5 gr patatesi tartın, 20 damla% 10'luk hidroklorik asit solüsyonu içeren bir havanda öğütün (böylece patatesler kararmaz). Yavaş yavaş damıtılmış su ekleyin - 15 ml. Elde edilen kütle bir bardağa dökülür, harç suyla durulanır, bir cam çubuk üzerinden bir bardağa dökülür ve 0,001 N ile titre edilir. Buna göre 2,6-diklorofenolindofenolün pembe renge dönüştürülen çözeltisi yöntemin prensibi reaksiyonlar. 100 gr patateste 1-5 mg C vitamini bulunur.

Sonuç: deneyin sonuçlarını yazın.

Deney 1.3. İdrarda C vitamini içeriğinin belirlenmesi.

İdrardaki C vitamini içeriğinin belirlenmesi, bu vitaminin vücuttaki rezervleri hakkında fikir verir, çünkü kandaki C vitamini konsantrasyonu ile idrarla atılan bu vitamin miktarı arasında bir yazışma vardır. Bununla birlikte, hipovitaminoz C ile idrardaki askorbik asit içeriği her zaman azalmaz. Bu vitaminin doku ve organlardaki büyük eksikliğine rağmen genellikle normaldir.

Sağlıklı insanlarda 100 mg C vitamininin ağızdan alınması, kan ve idrardaki konsantrasyonunun hızla artmasına neden olur. Hipovitaminoz C'de, C vitamini içermeyen dokular, alınan C vitaminini korur ve idrardaki konsantrasyonu artmaz. Sağlıklı bir kişinin idrarı 20-30 mg C vitamini veya 113,55-170,33 µmol/gün içerir. Çocuklarda bu vitaminin seviyesi iskorbüt hastalığının yanı sıra akut ve kronik bulaşıcı hastalıklarda da azalır.

Makale, bitkilerde filokinonun (K1 vitamini) kantitatif tayini için yöntem seçimi ve bir tekniğin geliştirilmesine ilişkin deneysel çalışmaların sonuçlarını sunmaktadır. Bitki biyolojik olarak aktif maddelerin bileşimindeki filokinonun belirlenmesinde kromatografik yöntemin (ters fazlı HPLC) spektrofotometrik yönteme göre avantajı kanıtlanmıştır. Kayıt İçin Teknik Gerekliliklerin Uyumlaştırılmasına İlişkin Uluslararası Konferansın tavsiyeleri uyarınca ilaçlar insanlarda kullanım için (İnsan Kullanımına Yönelik İlaçların Kaydına İlişkin Teknik Gerekliliklerin Uluslararası Konferans Uyumlaştırılması), geliştirilen yöntem özgüllük, doğrusallık, tekrarlanabilirlik ve doğruluk açısından doğrulanmıştır. Önerilen yöntemin spesifik, doğrusal, tekrarlanabilir ve doğru olduğu bulunmuştur. K1 vitamini içeren farmakope hammaddeleri örneğini kullanarak, yöntemin bitki nesnelerinin analizinde uygulanmasının evrenselliği kanıtlanmıştır.

filokinon

K1 vitamini

ısırgan otu yaprakları

kartopu kabuğu

stigmalı mısır sütunları

çoban çantası otu

doğrulama

1. Abyshev A.Z. Sentez, özellikler ve kalite kontrol vitamin preparatları ve vitamin benzeri maddeler: eğitim kılavuzu / A.Z. Abyshev, S.N. Trusov, N.I. Kotova, M.P. Blinova. – St.Petersburg. : Yayınevi SPFKhA, 2010. – 136 s.

2. GOST R ISO 5725-2002 “Ölçüm yöntemlerinin ve sonuçlarının doğruluğu (doğruluğu ve kesinliği)” 6 saatte – Giriş. 04/23/02. – M.: Rusya'nın Gosstandart'ı; Standartlar Yayınevi, 2002.

3. SSCB Devlet Farmakopesi. Cilt 2 Genel analiz yöntemleri. Tıbbi bitki hammaddeleri / SSCB Sağlık Bakanlığı. – 11. baskı, ekleyin. – M., 1989. – 400 s.

4. Çeşitli nüfus grupları için enerji ve besin maddelerine yönelik fizyolojik ihtiyaç normları Rusya Federasyonu. Yönergeler MP 2.3.1.2432 -08

5. Nosov A. M. Şifalı bitkiler. – M.: EKSMO-Basın, 1999. – 350 s.

6. Pogodin I.S., Luksha E.A. Saussurea acı otunda seskiterpen laktonların kantitatif tayini için bir yöntemin geliştirilmesi // Modern bilim ve eğitim sorunları. – 2013. – No.1; URL: www.site/107-8426

giriiş

K vitamini, hemostatik sistemi etkileyen yağda çözünen vitaminler sınıfına aittir. K grubunun doğal vitaminleri, yan zincirleri izoprenoid birimlerle temsil edilen iki tip metillenmiş kinoid bileşiğini içerir: K1 ve K2 vitaminleri. Bu vitaminlerin yapısı 1,4-naftokinon sistemine dayanmaktadır. K1 Vitamini (filokinon) tüm fotosentetik organizmalar tarafından sentezlenir. K2 Vitamini (menakinon) kalın bağırsağın mikroflorası tarafından sentezlenir. K vitaminlerinin biyolojik rolü, memelilerin pıhtılaşma ve antikoagülan sistemlerinin faktörlerini aktive etmektir.

Şu anda tanımlanmış fizyolojik ihtiyaç Yetişkinler için K vitamini - 120 mcg/gün ve çocuklar için - 30 ila 75 mcg/gün.

İÇİNDE tıbbi uygulama ilaçlar bitki kökeni Filokinon içerenler düzeltme amacıyla kullanılır kanama komplikasyonları. 11. baskı Devlet Farmakopesi, hemostatik K vitaminine bağlı etkiye sahip aşağıdaki tıbbi bitki hammadde türlerini içerir: kartopu kabuğu (Cortex Viburni), mısır ipekli sütunlar (Styli cum stigmatis Zeae maydis), ısırgan otu yaprakları (Folia Urticae) ), çoban kese otu (Herba Bursae pastoris). Civanperçemi, nane, knotweed ve knotweed bitkilerinde de K1 vitamininin bulunduğu, bu hammaddelerin mide, rahim ve hemoroidal kanama için kullanılma olasılığını belirlediği tespit edilmiştir. Devlet Farmakopesi şu anda bitki materyallerinde filokinonun belirlenmesine yönelik yöntemlere sahip değildir. Tıbbi bitki materyallerinin K1 vitamini kaynağı olarak kullanılmasının fizibilitesini değerlendirmek, gerçek sorun bitki nesnelerindeki filokinon içeriğini belirlemeyi amaçlayan yöntemlerin standardizasyonu ve geliştirilmesi sorunlarını çözmektir.

İşin amacı: Tıbbi bitki materyallerinde K1 vitamininin belirlenmesine yönelik bir yöntemin geliştirilmesi.

Malzemeler ve araştırma yöntemleri

Araştırmanın nesneleri resmi şifalı bitki hammadde türleriydi: kartopu kabuğu, mısır ipekli sütunlar, ısırgan otu yaprakları, çoban otu. Her türlü hammadde eczane zincirleri aracılığıyla satın alındı. K1 vitaminini belirlemek için rasyonel bir yöntemin seçimi, kromatografik ve spektrofotometrik analiz yöntemleri kullanılarak elde edilen doğrulama özelliklerinin değerlendirilmesine dayanıyordu. Bitkisel hammaddelerde filokinonun kantitatif belirlenmesine yönelik bir yöntem geliştirmek için ters fazlı yüksek performanslı kromatografi yöntemi kullanıldı. yüksek basınç(HPLC), aşağıdaki koşullar altında izokratik modda bir Shimadzu LC-20 Prominence cihazında bir diyot dizisi detektörüyle: PerfectSil 300 ODS C18 sorbent, 4,6x250 mm, 5 μm parçacık boyutuyla doldurulmuş analitik sütun; mobil faz bileşimi: 75:20:5 oranında asetonitril-izopropanol-su; 254 nm dalga boyunda tespit; sütun sıcaklığı - oda sıcaklığı; mobil faz hızı 1 ml/dak; Enjekte edilen numunenin hacmi 20 µl'dir. Sonuçlar, tr PSO göstergesine (20.00 ± 1.00 dk.) denk gelen filokinonun alıkonma süresi (tr) ve filokinonun pik alanı ile değerlendirildi. Sonuçlar LC Solutions yazılımı kullanılarak işlendi.

K1 vitamini içeriğinin spektrofotometrik tespiti, UNICO 2802S cihazında, 1 cm katman kalınlığına sahip bir kuvars küvette gerçekleştirildi.

Sonuçlar STATISTICA 8.0 programı kullanılarak işlendi. Elde edilen sonuçları açıklamak için, dağılımın normalliği kontrol edildikten sonra ortalama (X avg), standart sapma (S), bağıl standart sapma (RSD), dağılım (S 2), ortalamanın güven aralığı değerleri (Δx ort) α = 0 .05 anlamlılık düzeyinde verilmiştir.

Isırgan otu yapraklarının heksan ekstraktından hazırlayıcı kolon kromatografisi ile izole edilen K1 vitamininin çalışma standardı numunesi (RSS), standart numune olarak kullanıldı. Çalışma standardı numunesi sarı, viskoz, kurumayan yağlı bir sıvıdır, suda pratik olarak çözünmez, organik çözücüler ve bitkisel yağlarda çözünür, erime noktası -20°С'dir. Çalışma standardı numunesinin alkol çözeltisinin (heksanın çıkarılmasından sonra) spektral özellikleri, Şekil 2'de sunulmaktadır. 1.

Pirinç. 1. RSO filokinon (K1 vitamini) çözeltisinin UV-görünür spektrumu

Çalışılan örneklerden K1 vitamini ekstraksiyonunu en üst düzeye çıkarmak için aşağıdaki örnek hazırlama parametreleri seçildi: hammaddelerin öğütülme derecesi, ekstraktör tipi, hammadde ve ekstraktantın kantitatif oranları, ekstraksiyon zamanı ve sıklığı, sıcaklık ve ışık koşulları. çıkarma.

Sonuçlar ve tartışma. K 1 vitamini içeriğini belirlemek için rasyonel bir yöntem geliştirmek amacıyla, hammaddelerden ekstraksiyonu için koşullar seçildi. Isırgan otu yaprakları metodolojinin geliştirilmesinde amaç olarak kullanıldı. Filokinonun ışık enerjisinin etkilerine karşı kararsızlığı dikkate alınarak çalışmanın tüm aşamaları, ekstraktların ışıktan korunmasını da içeren koşullar altında gerçekleştirildi. Ekstraksiyonun tamlığı HPLC ile tr 20.00±2.00 dakika olan pik alanıyla belirlendi. Numune hazırlama faktörlerinin filokinon ekstraksiyonunun tamamlanması üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi sonucunda, aşağıdaki parametreler ve koşullar seçilmiştir: ham maddenin öğütülmesi - delik çapı 0,5 mm olan bir elekten geçen parçacıklar; özütleyici - heksan; niceliksel oran “hammadde:ekstrakt” - 1:25; 60 dakika boyunca tek maruz kalma; sıcaklık rejimi - oda sıcaklığı (20-22ºС).

Spektrofotometrik yöntemi kullanarak bitkilerde K1 vitaminini belirlemek için bir yöntem geliştirmek için, farmakope hammaddelerinden (Şekil 2) ve bir RSO filokinon çözeltisinden (Şekil 1) elde edilen ekstraktların absorpsiyon spektrumlarının karşılaştırmalı bir analizi daha önce gerçekleştirilmiştir. Sonuç olarak, çalışılan tüm nesnelerin spektrumunda bu maksimumun bulunmamasından dolayı, referans maksimum (249 nm) kullanılarak hammaddelerde K1 vitamininin varlığını kanıtlamanın mümkün olmadığı bulunmuştur. Sonuç olarak, bitkisel hammaddelerin biyolojik olarak aktif maddelerinin toplam kompleksinde K1 vitaminini doğrudan spektrofotometrik yöntemle belirleme yöntemi, başlangıçta "özgüllük" açısından olumlu bir şekilde doğrulanamaz. Ham maddeden saflaştırılmış filokinon çıkarılırsa, spektrofotometri kullanırken yöntemin özgüllüğünü arttırmak mümkündür; bu, araştırma nesnesinin numunesinin hazırlanması aşamasında ek hazırlık manipülasyonlarının yapılmasını gerektirir. Ekstraksiyonun ilave saflaştırılması, nihai sonuçta tekniğin hızını ve doğruluğunu olumsuz etkileyebilir.

Şekil 2 - Filokinon içeren şifalı bitki materyallerinden elde edilen ekstraktların absorpsiyon spektrumları (Kr - ısırgan otu yaprakları, K - kartopu kabuğu, Ku - mısır ipeği içeren sütunlar, P - çoban çantası otu)

Bitki materyallerinde K1 vitaminini belirlemek için en kabul edilebilir seçenek, bir diyot dizisi detektörü ile ters fazlı yüksek performanslı yüksek basınçlı kromatografi (HPLC) yönteminin kullanılmasıdır. Hammaddelerin analiz için numune hazırlanmasına yönelik geliştirilen parametrelere dayanarak, aşağıdaki teknik geliştirilmiştir: Hammaddelerin analitik numunesi, çapı 0,5 mm olan bir elekten geçen bir parçacık boyutuna kadar ezilir. Yaklaşık 1,0 g (tam olarak tartılmış) kırılmış hammadde, 50 ml kapasiteli konik bir şişeye konulur, 25 ml heksanla doldurulur, kapağı kapatılır ve 60 dakika boyunca mekanik bir çalkalayıcıda karıştırılır. Ekstrakt bir kağıt filtreden geçirilerek yuvarlak dipli bir şişeye süzülür ve heksan, döner bir buharlaştırıcıda damıtılarak çıkarılır. Kalıntı, 4 ml etanol kullanılarak 5 ml'lik balon jojeye (piknometre) kantitatif olarak aktarılır. Çözelti hacmini aynı çözücüyle işarete getirin ve karıştırın. Kromatografa 0,02 ml çözelti eklenir.

Standart bir numunenin hazırlanması: 0,0005 g (tam olarak tartılmış) RSO filokinona 4 ml etanol ekleyin ve 5 ml'lik ölçülü bir şişeye aktarın. Solüsyonun hacmini solvent ile işarete getirin ve karıştırın. Kromatografa 0,02 ml çözelti eklenir.

Kesinlikle kuru hammaddelerdeki filokinon (X) içeriği yüzde olarak aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanır:

burada So, RSO filokinon çözeltisinin kromatogramındaki tepe alanıdır; S, test çözeltisinin kromatogramındaki filokinon zirvesinin alanıdır; m o - RSO filokinonun tartılmış kısmı, g cinsinden; m - ham maddelerin ağırlığı, g cinsinden; W - hammaddelerin kurutulması sırasında ağırlık kaybı,% olarak; P, % olarak RSO filokinon içindeki filokinon içeriğidir.

Filokinonun ters fazlı HPLC ile kantitatif tayininin sonuçlarına dayanarak, ısırgan otu yapraklarındaki K1 vitamini içeriği belirlendi (Tablo 1).

Tablo 1 - Isırgan otu yapraklarında filokinonun kantitatif tayini için yöntemin metrolojik özellikleri (%) (n=6)

Hammaddelerdeki K1 vitamini içeriğinin düşük olması nedeniyle hesaplamaların %mg cinsinden yapılmasını öneririz; bunun için hesaplama formülünde ölçü birimlerini (g'den mg'a) dönüştürmek için değişiklik yapılması gerekir:

Yöntemin doğrulama değerlendirmesi şu göstergelere göre gerçekleştirildi: özgüllük, doğrusallık, kesinlik (tekrarlanabilirlik) ve doğruluk.

Özgünlük. Filokinonun tanımlanması, analiz edilen bileşenin ham maddede tutulma süresi ile filokinonun RSD'sinin çakışması ile doğrulandı (Şekil 3). Bitki materyallerinin ekstraktlarında yer alan ilişkili bileşiklerin pikleri, filokinonun piki ile iyi bir şekilde ayrılmıştır ve analitik belirlemeyi etkilemez.

Pirinç. 3. Isırgan otu yaprağı ekstraktının kromatogramı (A - tepe 17,tr =20,37 dakika, filokinona karşılık gelir) ve filokinonun çalışma standardı numunesi (B - tepe 22,tr =20,71 dakika)

Yöntemin doğrusallığı ve analitik aralığı, %100 olarak alınan konsantrasyonun %13 ila %417'si (0,12 mg/ml) arasında değişen farklı konsantrasyonlardaki 7 numunenin analiz edilmesiyle doğrulandı. Test çözeltilerindeki filokinon içeriği (mg/ml) ile kromatografik pik alanları arasındaki ilişkinin karşılaştırılması, bunun doğrusal olduğunu ve y = 5104417,9 x + 10944,88 denklemiyle tanımlandığını gösterdi. Korelasyon katsayısı (rxy) 0,999'dur; bu, 0,016 ila 0,5 mg/ml konsantrasyon aralığında bitki nesnelerinde filokinonun kantitatif tespiti için bu tekniğin kullanılmasına olanak tanır.

Tekrarlanabilirlik (hassasiyet), farklı (iki) analist tarafından aynı hammadde partisi üzerinde analiz yapılarak belirlendi. farklı zaman. Her analist için tekrar sayısı 3, toplam tekrar sayısı 6'dır. Yüzde (RSD, %) olarak ifade edilen bağıl standart sapma %5'i geçmemelidir. Çalışmaların sonuçlarına göre RSD %1,21 idi ve bu, seçilen koşullar altında analizin güvenilirliğini karakterize ediyor (Tablo 2).

Tablo 2 - Yöntemin kesinliğini belirleme sonuçları

Tekniğin doğruluğunu belirlemek için, bir ham madde partisinden alınan ısırgan otu yaprakları numuneleri, her seviye için üç kez numune alınarak 3 seviyedeki numunelerde (0,5, 1,0 ve 1,5 g) analiz edildi. Bir hammadde örneğinde K1 vitamini içeriği mg cinsinden belirlendi. Beklenen (teorik) değer, ısırgan otu yapraklarında %4,1 mg'a eşit olarak belirlenen ortalama K1 vitamini içeriğine dayanarak ön olarak hesaplandı. Teorik değer gerçek değerle karşılaştırıldı. Elde edilen sonuçları değerlendirmek için kabul kriteri hesaplanan değerin %98-102 aralığında kabul edilen “açık oran” (R) göstergesini kullandık.

Tablo 3 - Tekniğin doğruluğunu belirleme sonuçları

Tablo 3'te sunulan tekniğin doğruluğunu belirleme sonuçları, açık oran R'nin %98,73 olduğunu, bağıl standart sapmanın (RSD) %5'i aşmadığını gösterdi; bu da tekniğin doğruluğunu tatmin edici olarak nitelendiriyor.

Böylece ısırgan otu yapraklarında HPLC ile K1 vitamininin kantitatif tespiti için önerilen yöntemin spesifik, tekrarlanabilir ve doğru olduğu tespit edilmiştir. Bu teknik, diğer tıbbi bitki materyali türlerinde K1 vitamininin belirlenmesi için yeniden üretildi (Tablo 4).

Tablo 4 - Tıbbi bitki materyallerindeki K1 vitamini içeriği (%mg)

Yapılan çalışmalar bitki materyallerinde filokinon tayini için ters fazlı HPLC yönteminin kullanılmasının uygulanabilirliğini göstermiştir. HPLC yönteminin avantajı, bir hammadde numunesindeki filokinonun niteliksel ve niceliksel içeriğini değerlendirme yeteneğidir; bu, analiz için harcanan zamandan önemli ölçüde tasarruf sağlar. Geliştirilen yöntem, bitki nesnelerindeki K1 vitamini içeriğini belirlemek için kullanılabilir.

İnceleyenler:

Grishin A.V. Farmasötik Bilimler Doktoru, Profesör, Baş. Eczacılık Bölümü, Yüksek Mesleki Eğitim Devlet Bütçe Eğitim Kurumu Omsk Rusya Sağlık Bakanlığı Devlet Tıp Akademisi, Omsk.

Penevskaya N.A. Tıp Bilimleri Doktoru, Doçent, Baş. Biyoteknoloji kursu ile Farmasötik Teknoloji Bölümü, Devlet Bütçesi Yüksek Mesleki Eğitim Eğitim Kurumu Omsk Rusya Sağlık Bakanlığı Devlet Tıp Akademisi, Omsk.

Bibliyografik bağlantı

Biyokimyasal vitamin kaynağı göstergesi– bir vitaminin veya metabolitinin (koenzim formu) konsantrasyonu biyolojik sıvılar, idrarla atılım miktarı, vitamine bağlı enzimlerin aktivitesi vb.

Yeterli provizyon kriteri vitamin (normalin alt sınırı) – vücudun vitamin arzının değerlendirildiği her göstergenin belirli bir değeri.

Vitaminlerin kantitatif tayini için aşağıdaki yöntemler kullanılır:

1. Vitaminlerin içeriğini kimyasal maddeler (ng, mcg, mg) olarak belirlemek için fiziko-kimyasal yöntemler.

2. Mikrobiyolojik yöntemler - Bir vitaminin varlığında mikroorganizmaların büyüme hızı, miktarını değerlendirmek için kullanılır.

3. Biyolojik yöntemler - minimum yiyecek miktarını belirleyin veya tıbbi ürün, bir hayvanı (çalışılan vitaminden yoksun bir diyetle beslenen) hastalıktan koruyabilen. Bu miktardaki yiyecek veya vitamin preparatı, vitamin ünitesi olarak alınır.

Zenginleştirmenin etkinliği, vitamin alımından önce ve sonra vitamin tedarik göstergelerinin belirlenmesiyle değerlendirilir.

Yağda çözünen vitaminler

Yağda çözünen vitaminler arasında A, D, E ve K vitaminleri bulunur.

A Vitamini (retinol, antikseroftalmik)

1. Yapı. A vitamini poliizoprenoid kapsamak sikloheksenil halkası. A vitamini grubu şunları içerir: retinol, retina Ve retinoik asit. Yalnızca retinol, A vitamininin tam işlevine sahiptir. "Retinoidler" terimi, retinolün doğal ve sentetik formlarını içerir. Bitki öncüsü β-karoten, A vitamininin 1/6 aktivitesine sahiptir.

2. Taşıma ve metabolizma. Retinol esterleri gıda yağlarında çözünür, safra asitleri tarafından emülsifiye edilir ve bağırsak epitelyumu tarafından emilir. emdi b-karoten ikiye ayrılır iki retina molekülü. Epitel hücrelerinde retinal retinole indirgenir ve retinalin küçük bir kısmı retinoik asite oksitlenir. Çoğu Retinol doymuş yağ asitleri tarafından esterleştirilir ve şilomikronların bir parçası olarak lenf yoluyla kana girer. Lipolitik dönüşümden sonra şilomikron kalıntıları karaciğer tarafından alınır. A vitamini karaciğerde esterler halinde depolanır. Periferik dokulara taşınmak için retinol esterleri hidrolize edilir ve serbest retinol kan serumuna bağlanır. plazma retinol bağlayıcı protein(PRSP). Retinoik asit taşınır albüminler. Periferik hücrelerde, retinol aşağıdakilere bağlanır: hücresel retinol bağlayıcı protein(KRSP). A vitamininin toksik etkisi, vitaminin serbest formu ortaya çıktığında ortaya çıkar; CRSP'nin kapasitesi tükendikten sonra. Retinol ve retinal, NADP'ye bağımlı dehidrojenazlar veya redüktazlar kullanılarak birbirine dönüştürülür. Retinoik asit, retinole veya retinale dönüştürülemez, bu nedenle retinoik asit, doku büyümesini ve farklılaşmasını destekleyebilir, ancak görmede retinal veya üreme organı fonksiyonunda retinolün yerini alamaz.

3. Biyolojik rol.

3.1. Retinol gibi davranıyor hormonlar, hücreye nüfuz ederek nükleer proteinlere bağlanır ve belirli genlerin ifadesini düzenler. Retinol normal üreme fonksiyonu için gereklidir.

3.2. retina katılır görme eylemi. 11-cis-retinal, opsin proteinine bağlanır ve rodopsini oluşturur. Işıkta rodopsin ayrışır ve cis-retinal, trans-retinale dönüşür. Reaksiyona çubuk membranlarındaki konformasyonel değişiklikler ve kalsiyum kanallarının açılması eşlik eder. Kalsiyum iyonlarının hızlı girişi, görsel analiz cihazına iletilen bir sinir impulsunu başlatır. Tekrarlanan algılama için (yani karanlıkta), trans-retinal, alkol dehidrojenaz tarafından trans-retinole indirgenir (burada A vitamini kaybı mümkündür). Trans-retinol, cis-retinole izomerleşir (burada A vitamini kaybını yenilemek mümkündür). Cis-retinol, opsin ile birleşerek rodopsini oluşturan cis-retinal'e oksitlenir. Işık algılama sistemi bir sonraki ışık kuantumunu algılamaya hazırdır.

3.3. Retinoik asit katılır glikoprotein sentezi, geliştirir yükseklik Ve doku farklılaşması.

3.4. Retinoidler sahip olmak antitümör aktivite ve zayıflatmak aksiyon kanserojenler.

3.5. b-karoten – antioksidan ve dokulardaki peroksit serbest radikallerini (ROO) nötralize etme yeteneğine sahiptir. Düşük kısmi oksijen basıncı.

4. Kaynaklar. A vitamini yalnızca hayvansal kökenli ürünlerde bulunur (karaciğer, böbrekler, tereyağı, balık yağı). A2 vitamini, 3-4 pozisyonunda başka bir çift bağın varlığıyla ayırt edilen ve 3-dehidroretinol adı verilen tatlı su balıklarının karaciğerinden izole edildi. A2 vitamininin memeliler için biyolojik aktivitesi, A1 vitamini aktivitesinin yaklaşık %40'ına karşılık gelir. Bitkiler, A vitaminine (havuç, domates) dönüştürülebilen a-, b- ve g-karoten pigmentlerini içerir.

5. Günlük gereksinim . 1-2,5 mg A vitamini (5000-7000 IU). 1 IU = 0,344 mcg retinol asetat. A vitamini ihtiyacı karoten (2-5 mg) ile kısmen karşılanabilir, 1 mg karoten = 0,67 mg retinol.

6. Hipovitaminoz. Düşük ışıkta bulanık görme olarak kendini gösterir - gece körlüğü – hemeralopi. Bu en çok erken işaret A vitamini eksikliği: Bir kişi gün ışığında normal görür ve zayıf ışık koşullarında nesneleri çok zayıf bir şekilde ayırt eder.(alacakaranlıkta). Vitamin eksikliği, vücut ağırlığında azalma, büyümenin durması, epitelyumun çoğalması ve keratinizasyonu, kuru cilt ve mukoza zarları, epitelyumun soyulması ve üreme fonksiyonunun bozulması ile karakterizedir. Gözün kornea tabakasının kuruluğuna denir kseroftalmi(bu nedenle vitaminin adı antikseroftalmiktir). İdrar yolu ve bağırsak epitelinin hasar görmesi gelişmesine yol açar inflamatuar hastalıklar. A vitamini eksikliğinin en önemli nedeni lipidlerin emilim ve taşınmasının bozulmasıdır. Takıldığında yüksek dozlar A vitamini eksikliğinde hipervitaminoz A gelişir.

D Vitamini (kalsiferol, antiraşitik)

1. Yapı. Bitkisel gıdalar, ultraviyole ışınlarına maruz kaldığında D2 vitaminine dönüşen ergosterol içerir. (ergokalsiferol). Hayvan dokularında dağıtılır 7-dehidrokolesterol ciltte ultraviyole ışınlarıyla ışınlandığında D3 vitaminine dönüştürülür ( kolekalsiferol) (Şekil 27.1).

2. Metabolizma. Besinlerdeki D vitamini misellerde emilir. Kanda spesifik bir taşıma globulini ile bağlantılı olarak taşınır. Hepatositlerde hidroksillenir 25-hidroksikolekalsiferol (25-OH- D 3) . Bu, D vitamininin karaciğerdeki ve kanda taşınan ana rezerv formudur.25-OH-D3'ün bir kısmı enterohepatik dolaşımda (safra asitleri olarak) yer alır. Bozulursa D vitamini eksikliği oluşabilir.Böbreklerde, plasentada ve kemiklerde 25-OH-D3 1. pozisyonda hidroksillenerek oluşturulabilir. 1,25-dihidroksikolekalsiferol veya kalsitriol. Kalsitriol üretimi kendi konsantrasyonu, paratiroid hormonu ve serum fosfatları tarafından düzenlenir.

3. Biyolojik rol. Kalsitriol nüfuz eden hormonlar gibi işlev görür. Kalsitriol – Enterosit zarı boyunca kalsiyum hareketinin tek düzenleyicisi konsantrasyon gradyanına karşı. Kalsitriol, enterositlerdeki kalsiyum bağlayıcı proteinin biyosentezini uyarır, bu da kalsiyum ve fosfatların emilmesini sağlar. ince bağırsak. D3 Vitamini böbrek tübüllerindeki fosfatların yeniden emilimini arttırır, bu da plazma ve hücre dışı sıvılarda normal Ca2+ ve HPO43- oranının korunmasına yardımcı olur. Bu genç büyüyen kalsifikasyon için gereklidir kemik dokusu.

Pirinç. 10.1. D vitamini ve aktif formu kalsitriolün oluşum şeması.

İmzalar: 7-Dehidrokolesterol; Ultraviyole ışınlar; Provitamin D3; D3 Vitamini (Kolekalsiferol); Kalsitriol (1,25-dihidroksikolekalsiferol)

4. Kaynaklar: balık yağı, balık ve hayvan karaciğeri, tereyağı, yumurta sarısı, süt.

5. Günlük gereksinim. D vitamini ihtiyacı vücudun yaşına ve durumuna göre değişmekte olup günlük 12-25 mcg (500-1000 IU) (1 mcg = 40 IU) kadardır.

6. Hipovitaminoz. D vitamini eksikliği çocuklarda hastalığa neden oluyor raşitizm: bozulmuş kemik mineralizasyonu, geç gelişme dişler, kas hipotonisi. Yetişkinlerde D vitamini eksikliği ile gelişir kemik erimesi. D-hipovitaminozu önlemek için cildin ve yiyeceklerin ultraviyole ışınlaması kullanılır. Aşırı dozda D vitamini ile (terapötik dozları 1.500.000 IU'nun 2-3 bin katı aşan dozlarda), hipervitaminoz: çocuklarda büyüme geriliği, kusma, zayıflama, artış tansiyon, heyecan şaşkınlığa dönüşüyor. Hiperkalsemi ve iç organların kireçlenmesine dayanır.

E Vitamini (tokoferol, antisteril)

1. Yapı. E vitamini, vitamin aktivitesine sahip bir grup bileşik - tokol türevleri içerir. Bilinen 8 tokoferol türü vardır: α, β, γ, δ, vb. En aktif olanı a-tokoferoldür (5,7,8-trimetiltokol).

2. Taşıma ve metabolizma. E vitamini vücutta metabolize edilmez. Lipid malabsorbsiyonu tokoferol eksikliğine yol açabilir çünkü tokoferol gıda yağlarında çözünür ve sindirim sırasında salınır ve emilir. Tokoferol bağırsakta emilir ve şilomikronların bir parçası olarak lenf yoluyla kana girer. Tokoferol, kılcal damarlarındaki şilomikronların lipoprotein lipaza maruz kaldığı dokulara girer ve E vitamini, şilomikron kalıntılarının bir parçası olarak karaciğere girer. Tokoferol, VLDL'nin bir parçası olarak karaciğerden periferik dokulara taşınır. Yatırıldı B vitamini yağ dokusu, karaciğer Ve kaslar.

3. Biyolojik rol.

3.1. E vitamini hücre zarlarında birikir ve antioksidan serbest radikal reaksiyon zincirlerini keser. Antisteril etki, membranlara peroksit hasarını önleyerek hücreler arasında normal teması sağladığında (sperm olgunlaşması sırasında spermatogonia'nın erken ayrılmasını önler veya döllenmiş bir yumurtanın uterus mukozasına implantasyonunu sağlar) E vitamininin antioksidan etkisi ile ilişkilidir.

Diğer vitaminlerden farklı olarak E vitamini geri dönüştürülmez ve etkisinden sonra yeni tokoferol moleküllerinin yerini alması gerekir.

Tokoferolün antioksidan etkisi etkilidir. yüksek oksijen konsantrasyonu Bu nedenle kısmi oksijen basıncı yüksek olan hücre zarlarında (kırmızı kan hücresi zarları, solunum organ hücreleri) bulunur. Doymamış gıda tüketimi arttıkça E vitamini ihtiyacı da artıyor yağ asitleri.

3.2. E vitamini ve selenyum(Se) sinerjist görevi görür. Se, peroksit radikallerinin nötralizasyonunu sağlayan glutatyon peroksidazın bir parçasıdır. Pankreasın normal çalışması için Se gereklidir. Fonksiyonu bozulursa, lipitlerin ve ikincil olarak E vitamininin sindirimi ve emilimi bozulur.

3.3. E vitamini dahil olabilir SH içeren enzimlerin işleyişi, CoQ biyosentezini etkiler, mitokondriyal solunum zinciri boyunca elektron transfer mekanizmalarına katılır

4. Kaynak insanlar için E vitamini bitkisel yağların yanı sıra tahıl ürünleri, kuşburnu, marul, lahanadır.

5. Günlük gereksinim. 20-30mg.

6. E vitamini eksikliği. E vitamini eksikliği erkeklerde sperm oluşumunu, kadınlarda ise fetal gelişimi olumsuz etkiler. Üreme organlarının hücrelerinde dejeneratif değişiklikler, kas distrofisi, hücrelerde dejeneratif değişiklikler vardır. omurilik, yağlı karaciğer, dislipoproteinemi. Yenidoğanlarda anemi gelişebilir, bu nedenle hamile ve emziren kadınların diyetine E vitamini eklenmelidir. Anemi, hemoglobin üretimindeki azalma ve kırmızı kan hücrelerinin ömrünün azalması nedeniyle gelişir. Lipitlerin sindirimi ve emilimi bozulursa, hipovitaminoz E gelişerek nörolojik hastalıklara yol açar.

K Vitamini (filokinon, antihemorajik)

1. Yapı.Üç bileşik K vitamininin biyolojik aktivitesine sahiptir. K Vitamini 1(filokinon), 3 pozisyonunda bir yan zincir (fitol) içeren 2-metil-1,4-naftokinonun bir türevidir. Yoncadan izole edilmiştir. K Vitamini 2(menaquinone) çürüyen balık unundan izole edilmiştir. Bağırsak mikroflorası tarafından sentezlenir. Farnesil digeranil ile temsil edilen yan zincirin yapısında K1 vitamininden farklıdır. K Vitamini 3(menadion, sentetik) 3 pozisyonunda bir yan zincire sahip değildir. A.B. Palladin, buna dayanarak suda çözünür ilaç vikasol'u (2-metil-1,4-naftokinonun bisülfit türevinin sodyum tuzu) sentezledi.

2. Taşıma ve metabolizma. Doğal K vitaminlerinin (naftakinonlar) emilmesi için safra asitleri gereklidir. Lenf yoluyla şilomikronların bir parçası olarak kana girerler. Vikasol olmadan emilebilir safra asitleri ve doğrudan portal ven ve karaciğere girer. K vitamini başlangıçta karaciğerde birikir, ancak hızla tüketilir.

3. Biyolojik rol.

3.1. K vitamini karaciğerde biyosentezi uyarır dört protein pıhtılaşma faktörü(II-protrombin; VII-prokonvertin; IX-Christmas faktörü veya antihemofilik globulin B; X-faktörü Stewart-Prower).

3.2. K vitamini görevi görür karboksilaz kofaktörü Sahnede protrombinin glutamin kalıntılarının translasyon sonrası modifikasyonu. Protrombin, K vitaminine bağımlı karboksilaz tarafından karboksillenen bu tür 10 kalıntı içerir. γ-karboksiglutamat oluşur ve bu daha sonra kanın pıhtılaşması için önemli olan kalsiyum ile şelatlanır.

3.3. Karboksilasyon reaksiyonu C02 ve K vitamininin indirgenmiş (hidrokinoid) formunu gerektirir. Endoplazmik retikulumda, K vitamininin karboksilaz reaksiyonunun ürününün (yani kinoid formdan hidrokinoid forma) indirgenme döngüsü vardır. Merkezi yer iki redüktaz reaksiyonu tarafından işgal edilir (birincisi bir ditiol indirgeyici madde kullanır, ikincisi bir NADP'ye bağımlı redüktaz kullanır).

3.4. K vitamininin oksidatif fosforilasyona katılımı, çok taraflı anabolik etkisi ve membranlardaki işleyişi anlatılmaktadır.

5. Ana kaynak K vitamini – bağırsak mikroflorası. Naftokinonları yiyeceklerden (ıspanak, kabak, lahana, üvez meyveleri, hayvan karaciğeri) almak mümkündür.

6. Günlük gereksinim. Günlük gereksinim geleneksel olarak 0,2-0,3 mg olarak ifade edilir.

7. K vitamini eksikliği. Şu tarihte: normal mikroflora Yetişkinlerde bağırsakta K vitamini eksikliği yoktur. Hipovitaminoz K'nın ana nedeni antibiyotikler ve sülfonamid ilaçlarıyla bağırsak sterilizasyonudur. Plasentanın geçmesine izin vermemesi ve bağırsakların steril olması nedeniyle yenidoğanlarda K vitamini eksikliği olabilir. Doğumdan sonra plazmadaki K vitamini içeriği azalır, ancak yemekten sonra geri yüklenir. Protrombin düzeyi düşükse gelişebilir hemorajik sendrom. Hipovitaminoz K, malabsorbsiyon, hepato-biliyer ve pankreas sistemlerinin fonksiyon bozukluğu ve bağırsak mukozasının atrofisi ile ortaya çıkar. Hipovitaminoz K'nın ana belirtileri, bozulmuş intravasküler pıhtılaşma ve kanama ile ilişkilidir.

Suda çözünen vitaminler

Suda çözünen vitaminler arasında B, C, P ve H vitaminleri bulunur.

n C (askorbik asit, antiskorbutik vitamin)

1. Yapı. C vitamini yapı olarak 2 asimetrik karbon atomuna sahip bir g-laktondur. Askorbik asidin L formu biyolojik olarak aktiftir.

Askorbik asit Dehidroaskorbik asit

Askorbik asidin asidik özellikleri varlığından kaynaklanmaktadır. 2 enol hidroksil grubu. L-askorbik asit geri dönüşümlü oksidasyona uğrayarak oluşur dehidroaskorbik asit bir enzimin etkisi altında askorbat oksidaz. Dehidroaskorbik asidin askorbik asite indirgenmesi, redüktaz ve indirgenmiş glutatyonun katılımıyla gerçekleştirilir. Askorbik Ve dehidroaskorbik asitler Vitaminin biyolojik olarak aktif formları. Oksijen varlığında hidratlandığında, dehidroaskorbik asit geri dönüşümsüz olarak biyolojik aktivitesi olmayan 2,3-diketogulonik asit'e oksitlenir ve oksalik ve treonik asitlere ayrışır. Sıcaklık arttıkça, alkali ortamda, UV ışınlarının etkisi altında ve ağır metal tuzlarının (örneğin bakır) varlığında vitaminlerin yıkım hızı artar. Askorbik asit pişirme ve gıda saklama sırasında yok edilir.

2. Metabolizma. Askorbik asit, gastrointestinal sistem boyunca, ancak esas olarak ince bağırsakta basit difüzyonla emilir. Vücutta birikmez.

3. Biyolojik rol.

3.1.Redoks reaksiyonları. Askorbik asit, +0,08 V redoks potansiyeline sahip güçlü bir indirgeyici maddedir ve moleküler oksijen, nitratlar ve sitokromların indirgenmesinde rol oynar. A Ve İle.

3.2.C vitamini rol oynar hidroksilasyon kalanlar prolin Ve lizin Kollajen biyosentezi sürecinde. Hidroksiprolinin OH grupları, olgun kollajenin üçlü sarmalının zincirleri arasında hidrojen bağları oluşturarak kollajen yapısını stabilize etmek için gereklidir. Kollajendeki hidroksilizin, polisakkaritler için bağlanma bölgeleri oluşturmaya yarar. Kemik dokusunun ana bileşenleri organik matris, kollajen, inorganik kalsiyum ve fosfat olduğundan, kemik dokusunun oluşumu için C vitamini gereklidir.

3.3.C vitamini rol oynar tirozin metabolizması. Adrenal bezlerde ve merkezi bölgede tirozinden katekolaminler norepinefrin ve adrenalinin sentezi sırasında sinir sistemleri Cu+'nın Cu2+'ya oksidasyonu meydana gelir; Bakırın indirgenmesinin ters işlemi için askorbik asit gereklidir. Ayrıca p-hidroksifenilpiruvatın homojentisik asite oksidasyonu için askorbik asit gereklidir.

3.4.C vitamini gereklidir triptofan hidroksilasyonu biyosentez sırasında hidroksitriptofana dönüşür serotonin.

3.5. C vitamini biyosentezde rol oynar safra asitleri kolesterolden.

3.6.Kortikosteroid hormonlarının sentezi. Adrenal korteks, özellikle stres zamanlarında yüksek konsantrasyonda C vitamini içerir. Kortikosteroidlerin sentezi için C vitamininin gerekli olduğuna inanılmaktadır.

3.7.Demir ve hemoglobin metabolizması. Askorbik asit, demiri Fe2+'ya indirgeyerek bağırsaktan emilimini artırır. C vitamini, ferritin oluşumunda ve kan taşıma proteini transferrin ile bağlantısından demirin salınmasında rol oynar. C vitamini yardımcı olur methemoglobinin restorasyonu V hemoglobin Hemoglobinin safra pigmentlerine parçalanmasında rol oynar.

3.8.Metabolizma folik asit . Folik asidin aktif formu tetrahidrofolik asittir (THFA). THPA oluşumu için C vitamini gereklidir. THFA ile birlikte askorbik asit kırmızı kan hücrelerinin olgunlaşmasında rol oynar.

3.9. C vitamini suda çözünen antioksidan ve hücreleri serbest radikallerin zararlarından korur. Askorbik asidin antioksidan fonksiyonu, serbest radikal nötralizasyon reaksiyonlarında kullanılan iki hidrojen atomunu kolaylıkla verebilme yeteneği ile açıklanmaktadır.

4. Kaynaklar.İnsanlarda maymunlar, kobaylar ve bazı kuşlar C vitaminini sentezleyemez. C vitamininin kaynağı bitkisel besinlerdir. Biber, siyah kuş üzümü, dereotu, maydanoz, lahana, kuzukulağı, narenciye ve çilek özellikle zengindir.

5. Günlük gereksinim 70-120mg.

6. Hipovitaminoz. Artan yorgunluk, iştah azalması, dirençte azalma ile kendini gösterir. soğuk algınlığı, diş eti kanaması. Vitamin eksikliği iskorbüte (iskorbüt) yol açar. İskorbüt hastalığının ana belirtileri, kollajendeki prolin ve lizinin yetersiz hidroksilasyonundan kaynaklanan kılcal geçirgenliğin bozulması, dişlerin gevşemesi ve kaybı, eklemlerde şişlik ve ağrı, kemik hasarı ve yara iyileşmesinin bozulmasıdır. Ölüm genellikle perikardiyal boşluğa kanama nedeniyle meydana gelir. Hipovitaminoz ile C gelişir Demir eksikliği anemisi demir emiliminin bozulması ve rezervlerinin hemoglobin sentezinde kullanılması nedeniyle.

B 1 Vitamini (tiamin, antinevrit vitamini)

1. Yapı. B 1 vitamini, 1912 yılında K. Funk tarafından kristal formda izole edilen ilk vitamindir. Daha sonra fark edilmiştir. kimyasal sentez. Molekülünde bir kükürt atomu ve bir amino grubunun varlığından dolayı tiamin adını almıştır. Tiamin, 2 heterosiklik halkadan oluşur - aminopirimidin ve tiyazol. İkincisi, katalitik olarak aktif bir fonksiyonel grup içerir - bir karbanyon (kükürt ve nitrojen arasında nispeten asidik bir karbon).

Tiamin asidik ortamlarda stabildir ve ısınmaya dayanabilir. Yüksek sıcaklık. Alkali bir ortamda vitamin hızla yok edilir.

2. Taşıma ve metabolizma. Gastrointestinal sistemde vitaminin çeşitli formları serbest tiamin oluşturmak üzere hidrolize edilir. Tiaminin çoğu, özel bir aktif taşıma mekanizması kullanılarak ince bağırsakta emilir, geri kalanı bağırsak bakterilerinin tiaminazı tarafından parçalanır. Emilen tiamin, kan dolaşımıyla önce karaciğere girer, burada fosforile edilir ve ardından diğer organ ve dokulara aktarılır.

tiamin pirofosfat kinaz

ATP + tiamin tiamin pirofosfat + AMP

B1 vitamini mevcut çeşitli organlar ve hem serbest tiamin hem de fosfor esterleri formundaki dokular: tiamin monofosfat, tiamin difosfat ve tiamin trifosfat. Ana koenzim formu (toplam hücre içi miktarın %60-80'i) tiamin difosfat, veya tiamin pirofosfat(TDF veya TPF). Tiamin monofosfat ve tiamin trifosfatın rolü hala bilinmemektedir. Belki onlar ve tiamin trifosfatın adenile edilmiş formu, karbonhidratların metabolik akışını değiştirerek adaptif reaksiyonlarda rol oynuyor olabilir.

Koenzimlerin parçalanmasından sonra serbest tiamin idrarla atılır ve tiyokrom formunda belirlenir.

3. Biyolojik rol

3.1. TPP, keto asitlerin oksidatif dekarboksilasyonunu katalize eden 3 çoklu enzim kompleksinden oluşan bir koenzimdir:

- Piruvat dehidrojenaz kompleksi Karbonhidrat metabolizmasındaki anahtar reaksiyonlardan biri olan piruvatın oksidatif dekarboksilasyonuna katılır. Bu reaksiyon sonucunda trikarboksilik asit döngüsüne dahil olan, karbondioksit ve suya oksitlenen asetil-CoA oluşur. Bu reaksiyon sayesinde karbonhidratların tamamen oksidasyonu ve içerdikleri tüm enerjinin kullanılması için koşullar yaratılır. Ek olarak ortaya çıkan asetil-CoA, birçok biyolojik ürünün sentezi için bir kaynak görevi görür: yağ asitleri, kolesterol, steroid hormonları, keton cisimleri vb.

2-Oksoglutorat dehidrojenaz kompleksi TCA döngüsünün bir parçasıdır ve süksinil-CoA oluşturmak üzere 2-oksoglutaratın oksidatif dekarboksilasyonunu katalize eder.

- Dallanmış karbon keto asit dehidrojenaz valin, izolösin ve lösin metabolizmasına katılır.

3.2. TPP bir koenzimdir transketolazlar- Ana ürünleri NADPH ve riboz olan, karbonhidrat oksidasyonunun pentoz fosfat yolunun bir enzimi.

3.3. B1 vitamini sentezde rol alır asetilkolin, piruvat dehidrojenaz reaksiyonunda asetil-CoA oluşumunu katalize eder.

4. Kaynaklar. Tam buğday ekmeğinde, tahıl tohumlarının kabuğunda, soya fasulyesinde, fasulyede, bezelyede ve mayada oldukça fazla vitamin bulunur. Hayvansal ürünler arasında tiamin açısından en zengin olanlar karaciğer, yağsız domuz eti, böbrekler, beyin ve yumurta sarısıdır.

5. Günlük gereksinim 2-3 mg'dır.

6. Hipovitaminoz. Zayıflık, iştahsızlık, mide bulantısı ile kendini gösterir; periferik hassasiyette bozulma, parmaklarda uyuşma, emekleme hissi, sinirler boyunca ağrı. Vitamin eksikliği ile hastalık gelişir al onu Hasta bir kişinin yürüyüşü bir koyunun sırtına benzediğinden Hintçe'den tercüme edilen koyun anlamına gelir. Beriberi hastalarında kandaki piruvat ve 2-oksoglutarat konsantrasyonları normalden yüksektir. Eritrositlerdeki düşük transketolaz aktivitesi beriberi için bir laboratuvar kriteridir. Kardiyovasküler ve sinir sistemlerinde hasar tipiktir. Sinir dokusunun tiamin eksikliğine karşı özel duyarlılığı, bu vitaminin koenzim formunun sinir hücrelerinin glikozu emebilmesi için gerekli olmasıyla açıklanmaktadır.

B2 Vitamini (riboflavin)

1. Yapı. B 2 vitamini diğer vitaminlerden farklıdır sarı(flavus – sarı). Riboflavin ilk olarak fermente süt peynir altı suyundan izole edildi. Riboflavin molekülü, alkol ribitolün (bir D-riboz türevi) 9. pozisyonda bağlandığı bir heterosiklik izoaloksazin çekirdeğinden oluşur. Flavinler terimi, B2-vitamin aktivitesine sahip birçok izoaloksazin türevini ifade eder.

Flavinlerin biyosentezi bitki ve birçok bakteri hücresinin yanı sıra küf ve mayalar tarafından da gerçekleştirilir. Gastrointestinal kanalda riboflavinin mikrobiyal biyosentezi nedeniyle geviş getiren hayvanların bu vitamine ihtiyacı yoktur. Diğer hayvanlarda ve insanlarda bağırsaklarda sentezlenen flavinler hipovitaminozu önlemeye yeterli değildir. B2 Vitamini suda oldukça çözünür, asidik ortamlarda stabildir, ancak nötr ve alkali ortamlarda ve ayrıca görünür ve UV ışığının etkisi altında kolayca yok edilir. B2 Vitamini, çift bağların (1 ve 10) bulunduğu yere hidrojen ekleyerek, turuncu-sarı bir çözeltiden renksiz bir löko formuna dönüşerek kolayca geri dönüşümlü bir indirgemeye uğrar.

2. Metabolizma. Gıdalarda B2 vitamini esas olarak proteinler - flavoproteinlerle ilişkili koenzim formlarında bulunur. Etkilendim sindirim enzimleri vitamin ince bağırsakta basit difüzyonla salınır ve emilir. Bağırsak mukozası, kan, karaciğer ve diğer doku hücrelerinde riboflavin, flavin mononükleotid (FMN) ve flavin adenin dinükleotid (FAD) şeklinde fosforile edilir.

3. Biyolojik rol. B2 vitamininin temel önemi, flavin koenzimlerinin (FMN ve FAD) bir parçası olmasıdır. Flavoproteinler tarafından katalize edilen iki tür reaksiyon vardır:

3.1. Basit solunum sistemleri- bu, oksijenin katılımıyla substratın doğrudan oksidasyonu, H202 oluşumuyla hidrojen atomlarının ona aktarılması ve enerjinin ısı şeklinde salınmasıdır: L- ve D-amino asit oksidazlar, ksantin oksidaz(pürin azotlu bazların yok edilmesi), aldehit dehidrojenaz(aldehitlerin bozunması).

3.2. Komplekse katılım solunum sistemleri

İç mitokondriyal membrandaki elektron taşıma zincirinin ikinci kompleksindeki FAD ( süksinat dehidrojenaz Ve asil-CoA dehidrojenaz- yağ asitlerinin oksidasyonu sırasında TCA döngüsü metaboliti süksinatın ve asil-CoA'nın dehidrojenasyonu);

- NADH dehidrojenaz(protonların ve elektronların NADH + H + matrisinden iç mitokondriyal membrandaki elektron taşıma zincirinin ilk kompleksinin FMN'sine transferi);

- dihidrolipoil dehidrojenaz(FAD, a-keto asitler piruvat ve 2-oksoglutaratın oksidatif dekarboksilasyonunun enzimi için bir kofaktördür).

4. Kaynaklar. Riboflavin'in ana kaynakları karaciğer, böbrekler, tavuk yumurtası sarısı ve süzme peynirdir. Ekşi süt, taze sütten daha fazla vitamin içerir. Bitki besinleri az miktarda B2 vitamini içerir (badem hariç). Riboflavin eksikliği bağırsak mikroflorası tarafından kısmen telafi edilir.

5. Günlük gereksinim 2-3mg.

6. Hipovitaminoz. B2 vitamini eksikliği diğer vitaminler gibi halsizlikle kendini gösterir, artan yorgunluk, soğuk algınlığına eğilim. Riboflavin eksikliğinin spesifik belirtileri şunları içerir: inflamatuar süreçler mukoza zarlarında. Dudakların ve ağız boşluğunun mukozaları kurur, dil parlak kırmızı olur ve ağzın köşelerinde çatlaklar oluşur. Özellikle yüzde cilt epitelinin soyulması artar.

PP Vitamini (nikotinik asit, nikotinamid, niasin; antipellagritik vitamin)

1. Yapı. PP Vitamini 1937 yılında K. Evelheim tarafından izole edilmiştir. Uygulanması pellagra hastalığına karşı korumuş veya tedavi etmiştir. PP, anti-pellagra anlamına gelir.

Nikotinik asit bir piridin-3-karboksilik asittir ve nikotinamid onun amididir. Her iki bileşik de vücutta kolayca birbirine dönüştürülür ve bu nedenle aynı vitamin aktivitesine sahiptir.

PP vitamini suda az çözünür, ancak alkalilerin sulu çözeltilerinde çözünür.

2. Metabolizma. Yiyeceklerle birlikte verilen PP Vitamini, midede ve bağırsaklarda, esas olarak basit difüzyonla hızla emilir. Nikotinik asit kan dolaşımıyla karaciğere ve diğer organlara girer ve nikotinamid bunlara biraz daha yavaş nüfuz eder. Dokularda her iki bileşik de öncelikle koenzim formlarının sentezi için kullanılır. NAD + Ve NADP + . Nikotinamid koenzimlerinin bazıları hayvanların vücudunda sentezlenir. triptofan. Bununla birlikte, metabolik triptofan havuzunun %2'sine kadarını içeren bu yol, verimlilik açısından birincisine (yani doğrudan bir vitamin öncüsüne) göre önemli ölçüde daha düşüktür.

3. Biyolojik rol. PP vitamininin değeri, NAD + ve NADP + koenzimlerinin rolü ile belirlenir.

3.1.NAD + katalize eden dehidrojenazların bir parçasıdır. redoks piruvat, izositrat, 2-oksoglutarat, malat vb. dönüşümü. Bu reaksiyonlar genellikle mitokondride lokalizedir ve Enerjiyi serbest bırakmak birleşik mitokondriyal proton ve elektron taşıma zincirlerinde.

3.2.NADP + dahildir dehidrojenazlar (redüktaz), çoğunlukla sitozol veya endoplazmik retikulumda lokalize olan ve hizmet eden indirgeyici sentezler(pentoz fosfat yolunun NADP'ye bağımlı dehidrojenazları, yağ asitleri ve kolesterol sentezi, safra asitlerinin sentezi için mitokondriyal monooksijenaz sistemleri, kortikosteroid hormonları) ve ksenobiyotiklerin nötralizasyonu (mikrozomal oksidasyon, karışık fonksiyonlu oksijenazlar).

3.3.NAD + Ve NADP+- enerji metabolizması enzimlerinin allosterik düzenleyicileri.

4. Kaynaklar. Hayvansal ürünler (karaciğer, et) ve bitkisel kökenli (pirinç, ekmek, patates). Süt ve yumurta eser miktarda niasin içerir, ancak yetersiz niasin alımını telafi edebilen triptofan içerirler.

5. Günlük gereksinim 15-25 mg'dır.

6. Hipovitaminoz. Karakteristik bir özellik PP Vitamini eksikliği “üç D” semptom kompleksidir: dermatit, ishal ve demans. Hastalığın temeli hücrelerin proliferatif aktivitesinin ve enerjisinin ihlalidir. Dermatit en sık maruz kalan cilt bölgelerinde görülür. Güneş ışınları kırmızıya döner, pigment lekeleriyle kaplanır (yüzde kelebek kanatları şeklinde) ve soyulur. Dil parlak kırmızı ve ağrılı hale gelir, kalınlaşır ve üzerinde çatlaklar oluşur. Hazımsızlık bulantı, iştahsızlık ve karın ağrısı ile kendini gösterir. İşlev bozuldu periferik sinirler ve merkezi sinir sistemi.

Hipovitaminoz belirtileri gelişir:

1. Diyetinde protein eksikliği olan kişilerde. Bu, hayvansal proteinlerin optimal miktarda amino asit triptofan, B6 vitamini ve niasin sentezi için gerekli diğer bazı bileşenleri içermesiyle açıklanmaktadır.

2. Niasinin bağlı formda olduğu sürekli mısır diyeti ile.

3. Taneleri yüksek konsantrasyonda lösin içeren sorgumun sürekli beslenmesiyle - triptofanın NAD +'ya dönüştürülmesi için anahtar enzimin bir inhibitörü.

4. B6 vitamini ve piridoksal fosfatın koenzim formunun eksikliği ile, triptofandan PP vitamininin koenzim formlarının sentezi için gereklidir.

Pantotenik asit

Pantotenik asit doğada yaygın olarak bulunur ve adı buradan gelir. pantos- her yer. Vitamin, 1933 yılında R. Williams tarafından keşfedildi ve on yıl sonra kimyasal olarak sentezlendi.

1.Yapı. Pantotenik asit, pantoik asitten (a,γ,-dihidroksi-β,β-dimetilbutirik asit) ve β-alanin'den oluşur.

Pantotenik asit, suda oldukça çözünür, viskoz, açık sarı bir sıvıdır. Kararsızdır ve zayıf asitlerin ve alkalilerin etkisi altında peptid bağının bulunduğu yerde kolayca hidrolize olur.

2. Metabolizma. Pantotenik asit, ince bağırsakta ve kolonda emildikten sonra kan dolaşımı yoluyla dokulara girer (basit difüzyon veya aktif taşıma ile konsantrasyona bağlı olarak). Pantotenik asit ATP kullanılarak fosforile edilir. 4'-fosfopantotenat. Sistein ilavesi ve dekarboksilasyonu, tiyoetanolamin oluşumuna yol açar; 4'-fosfopantotein- prostetik grup koenzim A(HS-CoA) ve asil taşıma proteini(APB).

3. Biyolojik rol. HS-CoA ve ACP'deki tiyol grubu şu şekilde hareket eder: asil radikal taşıyıcı.

HS-CoA en önemli metabolik süreçlerde yer alır:

a) karbonhidrat metabolizmasında - piruvatın asetil-CoA'ya ve 2-oksoglutaratın süksinil-CoA'ya oksidatif dekarboksilasyonu;

b) asil-CoA oluşumundan önceki aktivasyon aşamalarında yağ asitlerinin β-oksidasyonunda ve 2 karbon atomu ile kısaltılmış asetil-CoA ve asil-CoA'nın salınmasıyla tiyolitik bölünmede;

c) asetil-CoA formunda asetil kalıntısı, aracı asetilkolini oluşturmak üzere koline aktarılır;

d) süksinil-CoA, porfirinlerin sentezinde rol oynar;

e) yağ asitlerinin biyosentezinde - palmitat sentaz kompleksindeki bir metabolit taşıyıcının işlevi 4-fosfopantetein tarafından gerçekleştirilir;

g) asetil-CoA, keton cisimlerinin, kolesterolün ve steroid hormonlarının sentezinde kullanılır.

Asetil-CoA almak merkezi yer karbonhidratların, amino asitlerin ve yağ asitlerinin metabolizması arasındaki etkileşim süreçlerinde.

4. Kaynaklar. Pantotenik asit, hayvansal (karaciğer, böbrekler, yumurta, et, süt vb.) ve bitki (patates, lahana, meyveler vb.) kökenli ürünlerde yaygın olarak dağılmaktadır. Bağırsak mikroflorası tarafından sentezlenir.

5. Günlük gereksinim. 10-15mg

6. Hipovitaminoz. Vitaminin gıdalardaki dağılımı geniş olduğundan vitamin eksikliği oluşmaz. Hipovitaminoz belirtileri spesifik değildir: dermatit, nevrit, sindirim sisteminin mukoza zarında ülserler, steroid hormonlarının üretimindeki bozukluklar, vb.

B 6 Vitamini (piridoksin, piridoksol, antidermatit vitamini)

1. Yapı. B6 Vitamini, aynı vitamin aktivitesine sahip üç doğal piridin türevini içerir: piridoksin, piridoksal, piridoksamin, sırasıyla bir alkol, aldehit veya amino grubunun varlığıyla birbirinden farklıdır. B 6 Vitamini 1934 yılında A. Szent-Gyorgyi tarafından keşfedilmiştir. Piridoksin, su ve etanolde oldukça çözünür, asidik ve alkali ortamlarda stabildir, ancak pH 7,0'da ışıkla kolayca yok edilir.

2 Metabolizma.İnce bağırsakta emilen vitaminin tüm formları kan yoluyla dokulara taşınır ve hücrelere nüfuz ederek ATP'nin katılımıyla fosforile edilir. Koenzim fonksiyonları iki fosforile edilmiş piridoksin türevi tarafından gerçekleştirilir: piridoksal fosfat Ve piridoksamin fosfat.

3. Biyolojik rol. B6 Vitamini çok çeşitli biyolojik etkilerle karakterize edilir. Protein, karbonhidrat ve lipid metabolizmasının düzenlenmesinde, hem ve biyojenik aminlerin biyosentezinde, hormonlarda rol alır. tiroid bezi ve diğer biyolojik olarak aktif bileşikler. B6 vitamininin koenzim formları aşağıdaki enzimlerin bir parçasıdır:

- Amino asit aminotransferazlar NH2 grubunun bir amino asitten bir a-keto aside geri dönüşümlü transferini katalize eder (esansiyel olmayan amino asitlerin oluşumu, dolaylı deaminasyon ve amino asitlerin indirgeyici aminasyonu).

- Amino asit dekarboksilaz Biyojenik aminlerin oluşumuna yol açan amino asitlerin karboksil grubunun çıkarılması.

- Bunu gerçekleştiren enzimler oksidatif olmayan deaminasyon serin, treonin, triptofan, kükürt içeren amino asitler.

- Kas fosforilazı(glikojen parçalanması).

4. Kaynaklar. Baklagiller, tahıllar, et ürünleri, balık ve patates B6 vitamini açısından zengindir. Bağırsak mikroflorası tarafından sentezlenir ve vücudun bu vitamine olan ihtiyacını kısmen karşılar.

5. Günlük gereksinim. 2-3mg

6. Hipovitaminoz. B6 vitamini eksikliğinin ana belirtileri hipokromik anemi ve kasılmalardır. Kuru seboreik dermatit, stomatit ve glossit gelişimi not edilmiştir. Çoğu zaman piridoksin eksikliği oluşur:

a) küçük çocuklarda yapay besleme toksikozlu hamile kadınlarda sterilize edilmiş süt (B6 vitamini yok edilir);

b) B vitaminlerinin grup eksikliği ile;

c) bağırsak mikroflorası antibiyotikler tarafından baskılandığında;

d) alkoliklerde, asetaldehit piridoksal fosfatın fosforilasyonunu uyardığından.

H Vitamini (biyotin)

Biyotin, mikroorganizmalar için önemli bir büyüme faktörü olarak tanımlanan ilk maddedir. Daha sonra gösterildi toksik etki sıçanlarda çiğ yumurta akı. Karaciğer veya maya yemek bu etkiyi hafifletti. Toksikoz gelişimini önleyen faktöre H vitamini veya biyotin (Yunanca'dan) adı verildi. biyografiler- hayat).

2.Metabolizma

2.1. Biotin vücutta değişikliğe uğramaz ancak işlevini yerine getirdiği enzimlere kovalent olarak bağlanır. prostetik grup.

2.2. Biotin, serbest bir karboksil grubu aracılığıyla apoenzimin lisin kalıntısına bağlanır. Biyotin-enzim kompleksi, karboksibiyotin-enzim kompleksini oluşturmak için ATP'nin (enerji kaynağı) varlığında CO2 ile reaksiyona girer.

2.3. Biyotinidaz Protein metabolizması sırasında biyotinin enzimden uzaklaştırılmasını katalize ederek biyotinin yeniden kullanılmasını sağlar.

3. Biyolojik rol. Biotin reaksiyon koenzimi olarak görev yapar karboksilasyon CO2 taşıyıcısı olarak görev yapar. Vücutta biyotini koenzim olarak kullanan 4 enzim vardır.

- Piruvat karboksilaz. Piruvatın karboksilasyonu sonucunda glukoneogenezde ve TCA döngüsünde kullanılan oksaloasetat oluşur.

- Asetil-CoA karboksilaz malonil-CoA oluşturmak üzere asetil-CoA'nın karboksilasyonunu katalize eder. Reaksiyon daha yüksek yağ asitlerinin biyosentezinde kullanılır.

- Propiyonil-CoA karboksilaz propiyonil-CoA'yı D-metilmalonil-CoA'ya dönüştürür ve bu da süksinata dönüştürülür (TCA döngüsüne girer).

- β-metil-krotonil-CoA karboksilaz lösin ve izoprenoid yapıları içeren maddelerin katabolizmasında rol oynar.

4. Kaynaklar. Biotin bağırsak mikroflorası tarafından yeterli miktarda sentezlenir. Besin kaynakları: karaciğer, kalp, yumurta sarısı, kepek, fasulye, soya fasulyesi, karnabahar vb.

5. Günlük gereksinim. 150-200 mcg.

6. Açık. Hipovitaminozun nedenleri şunlardır:

a) bağırsak mikroflorasının büyümesini baskılayan antibiyotiklerin kullanımı;

b) vücuda büyük miktarda giriş avidina– bir proteinde bulunan bir glikoprotein tavuk yumurtalarıçözünmeyen bir kompleksin oluşumu nedeniyle biyotin emilimini engelleyen;

c) uzun süreli parenteral beslenme;

d) biyotini apoenzimin lizin kalıntılarına bağlayan enzimde kalıtsal bir bozukluk.

Belirtiler hipovitaminoz seboreik dermatit, bulantı, saç dökülmesi, kas ağrısını içerir.

Folik asit (folasin, B 9 vitamini, BC vitamini)

Vitamin, 1930 yılında belirli bir tür megaloblastik anemisi olan kişilerin maya veya karaciğer ekstraktı yiyerek tedavi edilebileceğinin gösterilmesiyle keşfedildi. 1941'de yeşil yapraklardan (Latince folium - yaprak, dolayısıyla vitaminin adı) folik asit izole edildi. Bu bileşiğe, tavuklarda (İngiliz tavuğundan) anemiyi tedavi etme kabiliyeti nedeniyle Bc vitamini adı verildi.

1. Yapı. Folik asit, p-aminobenzoik asit (PABA) ve glutamik asit'e bağlı pteridinden oluşur.

Folik asit suda ve organik çözücülerde az çözünür, ancak suda iyi çözünür. alkali çözeltiler. Sebzelerin işlenmesi ve konservelenmesi sırasında ışığa maruz kalması sonucu tahrip olur.

2. Metabolizma. Folat gıdalarda poliglutamat formunda bulunur. Dış glutamat kalıntıları, emilimden önce bağırsakta, özellikle de ince bağırsakta uzaklaştırılır. Koenzim formu folik asit, dihidrofolat redüktaz enziminin etkisiyle ve hidrojen atomlarının donörü olarak NADPH + H + kullanılarak folik asitten oluşan 5,6,7,8-tetrahidrofolik asittir (THFA).

3. Biyolojik rol.

3.1. Folik asit, tek karbonlu radikallerin (grupların) bir taşıyıcısıdır: metil(-CH3), metilen(=CH2), metenil(≡CH), resmi(-CHO), oksimetil (-CH20H) ve formin(-CH=NH). Tek karbonlu kısımlar THFA'ya N5 veya N10 pozisyonlarında bağlanır. 5. pozisyona bir formil radikalinin eklenmesi, olarak bilinen N5-formilTHFA'nın oluşumuna yol açar. folinik asit. MetilenTHFA, THFA glisin, serin veya kolin ile reaksiyona girdiğinde oluşur.

3.2. Folat, purin nükleotidlerinin (2 ve 8 karbon atomlu) sentezi ve timin sentezi için gereklidir. N5,N10-metilen TGFA, DNA sentezi ve kırmızı kan hücrelerinin oluşumu için gerekli olan timidilat sentezine bir metil grubu katar.

3.3. Katılır glisin, serin ve etanolaminin metabolizması.

3.4. N-formilmetiyonin amino asiti başlatıyorum Prokaryotlarda protein biyosentezinde.

3.5. Kanda THFA, N5-metilTHFA olarak bulunur. Homosisteinin metiyonine dönüştürülmesi reaksiyonunda N5-metilTHFA'nın THFA'ya dönüştürülmesi için B 12 Vitamini gereklidir. Bu reaksiyon, serbest THFA'nın salınması ve tek karbon metabolizmasında yeniden kullanılması için gereklidir. B 12 vitamini eksikliği ile N5-metilTHFA'nın THFA'ya dönüşümü engellenir ("folat tuzağı").

4. Kaynaklar: bağırsak mikroflorası, taze sebzeler - marul, lahana, havuç, domates, soğan.

5. Günlük gereksinim: 50-200 mcg.

6. Açık. THPA eksikliği ile pürin ve timin sentezi azalır, bu da DNA sentezinin bozulmasına yol açar. Bu gelişmeyle ortaya çıkıyor megaloblastik anemi kırmızı kan hücrelerinin olgunlaşmamış çekirdekli formlarının kandaki görünümü ile karakterize edilir.

B 12 Vitamini (kobalamin, antianemik vitamin)

Zararlı anemi (Addison-Birmer hastalığı) kaldı ölümcül bir hastalık 1926'ya kadar çiğ karaciğer ilk kez onu tedavi etmek için kullanıldı. Karaciğerde bulunan antianemik faktörün araştırılması başarıya yol açtı ve 1955'te Dorothy Hodgkin, X-ışını kırınım analizi yöntemini kullanarak bu faktörün yapısını ve uzaysal konfigürasyonunu deşifre etti.

1.Yapı. B 12 vitamininin yapısı diğer tüm vitaminlerin yapısından farklıdır. molekülde bir metal iyonunun varlığı– kobalt. Kobalt, dört pirol halkasının parçası olan nitrojen atomlarıyla koordinasyon bağları ile bağlanır ve düzlemsel (düz) bir yapı oluşturur. Corrin. I, II, III pirol halkaları doğrudan IV ve I metilen köprüleri aracılığıyla bağlanır. Korrin düzlemine dik olarak, 5,6-dimetilbenzimidazol, a-D-riboz ve bir kobalt atomuna bir koordinasyon bağı ile bağlanan bir fosforik asit kalıntısı içeren bir nükleotid bulunur (Şekil 10.2). Gıdalarda kobalamin oksitlenmiş formda bir kobalt atomu içerir (III). Aktif koenzim formlarını oluşturmak için kobalt atomu Co(I)'e indirgenir.

B 12 vitamininde pirol halkalarındaki karbon atomlarının yerini metil, asetamid ve propiyonamit radikalleri alır. Halka IV'teki propiyonamit radikali, izopropil alkol yoluyla nükleotidin fosfat kalıntısına bağlanır.

Kobalt atomu üç değerlikli olup CN - grubuna kovalent olarak bağlanmıştır. Tüm yapıya siyanokobalamin veya kobalamin denir çünkü siyanür iyonunun izolasyon yöntemine bağlı olarak bir eser olduğuna inanılır.

Kobalaminler suda çözünür, ısıya dayanıklı ve pH 4,0'da asit çözeltilerinin varlığında stabildir.

2. Taşıma ve metabolizma

2.1. Besinlerde bulunan B12 vitaminine ne ad verilir? Kalenin dış faktörü. Vitamin, ince bağırsakta aşağıdakilerle birlikte emilir: Castle'ın içsel faktörü(mide paryetal hücreleri tarafından salgılanan bir glikoprotein).

B 12 vitamini gıdalarda proteinlerle birlikte bulunur. Midede hidroklorik asit ve pepsinin etkisi altında B 12 vitamini proteinlerle kompleksten salınır ve kobalofilin(R-protein, haptocorrin) - tükürük tarafından salgılanan bir protein. İÇİNDE duodenum kompleks parçalanır, kobalofilin pankreas proteazları tarafından hidrolize edilir, B12 vitamini içsel Castle faktörüne bağlanır. B 12 Vitamini kompleksi - Castle'ın içsel faktörü, distal ileumda reseptörler yoluyla emilir ( kübilinler), kompleksi bağlayan ancak serbest faktörü veya serbest vitamini bağlamayan. Başka bir protein - megalin- cubilin ile ilişkilidir ve kompleksin emilmesi için endositoz sürecini sağlar

Pirinç. 10.2. B12 vitamini.

2.2. Vitamin kanda adı verilen proteinlerle birlikte taşınır. transkobalaminler karaciğer hücrelerinde metilkobalamin ve 5-deoksiadenosilkobalamin'e dönüştürülür. kemik iliği ve retikülositler. Transkobalamin I depolama ve rezervasyona katılır suda çözünen vitamin karaciğerde ve kan plazmasında (dolaşımdaki rezerv). Transkobalamin II Vitamini kanda taşır. Transkobalamin II-B12 vitamini kompleksi periferik hücrelere endositoz yoluyla girer. Hücre lizozomlarında, transkobalamin II yok edilir, vitamin, sitozolde metilkobalamin'e veya mitokondride 5-deoksiadenosilkobalamin'e dönüştürülen hidroksikobalamin formunda salınır. Karaciğer yaklaşık 4-5 mg vitamin depolar ve bu rezervler vücuda 4-6 yıl boyunca vitamin sağlamaya yeterlidir.

3. Biyolojik rol.

İnsan vücudunda vitamin 2 önemli reaksiyon için gereklidir:

3.1. 5-deoksiadenosilkobalamin bir koenzimdir metilmalonil-CoA mutaz metilmalonil-CoA'yı süksinil-CoA'ya dönüştürür. Metilmelonil-CoA, valin katabolizmasının ve propiyonil-CoA'nın karboksilasyonunun bir ara ürünü olarak oluşur; izolösin, kolesterol, tek sayıda karbon atomlu yağ asitlerinin katabolizması sırasında veya doğrudan propiyonik asitten (bir ürün) sentezlenir. bağırsakta mikrobiyolojik fermantasyon). Bu reaksiyon sonucunda metilmalonil-CoA, süksinil-CoA'ya dönüştürülür.

3.2. Metilkobalamin homosisteinin metiyonine metilasyonunu katalize eden bir enzim olan homosistein metiltransferazın bir koenzimidir. Kobalamin, N5-metiltetrahidrofolik asitten metil gruplarını alır ve onu tetrahidrofolata dönüştürür. Bu reaksiyonun metabolik önemi, pürin ve pirimidin nükleotidlerinin sentezi ve nükleik asitlerin sentezi için gerekli olan metiyonin ve tetrahidrofolat rezervlerinin korunmasıdır. B12 vitamini eksikliği durumunda folat sürekli olarak N5-metil-THFC (“folat” veya metil tuzağı) formunda bulunur.

3.3. D-ribonükleotidlerin deoksi-D-ribonükleotidlere dönüşümü için B 12 Vitamini gereklidir. Prokaryotlardaki bu reaksiyon spesifik bir ribonükleotid redüktaz tarafından katalize edilir.

4. Kaynaklar. Vitaminin ana kaynağı mikroorganizmalardır. Bitkisel besinlerde B 12 vitamini yoktur. Vitamin, meyvelerin yüzeyindeki bakteriler tarafından küçük miktarlarda üretilir. Vitaminin önemli bir kısmı karaciğerde, mayada, sütte bulunur. yumurta sarısı.

5. Günlük gereksinim. 2-5 mcg.

6. Açık.

1. B 12 vitamininin enterohepatik dolaşımı vücuda yeterli miktarda vitamin sağlar ve vitaminin birkaç yıl boyunca diyette bulunmaması durumunda eksiklik gelişebilir. Mide veya ileum hastalıklarında vitamin eksikliği daha çabuk gelişebilir.

2. Pernisiyöz anemi, B12 vitamini eksikliğinin bir sonucudur ve bozulmuş DNA sentezi, kırmızı kan hücrelerinin oluşumu ve kırmızı kan hücrelerinin olgunlaşmamış nükleer formlarının (megaloblastlar) ortaya çıkmasıyla karakterize edilir.

3. Uzun süreli vejetaryenlik B12 vitamini eksikliğine yol açabilir.

Vitamin benzeri maddeler

Yukarıda açıklanan vitaminlere ek olarak gıdalar, temel faktörler olan diğer bileşenleri de içerir.

Kholin

Best ve Huntsman (1934), sıçanlarda kolin eksikliğinin yağlı karaciğer dejenerasyonuna neden olduğunu buldu. Ancak kolin vücutta yeterince sentezlenebilir (serinden) ve birçok gıdada (süt, yumurta, karaciğer, tahıllar vb.) bulunur.

1.Yapı.İle kimyasal yapı Kolin, nitrojen atomunda 3 metil grubu içeren bir aminoetil alkoldür.

2.Biyolojik rol.

2.1. Membranların bileşenleri olan ve lipit taşınmasında rol oynayan fosfolipitlerin (lesitinler) bir bileşenidir.

2.2. Karaciğerden yağları taşıyan fosfolipitlerin ve lipoproteinlerin sentezine katılımıyla açıklanan, karaciğerde lipit birikimini (lipotropik faktör) önler.

2.3. Yapısında üç metil grubunun bulunması nedeniyle tek karbonlu radikallerin metabolizmasına katılır.

2.4. Sinir uyarılarının iletilmesinde rol oynayan asetilkolin sentezinin öncüsü.

3. Besin kaynağı et ve tahıl bitkileridir. Günlük gereksinim ortalama 0,5 g'dır.

4. Arıza.İnsanlarda kolin eksikliğinin belirtileri tanımlanmamıştır. Hayvanlarda karaciğerde yağ infiltrasyonu ve kan damarlarında hasar görülür.

İnositol

1.Yapı. Kimyasal yapısına göre, siklohekzanın suda yüksek oranda çözünen altı hidroksil siklik alkolüdür.

2.Biyolojik rol.

2.1. Fosfatidilinositolün (hücre zarlarının bir bileşeni) sentezi için gereklidir.

2.2. Lipotropik faktör görevi görür (kolin ile birlikte) ve karaciğerde yağ birikmesini önler.

2.3. Belirli hormonların (inositol 1,4,5-trifosfat) etkisinde bir aracıdır. İnositol trifosfat, endoplazmik retikulumdan kalsiyum salınımını arttırır.

2.4. Yüksek konsantrasyon Fonksiyonu bilinmemekle birlikte kalp kasında belirtilmiştir.

3. . İnositol, başta karaciğer, beyin, et, yumurta sarısı olmak üzere hayvansal ve bitkisel kökenli tüm ürünlerde, ayrıca ekmek, patates, yeşil bezelye ve mantarlarda bulunur. Günlük gereksinim yaklaşık 1,0 -1,5 g'dır.

4.Arıza hayvanlarda inositol, karaciğerin yağlı dejenerasyonu ve içindeki fosfolipid içeriğinin azalması, kellik ve anemi ile kendini gösterir. Genç bireylerde büyüme geriliği yaşanıyor

Lipoik Asit (N Vitamini)

1.Yapı. 1951'de, anahtar hücre metabolitleri olan piruvat ve asetil-CoA metabolizmasına aktif olarak katılan bir madde izole edildi. Polar olmayan solventlerde (lipit – yağ) iyi çözündüğü için lipoik asit adını almıştır. Lipoik asit kimyasal yapısına göre kükürt içeren bir yağ asididir (6,8-ditiyooktanoik asit). Oksitlenmiş ve indirgenmiş formlarda bulunur.

2. Biyolojik rol.

2.1. Oksidatif dekarboksilasyon reaksiyonlarına diğer vitaminlerle (tiamin, niasin, riboflavin ve pantotenik asit), bunun sonucunda piruvat asetil-CoA'ya ve 2-oksoglutarat süksinil-CoA'ya dönüştürülür.

2.2. Antioksidandır ve vücudu radyasyonun ve toksinlerin zararlı etkilerinden korumada etkilidir.

3. Hipo ve hipervitaminoz lipoik asit insanlarda tanımlanmamıştır.

4.Günlük gereksinim. Kaynaklar. Lipoik asit açısından en zengin besinler maya, et ürünleri ve süttür. Günlük gereksinimin 1-2 mg olduğu varsayılmaktadır.

Para-aminobenzoik asit (PABA)

1.Yapı. Folik asidin yapısal bir bileşenidir. PABA'nın kimyasal yapısı:

PACB suda az çözünür, alkol ve eterde iyi çözünür ve kimyasal olarak stabildir.

2.Biyolojik rol.

2.1. Vitamin özellikleri PABA, folik asit molekülünün bir parçası olması ve dolayısıyla folik asitin gerekli olduğu tüm metabolik reaksiyonlarda yer almasıyla ilişkilidir.

2.2. Antihipoksik, antiaterojenik etkiye sahiptir, adrenalinin oksidasyonunu önler ve tiroid bezinin fonksiyonu üzerinde olumlu etkisi vardır.

3.Günlük gereksinim. Kaynaklar. PABA neredeyse tüm gıdalarda bulunur. En zengin besinler karaciğer, et, süt, yumurta ve mayadır. Günlük gereksinim belirlenmemiştir.

P Vitamini (rutin, biyoflavonoidler)

1.Yapı. 1936'da A. Szent-Gyorgyi, limon kabuğundan kırılganlığı ve kılcal geçirgenliği azaltan aktif bir madde izole etti. Buna P vitamini denir ( geçirgenlik– geçirgenlik).

Biyoflavonoidler, yapısı difenilpropan karbon iskeletine dayanan çeşitli bitki polifenolik bileşikleri grubudur.

Bitkilerde tanımlanmış kimyasal yapılara sahip 4.000'den fazla flavonoid bulunmuştur. 6 gruba ayrılırlar: flavonoller, flavonlar, flavononlar, kateşinler, antraglikozitler, antosiyaninler.

2.Biyolojik rol.

2.1. Biyoflavonoidler biyolojik sentez için kullanılabilir önemli bağlantılar hücrede (örneğin ubikinon).

2.2. Rutin ve quercetin, P vitamini aktivitesine sahip polifenollerdir. etkili antioksidanlar. Yeşil çayın flavonoidleri (kateşinler), serbest radikalleri nötralize etme yeteneklerine dayanan belirgin bir sitoprotektif etkiye sahip olabilir. Biyoflavonoidler, E vitamininin aksine, doğrudan antiradikal etkilerinin yanı sıra, değişken değerlikli metal iyonlarını da bağlayabilir, böylece membran lipid peroksidasyon sürecini inhibe edebilir.

2.3. Kollajen oluşumunu düzenleme (C vitamini ile sinerji) ve bağ dokusunun ana maddesinin hiyalüronidaz tarafından depolimerizasyonunu önleme yeteneği nedeniyle P vitamininin kılcal damar güçlendirici etkisi yeterince incelenmiştir.

3.Günlük gereksinim. Kaynaklar. P vitaminleri C vitamini ile aynı bitkisel besinlerde bulunur. İçlerinde en zengin olanlardır. kuş üzümü, siyah kuş üzümü, elma, üzüm, limon, çay yaprakları ve kuşburnu. Biyoflavonoid ağaç kavunu limon kabuğuna katkıda bulunur sarı. Bileşimdeki flavonoidlerin tüketimi doğal ürünler(meyveler, meyve suları ve üzüm şarapları) metallerle kompleks oluşturabilecekleri durumlarda, saflaştırılmış vitamin preparatlarının kullanılmasından daha etkili olabilir. Günlük gereksinim 25-50 mg'dır.

4.Hipovitaminoz. Biyoflavonoid eksikliğinin semptomları, kılcal damarların artan geçirgenliği ve kırılganlığı, peteşiler (sivri uçlu ortak kanama) ve diş eti kanaması fenomenine indirgenir.

U Vitamini

1.Yapı. U vitamini 1950 yılında çiğ sebzelerde keşfedildi. Çiğ sebzelerin, özellikle de lahananın suyu, deneysel mide ülserlerinin gelişimini önleme veya geciktirme özelliğine sahip olduğundan, ondan izole edilen vitamine adı verildi. ülser önleyici, veya U vitamini(lat. ülser– ülser). Kimyasal yapısına göre S-metilmetiyonindir:

U vitamini suda oldukça çözünür. Yemek pişirirken, özellikle nötr ve alkali bir ortamda yiyecekler kolayca yok edilir.

2.Biyolojik rol.

Metiyonin gibi U vitamini de kolin ve kreatin sentezi reaksiyonlarında metil gruplarının donörüdür.

3.Vitamin eksikliği insanlarda tanımlanmamıştır. Mide ülserini simüle etmek için alkaloid çinkoofenle beslenen tavuklar, yemlerine taze sebze suyu eklenirse iyileşiyordu.

4.Günlük gereksinim. Kaynaklar. U vitamini kaynakları taze lahana, maydanoz, havuç, soğan, biber, yeşil çay, taze süt, karaciğer.

F Vitamini

F vitamini grubu polien yağ asitlerini içerir: linoleik, linolenik, araşidonik. Linoleik ve linolenik asitlerin vücuda yeterli miktarda alınmasıyla sentez meydana gelir arakidonik asit eikosanoidlerin (prostaglandinler, prostasiklinler, tromboksanlar ve lökotrienler) öncüsüdür. ω3 çoklu doymamış yağ asitlerinin etkili kaynaklarından biri Keten tohumu yağı(α-linolenik asit – %52). Doymamış yağ asitlerini stabilize etmek için yağ, antioksidan ve östrojenik etkileri olan lignanlar içerir.

Koenzim Q

Koenzim Q grubu ubikinonları içerir. Ubiquinone Q 10, kolesterol sentezinin son aşamalarında sentezlenebilir. Bu nedenle, klasik statinler (HMG redüktaz inhibitörleri) kullanıldığında, koenzim Q eksikliğinin etkileri ortaya çıkabilir.Şu anda, koenzim Q sentezinin dal bölgesinin aşağısındaki kolesterol sentezini bloke eden ikinci nesil statinler geliştirilmiştir.

Koenzim Q, membranlarda bulunur ve membranların lipit fazında (elektron taşıma zinciri) bir elektron taşıyıcısıdır. Koenzim Q eksikliği, hipoenerjetik bir durum ve buna bağlı çeşitli fonksiyonel bozukluklar şeklinde kendini gösterir.

Koenzim Q birçok biyolojik maddenin bir parçasıdır aktif katkı maddeleri Metabolizma için besin desteğini optimize etmek amacıyla gıdalara.

İlgili bilgi.

"Vitaminler" genel adı altında gruplandırılan temel gıda maddeleri, farklı kimyasal bileşik sınıflarına aittir ve bu durum, bunların niceliksel belirlenmesi için tek bir yöntemin kullanılması olasılığını kendi başına dışlar. Vitaminler için bilinen tüm analitik yöntemler ya bu maddelerin spesifik biyolojik özelliklerinin belirlenmesine (biyolojik, mikrobiyolojik, enzimatik), ya fizikokimyasal özelliklerinin kullanılmasına (floresan, kromatografik ve spektrofotometrik yöntemler) ya da bazı vitaminlerin yeteneklerine dayanmaktadır. belirli reaktiflerle renkli bileşiklerin oluşumuyla reaksiyona girmek (kolorimetrik yöntemler).

Analitik ve uygulamalı kimya alanındaki başarılara rağmen, vitaminlerin belirlenmesine yönelik yöntemler Gıda Ürünleri hala emek yoğun ve zaman alıcıdır. Bunun bir dizi nesnel nedeni vardır; başlıcaları aşağıdadır.

1. Bir dizi vitaminin belirlenmesi, birçoğunun doğada bağlı halde proteinler veya peptidlerle kompleksler şeklinde ve ayrıca fosfor esterleri formunda bulunması nedeniyle sıklıkla karmaşıktır. Kantitatif tespit için, bu komplekslerin yok edilmesi ve vitaminlerin fizikokimyasal veya mikrobiyolojik analiz için erişilebilir serbest formda izole edilmesi gerekir. Bu genellikle özel işleme koşulları (asit, alkali veya enzimatik hidroliz, otoklavlama) kullanılarak elde edilir.

2. Hemen hemen tüm vitaminler, yüksek sıcaklık, atmosferik oksijen, ışık ve diğer faktörlerin etkisi altında kolayca oksidasyona, izomerizasyona ve tamamen yok olmaya maruz kalan çok kararsız bileşiklerdir. Önleyici tedbirlere uyulmalıdır: Ürünün ön hazırlık süresini mümkün olduğunca azaltın, güçlü ısı ve ışığa maruz kalmaktan kaçının, antioksidanlar kullanın vb.

3. Gıda ürünlerinde, kural olarak, büyük kimyasal benzerliğe sahip ve aynı zamanda biyolojik aktivite açısından farklılık gösteren bir grup bileşikle uğraşmak gerekir. Örneğin E vitamini, benzer şekilde 8 tokoferol içerir. kimyasal özellikler, ancak farklı biyolojik etki; karotenler ve karotenoid pigmentler grubu 80'e kadar bileşik içerir, bunlardan yalnızca 10'u bir dereceye kadar vitamin özelliklerine sahiptir.

4.Vitaminler farklı organik bileşik sınıflarına aittir. Bu nedenle onlar için genel grup reaksiyonları olamaz ve genel yöntemler araştırma.

5. Ek olarak, analiz, test numunesinde miktarı belirlenen vitamin içeriğinden (örneğin steroller ve D vitamini) çok daha fazla olabilen eşlik eden maddelerin varlığı nedeniyle karmaşık hale gelir. Gıda ürünlerindeki vitaminlerin belirlenmesindeki olası hataları ortadan kaldırmak için ekstraktlar genellikle eşlik eden bileşiklerden tamamen arındırılır ve vitamin konsantre edilir. Bunu yapmak için çeşitli teknikler kullanılır: analize müdahale eden maddelerin çökeltilmesi, adsorpsiyon yöntemleri, iyon değiştirme veya bölme kromatografisi, belirlenen bileşenin seçici ekstraksiyonu vb.

Son yıllarda HPLC yöntemi gıda ürünlerindeki vitaminlerin belirlenmesinde başarıyla kullanılmaktadır. Bu yöntem, çeşitli vitaminlerin ve bunların biyolojik olarak aktif formlarının eş zamanlı olarak ayrılmasına, tanımlanmasına ve miktarının belirlenmesine olanak tanıdığı ve analiz süresini kısalttığı için en umut verici yöntemdir.

Vitaminleri incelemek için fizikokimyasal yöntemler. Yöntemler, vitaminlerin fizikokimyasal özelliklerinin (floresan olma yetenekleri, ışık emilimi, redoks reaksiyonları vb.) kullanımına dayanmaktadır. Analitik kimya ve alet mühendisliğinin gelişmesi sayesinde, fizikokimyasal yöntemler neredeyse tamamen zaman alıcı ve pahalı biyolojik yöntemlerin yerini almıştır.

C vitamininin belirlenmesi. C vitamini (askorbik asit) gıdalarda hem indirgenmiş hem de oksitlenmiş formlarda bulunabilir. Dehidroaskorbik asit (DAA), gıdaların işlenmesi ve depolanması sırasında oksidasyon sonucu oluşabilmektedir ve bu da belirlenmesini gerektirir. Gıda ürünlerinde C vitamini belirlenirken, çeşitli metodlar: Oksidatif bazlı kolorimetrik, floresan, hacimsel analiz yöntemleri onarıcı özellikler AC ve HPLC.

AA'nın kantitatif tayininde en önemli nokta numune ekstraktının hazırlanmasıdır. Ekstraksiyon tamamlanmış olmalıdır. En iyi özütleyici, proteinleri çökeltme yeteneğine sahip olan% 6'lık bir metafosforik asit çözeltisidir. Asetik, oksalik ve hidroklorik asitler ve bunların karışımları da kullanılır.

1. AA'nın oksitlenmiş ve indirgenmiş formlarının toplam ve ayrı ayrı belirlenmesi için genellikle 2,4-dinitrofenilhidrazin reaktifinin kullanıldığı Roe yöntemi kullanılır. Oksitleyici ajanların etkisi altındaki AA (gulonik asit), DAC'ye ve ardından 2,4-dinitrofenilhidrazin ile turuncu renkli bileşikler oluşturan 2,3-diketogulonik asit haline dönüşür. 2,4-Dinitrofenilhidrazinin kendisi asit formunda bulunamayan bir bazdır. Ancak ilgili hidrazonlar alkalilerin etkisi altında yoğun renkli asit tuzlarına dönüşür. Bu yöntemle C vitamini belirlenirken indirgeyici maddelerin (glikoz, fruktoz vb.) varlığı müdahale eder. Bu nedenle ne zaman harika içerikİncelenen üründeki şekerleri belirlemek için kromatografi kullanılır, bu da belirlemeyi zorlaştırır.

Nitroform Asidoform

2. Son zamanlarda, toplam C vitamini içeriğinin (AA ve DAC toplamı) belirlenmesi için çok hassas ve doğru bir floresan yöntemi kabul görmüştür. AIBN, 350 nm'lik heyecan verici bir ışık dalga boyunda maksimum floresans sergileyen floresan bileşik kinoksalini oluşturmak üzere o-fenilendiamin ile yoğunlaşır.

o-Fenilendiamin DAK Kinoksalin

Oda sıcaklığında nötr bir ortamda kinoksalinin floresans yoğunluğu, AIBN konsantrasyonuyla doğrudan orantılıdır. AA'yı ölçmek için öncelikle AIBN'de oksitlenir. Bu yöntemin dezavantajı ekipmanın oldukça pahalı olmasıdır.

AA'nın redoks özelliklerine dayanan yöntemler.

3. AA'nın redoks özelliklerine dayanan yöntemlerden en yaygın olarak kullanılan yöntem mavi renkli 2,6-diklorofenolindofenol çözeltisi ile titrasyondur. AA'nın reaktifle etkileşiminin ürünü renksizdir. Yöntem her türlü ürünün analizinde kullanılabilir. Patates ve süt gibi doğal pigment içermeyen ürünleri analiz ederken görsel titrasyon kullanılır. Doğal boyaların mevcut olması durumunda potansiyometrik titrasyon veya indofenol-ksilen ekstraksiyon yöntemi kullanılır. İkinci yöntem, 2,6-diklorofenolindofenolün askorbik asit ile kantitatif renk giderimine dayanmaktadır. Fazla boya ksilen ile ekstrakte edilir ve ekstraktın optik yoğunluğu 500 nm'de ölçülür.

Sadece AK tepki veriyor. DAC öncelikle sistein ile azaltılır. AA'yı uzun süre pişirilmiş veya depolanmış gıdalarda bulunan indirgeyici maddelerden ayırmak için ekstraktlar formaldehit ile işlenir. Formaldehit, ortamın pH'ına bağlı olarak AA ve indirgeyici maddelerin yabancı safsızlıkları ile seçici olarak etkileşime girer (pH = 0). Bu yöntem kullanılarak AK ve DAC toplamı belirlenir.

AA'nın fotometrik tespiti için 2,6-diklorofenolindofenol de kullanılabilir. Reaktif çözeltisinin rengi mavidir ve AA ile etkileşimin ürünü renksizdir; Reaksiyon sonucunda mavi rengin yoğunluğu azalır. Optik yoğunluk 605 nm'de ölçülür (pH = 3,6).

4. AA'nın indirgeyici özelliklerine dayanan diğer bir yöntem, AA'nın Fe(3+)'yı Fe(2+)'ya indirgeme yeteneğini ve Fe(2+)'nin 2,2 ile yoğun kırmızı renkli tuzlar oluşturma yeteneğini kullanan kolorimetrik yöntemdir. '-dipiridil. Reaksiyon pH 3.6'da ve 70°C sıcaklıkta gerçekleştirilir. Çözeltinin optik yoğunluğu 510 nm'de ölçülür.

5. AA'nın Folin reaktifi ile etkileşimine dayanan fotometrik yöntem. Folin reaktifi fosfomolibdik ve fosfotungstik asitlerin bir karışımıdır; Bu, 640-700 nm'de absorbe eden molibden mavisinin oluşumuna dayanan iyi bilinen bir yöntemdir.

6. Oldukça hassas ve spesifik HPLC yöntemi, tüm gıdalardaki C vitamininin belirlenmesinde başarıyla kullanılabilir. Analiz oldukça basittir; yalnızca protein açısından zengin gıdaları analiz ederken öncelikle bunları ortadan kaldırmak gerekir. Tespit floresansla gerçekleştirilir.

C vitaminini belirlemek için yukarıdaki yöntemlere ek olarak, örneğin altın klorürle oksidasyon ve hidroksamik asitlerin oluşumu gibi bir dizi başka yöntem de vardır, ancak bu yöntemlerin pratik önemi yoktur.

Tiamin Tayini (B 1 ). Çoğu doğal üründe tiamin, difosfor ester - kokarboksilaz formunda bulunur. İkincisi, bir dizi karbonhidrat metabolizması enziminin aktif bir grubu olan protein ile belirli bağlardadır. Tiaminin kantitatif olarak belirlenmesi için, komplekslerin yok edilmesi ve incelenen vitaminin fizikokimyasal analiz için uygun serbest formda izole edilmesi gerekir. Bu amaçla asit hidrolizi veya enzimlerin etkisi altında hidroliz gerçekleştirilir. Protein açısından zengin nesneler hidroklorik asit içindeki proteolitik enzimlerle (pepsin) işlenir. Nesneler, ile yüksek içerik yağlar (domuz eti, peynir), çıkarmak için eter ile muamele edilirler (tiamin eterde pratik olarak çözünmez).

1. Gıda ürünlerinde tiaminin belirlenmesi için genellikle tiaminin alkalin bir ortamda potasyum hekzasiyanoferrat (3+) ile oksidasyonuna dayanan ve ultraviyole ışıkta güçlü bir şekilde floresans veren bir tiyokrom bileşiği oluşturan bir floresan yöntemi kullanılır. Floresansının yoğunluğu tiamin içeriğiyle doğru orantılıdır (uyarıcı ışığın dalga boyu 365 nm, yayılan ışık 460-470 nm'dir (mavi floresan)). Bu yöntemi kullanırken, bazı nesnelerin floresan bileşikleri içermesi nedeniyle zorluklar ortaya çıkar. İyon değiştirici reçineli kolonlar üzerinde saflaştırılarak uzaklaştırılırlar. Et, süt, patates, buğday ekmeği ve bazı sebzeleri analiz ederken herhangi bir temizliğe gerek yoktur.

Tiamin Tiyokrom

2. Tiamin, UV bölgesinde kendi emilimiyle karakterize edilir (sulu çözeltide 240 nm, etanolde 235 nm), bu da doğrudan spektrofotometri ile belirlenebileceği anlamına gelir.

3. HPLC, tiamin ve riboflavinin eş zamanlı tespiti için kullanılır.

Riboflavin tayini (B 2 ). Gıdalarda riboflavin esas olarak proteinlere bağlı fosfor esterleri formunda bulunur ve bu nedenle önceden proteolitik sindirim olmadan belirlenemez. Serbest riboflavin sütte önemli miktarlarda bulunur.

Riboflavin belirlenirken en yaygın olarak mikrobiyolojik ve fizikokimyasal (floresan) analiz yöntemleri kullanılır. Mikrobiyolojik yöntem spesifik, son derece hassas ve doğrudur; Tüm ürünler için geçerli olmakla birlikte uzun ömürlüdür ve özel koşullar gerektirir.

Fizikokimyasal yöntem, floresan maddeleri değerlendirme biçimleri açısından farklılık gösteren iki versiyonda geliştirilmiştir:

Doğrudan floresans seçeneği (riboflavinin floresans yoğunluğunun belirlenmesi) ve

· lumiflavin çeşidi.

1. Serbest riboflavin ve fosfor esterleri, 440-500 nm'lik uyarma ışık dalga boylarında karakteristik sarı-yeşil floresans sergiler. Riboflavin tayini için en yaygın kullanılan floresan yöntem bu özelliğe dayanmaktadır. Riboflavin ve esterleri, maksimum 530 nm'de çok benzer floresans spektrumları verir. Maksimumun konumu pH'a bağlı değildir. Floresan yoğunluğu önemli ölçüde pH'a ve solvente bağlıdır (riboflavin ve esterleri için farklıdır), bu nedenle ilk önce esterler yok edilir ve serbest riboflavin analiz edilir. Bu amaçla hidroklorik ve trikloroasetik asitlerle hidroliz, otoklavlama ve enzim preparatlarıyla muamele kullanılır.

UV ışığında riboflavinin sarı-yeşil floresansının yoğunluğu sadece konsantrasyonuna değil aynı zamanda çözeltinin pH değerine de bağlıdır. Maksimum yoğunluğa pH=6-7'de ulaşılır. Bununla birlikte, ölçüm 3 ila 5 arasındaki pH değerinde gerçekleştirilir, çünkü bu aralıkta floresans yoğunluğu yalnızca riboflavin konsantrasyonu ile belirlenir ve diğer faktörlere (pH değerleri, tuz konsantrasyonları, demir, organik safsızlıklar vb.) bağlı değildir. .

Riboflavin ışıkta kolaylıkla yok edilir, tayin ışıktan korunan bir yerde ve pH değeri 7'yi geçmeyen bir ortamda gerçekleştirilir. Direkt floresans yönteminin riboflavin içeriği düşük olan ürünler için geçerli olmadığını belirtmek gerekir.

2. Lumiflavin varyantı, alkali bir ortamda ışınlandığında riboflavin özelliğinin, floresans yoğunluğu kloroformla (mavi floresan, 460-470 nm) ekstraksiyonundan sonra ölçülen lumiflavin'e dönüşme özelliğinin kullanımına dayanmaktadır. Belirli koşullar altında toplam riboflavin'in %60-70'i lumiflavin'e dönüştürüldüğünden, analiz yapılırken test ve standart çözeltiler için aynı olan sabit ışınlama koşullarının sağlanması gerekir.

Riboflavin Lumiflavin

B 6 vitamininin belirlenmesi . Vitamini belirlemek için aşağıdaki yöntemler kullanılabilir:

1. Doğrudan spektrofotometri. Piridoksin hidroklorür, pH = 5'te 292 nm'de (e = 4,4 10 3) kendi emilimiyle karakterize edilir.

2. Kjeldahl yöntemi. Belirleme, vitaminin oksidasyonu sırasında oluşan amonyak ile gerçekleştirilir.

3. Mavi renkli indofenollerin oluşumuyla sonuçlanan, pH 8-10'da 2,6-diklorokinonkloroimin (Gibbs reaktifi) ile reaksiyona dayanan fotometrik yöntem. İndofenoller metil etil keton ile ekstrakte edilir ve ekstraktın optik yoğunluğu 660-690 nm'de ölçülür (serbest para pozisyonuna sahip fenoller Gibbs reaksiyonunu verir).

İndofenol

4. Işınlandığında piridoksin ve piridoksaminin mavi floresans göstermesi ve piridoksalın mavi floresans göstermesi gerçeğine dayanan bir floresan yöntemi.

B 9 vitamininin belirlenmesi. Gıda ürünlerinde doku ve vücut sıvılarında folatların belirlenmesi önemli zorluklar içermektedir. bu nesnelerde genellikle bağlı formda bulunurlar (poliglutamatlar olarak); ek olarak çoğu form atmosferik oksijenin, ışığın ve sıcaklığın etkilerine karşı hassastır. Folatları hidrolizden korumak için askorbik asit varlığında hidroliz yapılması tavsiye edilir.

Gıda ürünlerindeki folatlar fiziksel, kimyasal ve mikrobiyolojik yöntemlerle belirlenebilmektedir. Kolorimetrik yöntem, p-aminobenzoik asit ve ilgili maddeleri oluşturmak için pteroilglutamik asidin parçalanmasına ve bunların daha sonra renkli bileşiklere dönüştürülmesine dayanır. Ancak spesifiklik eksikliği nedeniyle bu yöntem esas olarak farmasötiklerin analizi için kullanılır.

Folatların ayrılması, saflaştırılması ve tanımlanması için kolonlarda, kağıtta ve ince bir adsorban tabakasında kromatografi yöntemleri de geliştirilmiştir.

PP vitamininin belirlenmesi. Gıda ürünlerinde nikotinik asit ve amidi, koenzimlerin bir parçası olarak hem serbest hem de bağlı formlarda bulunur. Niasinin kantitatif tayini için kimyasal ve mikrobiyolojik yöntemler, onun en eksiksiz izolasyonunu ve dönüşümünü içerir. ilgili formlar hücrelerin karmaşık organik maddesinin bir parçası olan serbest nikotinik asit haline gelir. Niasinin bağlı formları, ısıtıldığında asit çözeltilerine veya kalsiyum hidroksite maruz bırakılarak salınır. 0,1 MPa basınçta 30 dakika boyunca bir otoklavda 1 M sülfürik asit çözeltisi ile hidroliz, bağlı niasin formlarının tamamen salınmasına ve nikotinamidin nikotinik aside dönüşümüne yol açar. Bu işleme yönteminin daha az renkli hidrolizat ürettiği, et ve balık ürünlerinin analizinde kullanılabileceği tespit edilmiştir. Un, tahıllar, unlu mamuller, peynirler, gıda konsantreleri, sebzeler, meyveler ve meyvelerdeki niasinin belirlenmesi için kalsiyum hidroksit ile hidroliz tercih edilir. Ca(OH)2, soğutulmuş çözeltilerde neredeyse tamamen çözünmeyen şekerler ve polisakkaritler, peptitler ve glikopeptitlerle bileşikler oluşturur. Sonuç olarak, Ca(OH)2'nin işlenmesiyle elde edilen hidrolizat, asit hidrolizatına göre kimyasal belirlemeyi engelleyen daha az madde içerir.

1. Niasinin belirlenmesine yönelik kimyasal yöntem, iki aşamada meydana gelen Koenig reaksiyonuna dayanmaktadır. İlk aşama, nikotinik asidin piridin halkasının siyanojen bromür ile reaksiyonu, ikincisi ise aromatik aminlerle etkileşim sonucu renkli bir glutakonik aldehit türevinin oluşmasıdır. (Eklendikten hemen sonra nikotinik asit siyanojen bromür, glutakaldehitin sarı rengi ortaya çıkar. Reaksiyon karışımına katılan aromatik aminlerle etkileşimi sonucunda amine bağlı olarak (benzidin - kırmızı, sülfanilik asit - sarı) yoğun sarı, turuncu veya kırmızı renkte olan dianiller oluşur. Koenig reaksiyonu, piridin ve türevlerinin serbest a-pozisyonuyla fotometrik tespiti için kullanılır. Yöntemin dezavantajı reaksiyon hızının düşük olması nedeniyle süresidir.